养殖大鲵酒复合酶解工艺优化及其稳定性

以大鲵肉和白酒为原料优化养殖大鲵酒的制备工艺并考察大鲵酒的稳定性。采用生物蛋白酶酶解大鲵肉制备酶解液,考察酶种类、加酶量、酶解时间、酶解温度、料液比以及pH值对大鲵肉水解度和酶解液中肽得率的影响,并采用正交试验优化得到最佳酶解工艺参数。将所得酶解液经冷冻干燥制成质量可控肽粉,加入到白酒中配制成粗大鲵酒,选用皂土、明胶、蛋清粉为澄清剂进行澄清处理得大鲵酒。试验结果表明,选用风味蛋白酶和中性蛋白酶(酶活力比为1∶1)进行复配,肽得率最高;正交试验优化得大鲵肉最佳酶解工艺条件:复配蛋白酶加酶量6 000 U/g,温度50℃,pH7,酶解3 h,料液比1∶4(g/mL),此条件下肽得率达80.28%。大鲵酒澄清剂考察试验显示,添加质量浓度为0.2 g/L皂土的大鲵酒透光率近90%,大鲵酒处理前后肽含量分别为16.63 mg/mL和14.09 mg/mL;稳定性试验显示在常温25℃较稳定,感官分析大鲵酒风味变化很小。     

复合酶法制备大鲵多肽的研究

为了制备具有生物活性的大鲵多肽,本研究以大鲵肌肉为原料,采用单因素实验与响应面分析法,以水解度和多肽得率为指标,对不同蛋白酶及其不同组合、酶添加量、酶解时间、温度、料液比和初始p H对大鲵肌肉酶解的影响进行了研究。结果表明,风味蛋白酶和中性蛋白酶为最佳酶解组合;最佳酶解工艺条件为:风味蛋白酶和中性蛋白酶添加量均为6000 u/g,酶解温度55℃,酶解时间3 h,料液比(w/w)1∶8,初始p H=6.86。优化条件下多肽得率为90.28%。     

酶法水解大鲵蛋白的工艺研究

选择中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、动物蛋白水解酶、风味酶水解大鲵蛋白,分析酶的种类、酶解pH值、时间、温度、料液比和酶浓度对水解效果的影响.以水解度为指标通过正交试验确定酶水解大鲵的最佳工艺:选用动物蛋白水解酶,在pH8.0,水解温度50%,水解时间7h,料液比1:5,酶浓度2000U/g条件下,水解度可达44.05%.     

Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的工艺研究

研究并优化采用Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的工艺条件。以酶解温度、时间、pH值、加酶量、料液比为因素,以水解度为指标,采用正交试验对酶解工艺参数进行优化。结果表明,利用Protamex复合蛋白酶酶解猪骨的最佳条件是:酶解温度45℃、pH7.0、酶解时间6 h、加酶量0.4%(W/W)、料液比1∶10(W/V)。在此条件下,水解度可达到10.08%。研究结果为工业化猪骨副产物的综合利用提供理论依据和技术支持。     

双酶分步酶解谷朊粉制备短肽的研究

本文通过比较酶种类、加酶量、底物浓度、酶解温度、酶解时间对短肽得率和水解度的影响,采用二次回归正交旋转组合设计优化分步酶解制备谷朊粉短肽的最佳工艺。在复合蛋白酶(Protamex)水解谷朊粉91.50 min后加入中性蛋白酶(Neutrase)继续酶解121.50 min,Protamex添加量为665.00 U/g底物,Neutrase添加量为5 290.00 U/g底物,水解温度50℃,质量浓度12%,在此条件下,短肽得率为69.88%,水解度25.74%。经高效液相色谱测定,分子质量小于1 000 Da的水解产物占100%。采用Protamex与Neutrase分步酶解谷朊粉制备谷朊粉短肽,与现有制备谷朊粉短肽方法相比,避免了后续脱盐步骤,简化工艺,且具有制备条件温和,TCA-NSI和DH高,纯度高,分子量集中分布于1 000 Da以下等特点。     

大鲵活性肽酶法制备工艺优化及抗氧化性分析

研究了碱性蛋白酶水解制备大鲵活性肽的工艺条件以及大鲵活性肽的理化性质。以水解度为指标,通过Box-Behnken实验设计方法,确定最佳工艺条件为:酶解温度50℃,酶解时间1.5 h,酶添加量70 U/g,p H8.91,液料比2∶1(m L/g),蛋白酶解液的水解度值为DH=19.61%±0.12%。所得大鲵活性肽的蛋白质含量为52.40%±1.28%。HPLC分析可知该大鲵活性肽的分子量多分布在1000.00 u以内。在30 mg/m L,大鲵活性肽对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为81.83%、56.27%。     

酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺

利用酶工程技术,以鱿鱼皮为原料,研究制备鱿鱼皮胶原蛋白肽粉。选用胃蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和alcalase蛋白酶进行试验,以产品得率和肽及氨基酸含量为评价指标,从5种蛋白酶中筛选中性蛋白酶作为水解用酶。进行不同料液比、不同加酶量和不同酶解时间的单因素试验,初步确定料液比1︰6 (kg/L),加酶量600 U/g,酶解时间6 h。在此基础上进行加酶量、温度、pH和时间的四因素三水平正交试验,确定最佳酶解条件:加酶量600 U/g,温度45℃, pH 6.0,酶解时间4 h。酶解得到的胶原蛋白肽粉呈淡黄色粉末状,糖含量为3.9%,总脂肪含量为0.19%,蛋白含量为73.57%,肽粉中的羟脯氨酸含量为6.35%,说明该肽粉营养价值较高,达到胶原蛋白肽粉的行业标准要求,在实际生产中有广阔的应用前景。     

