酶解玉米黄粉制备多肽的工艺研究

对酶法水解玉米黄粉蛋白制备多肽的工艺进行了研究试验以水解度DH%和酸溶性肽得率YASP%为指标确定了最佳酶解工艺条件。结果表明,在pH6.8,酶解温度54℃,加酶量1.2ml,底物浓度1%的条件下酶解2h,可使水解度和酸溶性肽得率分别达到28.94%和54.18%。酶解液经分离、脱盐、脱苦、脱色、浓缩和干燥等工序,可制成颜色淡黄、无异味的玉米黄粉多肽,是很有前景的功能性食品。      

饲养大鲵蛋白水解工艺研究

采用酶法水解大鲵蛋白制备蛋白粉,以水解度为指标,通过单因素试验和正交设计试验,研究了饲养大鲵蛋白的水解条件。结果表明:采用碱性蛋白酶:木瓜蛋白酶=1:3(g/g)为试验用酶,水解的最佳条件为料液比1:7、酶浓度2400 U/g、pH7.5、水解时间5 h、水解温度55℃,该条件下水解度可达36.18%。     

大鲵活性肽酶法制备工艺优化及抗氧化性分析

研究了碱性蛋白酶水解制备大鲵活性肽的工艺条件以及大鲵活性肽的理化性质。以水解度为指标,通过Box-Behnken实验设计方法,确定最佳工艺条件为:酶解温度50℃,酶解时间1.5 h,酶添加量70 U/g,p H8.91,液料比2∶1（m L/g）,蛋白酶解液的水解度值为DH=19.61%±0.12%。所得大鲵活性肽的蛋白质含量为52.40%±1.28%。HPLC分析可知该大鲵活性肽的分子量多分布在1000.00 u以内。在30 mg/m L,大鲵活性肽对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为81.83%、56.27%。      

酶法水解大鲵蛋白的工艺研究

选择中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白水解酶、风味酶水解大鲵蛋白,分析酶的种类、酶解pH值、时间、温度、料液比和酶浓度对水解效果的影响.以水解度为指标通过正交试验确定酶水解大鲵的最佳工艺:选用动物蛋白水解酶,在pH8.0,水解温度50%,水解时间7h,料液比1:5,酶浓度2000U/g条件下,水解度可达44.05%.     

复合酶法制备大鲵多肽的研究

为了制备具有生物活性的大鲵多肽,本研究以大鲵肌肉为原料,采用单因素实验与响应面分析法,以水解度和多肽得率为指标,对不同蛋白酶及其不同组合、酶添加量、酶解时间、温度、料液比和初始p H对大鲵肌肉酶解的影响进行了研究。结果表明,风味蛋白酶和中性蛋白酶为最佳酶解组合;最佳酶解工艺条件为:风味蛋白酶和中性蛋白酶添加量均为6000 u/g,酶解温度55℃,酶解时间3 h,料液比(w/w)1∶8,初始p H=6.86。优化条件下多肽得率为90.28%。      

酶解脱脂虾粉制备多肽最佳工艺条件的研究

对酶法水解脱脂虾粉制备多肽的工艺进行了研究，试验以水解度(DH/%)和酸溶性肽得率(YASP／％)为指标，确定了用胰蛋白酶—木瓜蛋白酶混合酶法水解脱脂虾粉制取多肽的最佳酶解工艺条件为：胰蛋白酶—木瓜蛋白酶的酶量比为1：2(W／W)，总酶量为6000U，脱脂虾粉底物浓度为4％，pH7．0，温度60℃，反应时间6h的条件下，可使水解度和酸溶性肽得率分别达到25．91％和38．46％。     

胶原多肽制备工艺优化的研究

采用不同测定方法确定明胶等电点为pH4.5～4.6.以明胶为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备胶原多肽并确定最佳工艺条件.结果表明:胶原多肽制备的最适条件为pH7.0.温度60C,明胶浓度6%,加酶量2000u/g,水解时间6h,此时多肽得率为85.38%,水解度为45.87%.傅里叶变换红外光谱分析表明,胶原多肽具有胶原和蛋白多肽的双重特征.     

