鮟鱇鱼皮中胶原蛋白的提取及性质研究

采用0.5 mol/L醋酸提取,结合NaCI沉淀法从鮟鱇鱼皮中提取酸溶性胶原蛋白(ASC).并对鮟鱇鱼皮胶原蛋白与Sigma公司的牛跟腱I型胶原蛋白(BATC)进行比较,探讨二者在热变性温度、溶解度、黏度及氨基酸组成等方面的差异.SDS-PAGE结果显示ASC有2条α链(α1和α2链)、β链和γ链,表明该胶原为典型的I型胶原蛋白.DSC分析显示两种胶原的热变性温度分别为22.09℃和38.13℃.氨基酸组成分析结果是亚氨基酸含量ASC低于BATC,分别为14.69%和21.59%;甘氨酸含量相近,分别占所有氨基酸总数的40.05%和38.97%.溶解度结果显示ASC和BATC分别在pH 3和pH 4时达到最大值,在pH 7时两者都呈现最小溶解度;NaCl含量对两者溶解度的影响相同,当其含量低于2%时对溶解度的影响不明显,而随着NaCl舍量的增加,溶解度迅速下降.     

不同提取方法对东北林蛙皮胶原蛋白理化特性的影响

以东北林蛙皮为原材料,用乙酸和胃蛋白酶两种方法对其中所含的胶原蛋白进行提取,最终得到两种胶原蛋白:酸溶性胶原蛋白（ASC）和酶溶性胶原蛋白（PSC）,并对这两种胶原蛋白的理化性质及功能特性进行比较研究。结果发现,ASC和PSC在234 nm附近都有强吸收峰,符合胶原蛋白的特征;红外光谱发现ASC在3346.0、2952.0、1662.0、1548.0、1242.0 cm^-1有吸收峰,PSC在3322.0、2944.0、1662.0、1551.0、1236.0 cm^-1有吸收峰,证明这两种胶原蛋白都存在酰胺A、酰胺B、酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ、酰胺Ⅲ,内部三螺旋结构都保留完整;氨基酸组成表明ASC和PSC都含有18种氨基酸,包括人体所需的8种必需氨基酸,但是组成略有差异;SDS-PAGE电泳结果显示,这两种胶原蛋白都存在β、α1和α2链,符合Ⅰ型胶原蛋白的结构特征;PSC的变性温度较ASC要高,但是保湿率较低,它们的吸湿率和相对溶解度差异不显著（p>0.05）;以上结果表明不同提取方法对东北林蛙皮胶原蛋白的结构、功能特性有一定影响,但是不影响胶原蛋白的品质。      

中国林蛙蛙皮肽提取工艺的研究

以中国林蛙的皮肤为研究对象,从中提取出一种具有抗菌作用的蛙皮肽。在单因素实验的基础上,通过正交实验筛选出提取蛙皮肽的最佳工艺条件,即甲醇浓度80%,液固比为6,提取时间24h,提取次数3次。      

中国林蛙皮抗菌肽提取条件的优化研究

本研究以林蛙干皮为原料,采用甲醇、乙酸和磷酸盐三种浸提液提取有抑菌活性的多肽,并分别以提取温度、时间、液料比、pH值四因素对每种浸提液的提取方法进行三水平正交试验, 以进一步精纯后产物的抑菌活力为指标,探索林蛙抗繭肽的最优分离纯化工艺.结果表明,三种浸提液的最优条件分别是:甲醇法为浸提时间24h、温度0℃、液料比为22.5(w/v)、pH5.4;乙酸法为24h、0℃、液料比22.5、pH3.0;磷酸盐法为24h、20℃、液料比22.5、pH6.4.其中甲醇法浸提产物的抑菌活性最佳,粗提品经G-25层析后,力活提高了5倍,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用.     

林蛙皮胶原蛋白肽的制备工艺

以长白山林蛙皮为原料,选用碱性蛋白酶,对酶解温度、酶解时间、加酶量、pH、料液比五个因素来研究,经实验确定最佳酶解条件为:酶解温度50℃,加酶量0.5%,酶解时间3h,pH9.0,料液比1∶3(g/mL),脱色脱腥处理后,喷雾干燥制得微黄色粉末状林蛙皮胶原蛋白肽。结果表明,羟脯氨酸含量为20.69μg/mL,分子量分布在3.5ku以下。     

响应曲面法优化碱性蛋白酶提取林蛙残体胶原蛋白

以提取林蛙油后的剩余林蛙干残体为原料,通过碱性蛋白酶法提取胶原蛋白。以胶原蛋白提取率为指标,对影响胶原蛋白提取pH 值、加酶量、酶解温度和酶解时间4 因素进行研究,在单因素试验基础上,采用响应曲面分析法,得出最优酶提取工艺条件,并根据实际生产优化为：pH10、加酶量1.5%、酶解温度50℃、酶解时间2.5h,在此工艺条件下,林蛙残体胶原蛋白提取率为55.38%,胶原蛋白成品的纯度64.15%。     

响应面法优化林蛙皮中透明质酸的提取工艺

以中国林蛙皮为原料,用透明质酸提取得率作为衡量提取工艺的指标。在单因素实验的基础上,在料液比1∶40（g/m L）的条件下,利用Box-Benhnken中心组合设计原理和响应面分析法探索了双酶（碱性蛋白酶+胰蛋白酶）水解的酶解温度、酶解时间(h_{碱性蛋白酶}=h_胰蛋白酶)、加酶量（碱性蛋白酶∶胰蛋白酶=1∶1）3个因素作为自变量及其交互作用对响应值透明质酸得率的影响,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型,并确定最佳提取工艺条件为加酶量55000 U/g、酶解时间14 h、酶解温度50℃,在此条件下,平均透明质酸提取得率为27.6839 mg/g,葡萄糖醛酸的含量为13.8420 mg/g,转化成百分含量为42.2%。说明响应面优化双酶法提取林蛙皮透明质酸条件准确可行。      

中国林蛙皮抗菌肽的提取纯化及抑菌活性检测

采用酸化甲醇法提取中国林蛙皮肤中的抗菌肽,并采用凝胶色谱的方法对提取物进行纯化。结果表明：采用Sephadex G-50 和Sephadex G-25 串联凝胶层析法获取的F2 组分,即纯化后的抗菌肽的抑菌率可达90% 以上。抗菌肽对革兰氏阴性菌和阳性菌以及真菌均有一定抑制效果。对各受试菌株的最小抑菌浓度(MIC)分别为：金黄色葡萄球菌和链球菌为0.2mg/mL;枯草芽孢杆菌和大肠杆菌为0.4mg/mL;蜡样芽孢杆菌为0.8mg/mL;白色念珠菌为1.2mg/mL;酿酒酵母和毛霉为1.5mg/mL;根霉为2.0mg/mL。     

猪皮中胶原蛋白的提取与结构鉴定

以猪皮为原料,使用酶法提取胶原蛋白,对提取条件和过程进行筛选和优化,并对胶原产物的结构性质进行表征。结果表明,胶原蛋白产物的提取率为65.33%;纯度为87.38%;热变性温度在118.79℃;紫外最大吸收波长为203 nm;相对分子质量为3.63×10~5 g/mol;红外光谱和圆二色谱结果显示,产物具有典型的胶原蛋白吸收峰,说明提取出的胶原蛋白三螺旋结构保存完整;十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)结果显示所得胶原产物主要由3种亚基组分组成。     

鱼皮胶原蛋白提取研究进展

本文综述了鱼皮胶原蛋白的特性,国内外提取研究的最新进展以及存在的问题,并对今后的研究前景进行了展望.     