胶原多肽制备工艺优化的研究

采用不同测定方法确定明胶等电点为pH4.5~4.6。以明胶为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备胶原多肽并确定最佳工艺条件。结果表明:胶原多肽制备的最适条件为pH7.0,温度60℃,明胶浓度6%,加酶量2000u/g,水解时间6h,此时多肽得率为85.38%,水解度为45.87%。傅里叶变换红外光谱分析表明,胶原多肽具有胶原和蛋白多肽的双重特征。      

双酶水解法制备鹿胎盘活性多肽

采用双酶水解的方法制备鹿胎盘生物活性肽。以水解度和酸溶性肽得率为指标,确定了木瓜蛋白酶与胰蛋白酶为最优酶系组合。通过正交实验得出酶解工艺条件为:pH 7.0、温度52℃、酶活添加量6 000u/g(料)、底物浓度10%、酶比为1∶1,水解时间3 h,在此条件下对鹿胎盘进行水解,水解度为34.5%,酸溶性多肽得率为81.56%。     

采用木瓜蛋白酶制备乌鸡蛋白肽的研究

探讨了各单因子对木瓜蛋白酶酶解乌鸡蛋白质的影响及水解度与肽得率、总氮得率之间的关系。结果表明,pH变化对肽得率影响很小;随着时间延长,水解度和总氮得率不断升高,肽得率3h后达到平衡阶段;温度<70℃,随着温度的提高、酶用量的增加,水解度、肽得率和总氮得率均增加,但总氮得率增加明显;随着底物浓度的减少,水解度几乎不变,而肽得率和总氮得率均增加。综合考虑,最佳水解条件为温度70℃,酶用量E/S4000U/g,底物浓度7%。酶解3h后,酶解液中必需氨基酸37.41%,氨基酸总量61.01mg/mL,其中游离氨基酸9.89%,肽含量90.11%。      

大鲵皮胶原蛋白肽的抗原反应特性研究

目的 探讨用酶法提取大鲵皮胶原蛋白肽,并确定大鲵皮胶原蛋白肽的抗原性,为进一步研究大鲵皮胶原蛋白肽的生物相容性提供依据。方法 采用酶法提取获得大鲵皮胶原蛋白肽,并对得到的胶原蛋白肽进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析确定其分子量分布范围。将得到的胶原蛋白肽与弗氏佐剂混合乳化后经免疫程序免疫ICR小鼠,采用抗体酶联免疫试剂盒检测小鼠血清中IgG、IgA、IgM以及IgE含量。结果 所得到的大鲵皮胶原蛋白为I型胶原蛋白,酶解后的胶原蛋白肽分子量均小于10 kDa,多数肽分子量集中在2000~5000 m/z,检测血清中IgA、IgG、IgM和IgE 4种免疫球蛋白的浓度范围分别是71.63~85.90 μg/mL、705.19~857.04 ng/mL、71.63~85.90 ng/mL与224.54~261.0 μg/mL。结论 大鲵皮胶原蛋白肽对ICR小鼠呈现出较弱的抗原性。     

超滤对大鲵多肽抗氧化活性的影响

为了获得具有高抗氧化性的大鲵多肽,以大鲵肌肉为原料,经复合酶（风味蛋白酶和中性蛋白酶）酶解后,水解度达到44.12%,制得多肽得率为90.28%的大鲵多肽酶解液,用截留分子量分别为20、5、2、0.3 ku的超滤膜将其分离成5个分子量段,研究不同分子量段大鲵多肽对DPPH·、·OH和O-2·清除能力的影响。结果表明:不同分子量段的大鲵多肽组分的抗氧化能力大小顺序为:0.3² ku组分>2⁵ ku组分>小于0.3 ku组分>5²0 ku组分。分子量为0.3² ku的大鲵多肽抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH和O-2·的EC50分别为0.4、0.7、1.5 mg/m L。因此,采用截留分子量为2 ku和0.3 ku的超滤膜可以分离得到具有高抗氧化活性的大鲵多肽。      

大鲵肝肽酒制备及其对小鼠酒后肝脏保护作用研究

以大鲵肝脏和白酒为原料制备大鲵肝肽酒,通过酶解法制备不同分子质量肝肽,对其体外乙醇脱氢酶（ADH）激活活性、体外抗氧化活性和溶解度进行测定,并采用生理盐水、白酒、大鲵肝肽酒分别灌胃小鼠,对小鼠肝脏及血清中相关生化指标进行测定。结果表明,分子质量<3 000 Da肝肽（GSLP-Ⅲ）对ADH激活率最高（83.53%）,其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）、羟自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2-·）清除率均>83.50%,还原力最高（吸光度值0.44）,在53%vol白酒中溶解度较高（94.35%）。与白酒组小鼠相比,大鲵肝肽酒组小鼠肝脏乙醇脱氢酶（ADH）、乙醛脱氢酶（ALDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活力、还原型谷胱甘肽（GSH）含量分别提高66.58%、26.84%、15.84%、36.92%,丙二醛（MDA）、甘油三酯（TG）含量分别降低17.37%、26.39%,血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）活性分别降低21.82%、23.61%,说明大鲵肝肽酒对小鼠酒后肝脏具有一定的保护作用。     