超声波-双酶法协同提取林蛙皮多糖的工艺优化

以野生中国林蛙皮为原料,优化超声波-双酶法协同提取林蛙皮多糖的工艺参数。结果表明:超声波提取优化工艺条件为料液比1∶40（g/mL）,超声功率600W,超声处理时间25min,提取多糖得率为1.18%。在超声波优化结果基础上,进行双酶法处理,得出最佳酶解条件是pH9.0,酶解温度45℃,碱性蛋白酶添加量2.3%、胰蛋白酶添加量2.8%,酶解时间4h,多糖得率为2.286%。由此可见,超声波和酶法协同处理是提取林蛙皮多糖的一种有效的提取方法。      

许氏平鲉鱼皮胶原蛋白与胶原肽的制备及特性研究

目的从许氏平鲉鱼皮中制备胶原蛋白及胶原肽,并对其特性进行初步探讨。方法通过氨基酸组成、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及扫描电镜分析探讨鱼皮胶原蛋白的结构特征;制备不同分子量胶原肽组分SCH 1(Mw2000 U)与SCH 2(Mw2000 U),测定其起泡性、吸水性及对H2O2诱导L929细胞氧化损伤的保护作用。结果氨基酸分析表明鱼皮胶原蛋白亚氨酸含量为16.7%;FTIR表明样品基本保持了天然三螺旋结构;扫描电镜分析显示冷冻干燥胶原蛋白具有多孔状结构。大分子量SCH 1的起泡性较好,而低分子量SCH 2具有较好的吸湿性。SCH对H2O2引起的细胞损伤产生一定的保护作用,并呈现出剂量效应关系,结论许氏平鲉鱼皮胶原蛋白为I型胶原蛋白,其胶原肽具有良好的起泡性与吸湿性,可有效抵御H2O2引起的细胞氧化损伤。     

抗氧化活性林蛙胎卵多肽酶解酶的筛选

以东北林蛙胎卵为原料,以酶解液对DPPH自由基和羟自由基(.OH)清除率为指标,分别研究木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶和胰蛋白酶在最佳酶作用条件下酶解时间对酶解液清除DPPH自由基、.OH的影响,筛选出适合生产抗氧化活性林蛙胎卵蛋白肽的碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶,再经过复合双酶酶解林蛙胎卵实验,结果表明,以中性蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶解林蛙胎卵3h得到肽液的.OH清除率与DPPH自由基清除率最高,达到80.91%和70.45%。     

微波辅助提取林蛙卵油的工艺优化及脂肪酸组成分析

以林蛙卵为原料,以无水乙醇为提取剂,研究微波法对林蛙卵油提取率的影响。在单因素试验的基础上,进行响应面优化试验,研究料液比、浸泡时间、微波功率对林蛙卵油提取的影响。结果表明,提取最佳工艺条件为料液比1∶9.82(g/mL)、浸泡时间3.33 h、微波时间30 min、微波功率600 W;林蛙卵油的提取率可达到(20±0.67)%。与其他林蛙卵油提取方法比较,微波法辅助提取林蛙卵油具有得率高的优点。对得到的林蛙卵油采用气相色谱-质谱分析检测出27种脂肪酸,不饱和脂肪酸质量分数54.98%,其中以亚油酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸、二十碳四烯酸、亚麻酸、棕榈反油酸、二十二碳五烯酸含量较高。     

中国林蛙蛙皮肽抗菌性质及其机理的研究

本实验对从中国林蛙的皮肤中提取的蛙皮肽的抗菌性质及其机理进行了研究。结果表明,该蛙皮肽抗菌谱较广,对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、酵母菌都有较好的抗菌效果,其抗菌活性具有很强的热稳定性,且在酸性条件下抗菌活性强,当pH 值大于8 时丧失抗菌活性。对经蛙皮肽处理的枯草杆菌作电镜扫描检查,发现细菌细胞壁出现破损或穿孔,而对照组细菌壁结构完整,表明该蛙皮肽的抗菌机制是通过破坏细菌细胞壁,使细胞质外流而致菌体死亡。     

酶法提取猪皮胶原及其结构表征

利用胃蛋白酶提取猪皮胶原 ,并测定了所提取猪皮胶原的分子量、等电点、变性温度、紫外及红外吸收光谱 ,结果表明 :提取的猪皮胶原最大程度地保持了其天然结构 ,适合用作生物医学材料。