大鲵黏液酶解产物的制备及其抗疲劳作用研究

以大鲵黏液为原料,采用复合蛋白酶进行酶解,研究其最佳酶解条件以及酶解产物抗疲劳作用。结果表明,酶解大鲵黏液的最佳工艺条件为复合酶加量为0.5%(质量比)及底物浓度为0.1mg/mL时,酶解时间2h,pH8.0,温度65℃。时间飞行质谱表明酶解产物为分子量小于4000,苯酚硫酸法测定其为低聚糖肽。将低聚糖肽给小鼠灌胃15d后进行小鼠负重游泳实验,结果显示大鲵低聚糖肽组使小鼠游泳力竭时间达到103min(P<0.01),肝糖原的消耗量比空白对照组减少65.0%,肌肉中乳酸的量比空白对照组减少了24.4%。结果表明,大鲵低聚糖肽具有显著抗疲劳作用。     

大鲵皮胶原蛋白肽的结构特性及其对乙醇诱导肝损伤小鼠的保护作用

研究了大鲵皮胶原蛋白肽结构特性及其对乙醇诱导肝损伤小鼠的保护作用。大鲵皮经胃蛋白酶水解制备胶原蛋白,经木瓜蛋白酶水解制备大鲵皮胶原蛋白肽。紫外光谱及红外光谱结果表明,大鲵皮胶原蛋白肽具有胶原蛋白的三股螺旋结构。SDS-PAGE结果表明大鲵皮胶原蛋白肽分子量低于55ku。大鲵皮胶原蛋白肽低（50mg/（kg·d））、高（150mg/（kg·d））剂量组可显著抑制小鼠乙醇诱导产生的血清中AST、ALT活性的升高,显著抑制肝组织MDA含量升高,并且抑制肝组织中SOD活性的下降。组织病理表明,乙醇诱导肝损伤模型组小鼠肝细胞明显肿胀变形,肝细胞索紊乱,伴有炎症细胞侵润,大鲵皮胶原蛋白肽各剂量组的肝细胞排列规则、肝细胞索清晰。结果表明,大鲵皮胶原蛋白肽具有保护乙醇诱导小鼠肝损伤的作用。      

响应面法优化大鲵鱼油水酶法提取工艺

通过单因素实验考察中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶对大鲵油提取率的影响,确定木瓜蛋白酶为实验用酶;采用中心组合实验（CCD）对酶解工艺进行优化,确定酶解的最适工艺条件为:料液比为1∶1（w/w）,酶添加量为6800 U/g,p H5.8,酶解温度为50℃,酶解时间为130 min,在优化条件下大鲵油提取率为93.52%。对水酶法提取的大鲵油进行理化、感官分析,结果表明粗制大鲵油产品质量达到SC/T3502-2000二级粗鱼油指标要求。      

酶法水解油茶籽粕制备油茶籽多肽的研究

以冷榨脱脂油茶籽粕为原料,采用胃蛋白酶水解法对油茶籽多肽的制备条件进行了研究.在单因素试验基础上,应用正交试验确定胃蛋白酶水解油茶籽粕制备油茶籽多肽的最佳工艺条件为:酶解温度40 ℃,酶解时间3 h,加酶量15 000 U/g,固液比1:30.在此最优条件下进行验证试验,油茶籽多肽产率达到61.8%.     

大鲵低聚糖肽性质初步研究

采用化学方法对大鲵低聚糖肽的氨基酸组成、糖组成及糖肽连接方式进行了初步研究。结果表明,大鲵低聚糖肽含蛋白量为80.01%、总糖含量为15.15%。其含有的氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸及唾液酸分别为3.39%、0.65%、2.45%和0.60%。其氨基酸组成中,苏氨酸的含量最高,达13.1%,其次是脯氨酸、丙氨酸、亮氨酸、精氨酸、苯丙氨酸等。大鲵低聚糖肽的β-消旋反应和血凝集反应,表明大鲵低聚糖肽中糖肽键以O-连接的形式存在。     

大鲵肌肉ACE抑制肽的制备及其稳定性

以大鲵肌肉为原料,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率为评价指标,通过单因素试验筛选得到3种效果较佳的单酶。在此基础上,借助混料试验,对三酶复合的配比进行优化。当风味蛋白酶、中性蛋白酶与菠萝蛋白酶质量比为0.54︰0.23︰0.23时,产物具有最高的ACE抑制率,IC50值为0.55 mg/mL。探究金属离子和体外模拟胃肠消化道酶系对对产物ACE抑制率稳定性的影响,结果显示,Zn^2+、Al^3+、Fe^2+离子能显著降低大鲵多肽的ACE抑制率,胃蛋白酶系对大鲵多肽的ACE抑制率影响较小,但胰蛋白酶系能显著降低ACE抑制率。