谷朊粉钙离子螯合肽制备工艺优化及其结构表征

目的 优化谷朊粉钙离子螯合肽制备工艺并对其结构进行表征。方法 以水解度为指标,探究温度、时间、pH及加酶量等因素对谷朊粉酶解的影响;以钙离子螯合肽生成量为指标,探究不同因素对钙离子螯合肽生产量的影响;并根据结果进行Box-Behnken响应面实验优化螯合工艺。通过扫描电镜分析和红外分析对谷朊粉钙离子螯合肽进行表征。结果 最佳酶解工艺为:液料比17.5:1(mL/g)、碱性蛋白酶和风味蛋白酶添加比例为3:1、加酶量5000 U/g、酶解pH 9、酶解温度50℃、酶解时间4.0 h;优化后的最佳螯合工艺为:螯合温度38℃、肽液浓度13.5%、肽钙比5:1、螯合时间12.0 min、螯合pH 7、静置时间35 min、无水乙醇添加量为7倍体积,在此条件下钙离子螯合肽得率为50.85%。扫描电镜结果显示,螯合肽外观发生明显改变,更有利于吸收;红外光谱分析表明,钙离子可能与谷朊粉多肽上的-NH、-COOH结合。结论 本研究建立的谷朊粉酶解工艺、钙离子螯合工艺可行,可为谷朊粉深加工和产品研发提供思路与理论参考。     

菜籽肽制备工艺的研究

采用脱脂菜籽饼为原料,分别在碱性蛋白酶、中性蛋白酶、Flavourzyme、Protamex、Alcalase最适条件下进行单因素水解试验,以辅助TCA法测定多肽得率,并利用L9(33)正交试验,探讨了菜籽饼水解温度、加酶量和料液比对多肽得率的影响。结果表明,单因素试验得到多肽得率最高的酶为Alcalase;影响Alcalase水解菜籽饼多肽得率的因素主次顺序为:加酶量>水解温度>料液比;最佳水解条件为:温度60℃,加酶量3 000 U/g,料液比3%。在最佳条件下多肽得率为53.19%。     

辣椒粕分离蛋白酶解工艺条件的优化

从辣椒粕中提取粗蛋白,建立蛋白酶水解辣椒粕分离蛋白制备呈味肽的最佳条件。以水解度和肽得率为指标,对胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶4种酶水解辣椒粕分离蛋白的效果进行比较研究。结果表明:复合蛋白酶的水解效果最佳。通过单因素试验选取复合蛋白酶作用的固液比、酶用量、酶解时间、酶解pH值及酶解温度作为试验因素,初步确立复合蛋白酶的水解条件。并通过正交试验优化最终确定复合蛋白酶水解辣椒粕分离蛋白的最佳工艺条件为固液比110(mV),酶用量2.0%,酶解时间4h,酶解pH值6.5,酶解温度50℃。通过实验验证,在该条件下,复合蛋白酶对辣椒粕分离蛋白具有较好的水解效果,其水解度为19.60%,肽得率为6.30%。     

饲养大鲵蛋白水解工艺研究

采用酶法水解大鲵蛋白制备蛋白粉,以水解度为指标,通过单因素试验和正交设计试验,研究了饲养大鲵蛋白的水解条件。结果表明:采用碱性蛋白酶:木瓜蛋白酶=1:3(g/g)为试验用酶,水解的最佳条件为料液比1:7、酶浓度2400 U/g、pH7.5、水解时间5 h、水解温度55℃,该条件下水解度可达36.18%。     

大鲵皮胶原蛋白制备工艺优化及其抗氧化活性研究

选择大鲵皮中胶原蛋白得率为指标,研究适宜的有机酸浸提液种类和提取温度,并考察酸浓度、料液比和提取时间三个因素对胶原蛋白提取得率的影响。在单因素基础上,通过正交试验优化了大鲵皮胶原蛋白的提取工艺。并采用DPPH法与水杨酸法对大鲵皮中胶原蛋白进行抗氧化活性研究。结果表明,大鲵皮胶原蛋白的最佳提取条件为:盐酸浸提液浓度为0.4 mol/L、提取温度为35℃、料液比为1:15(g:mL)、提取时间为24 h,在该条件下,大鲵皮胶原蛋白得率为40.2%。该条件下得到的胶原蛋白对DPPH自由基、羟基自由基的IC₅₀值分别为9.96和7.79 mg/mL。研究显示,酸法浸提大鲵皮中胶原蛋白得率较高,且具有较好抗氧化活性,为大鲵皮的开发应用提供了理论依据。     

利用响应面法优化酶解罗非鱼制备抗氧化肽的研究

采用响应面分析法以·OH清除率和DPPH清除率为研究指标,分析了加酶量、酶解时间、料液比和酶解温度各因素对Protamex蛋白酶酶解罗非鱼制备抗氧化肽的影响,得到了多因素方程来说明各因素之间的相互作用规律,以及多因素对·OH清除率和DPPH清除率的影响,其中料液比对·OH清除率影响最大,酶解时间对DPPH清除率影响最大...     

中国大鲵可溶性蛋白制备及SDS-PAGE电泳分析

采用超声法制备大鲵可溶性蛋白质;从提取温度、时间、液料比方面确定适宜的工艺参数,并对所得可溶性蛋白的分子量进行研究。均匀设计实验结果表明:在提取温度为45℃、提取时间为30min、液料比为10∶1时,大鲵可溶性蛋白溶出量最多,达63.57mg/g。SDS-PAGE电泳分析可溶性蛋白的组成表明,大鲵可溶性蛋白亚基分布广泛,分子量低,易于消化吸收,为优质的营养蛋白。     

大鲵肌肉ACE抑制肽的制备及其稳定性

以大鲵肌肉为原料,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率为评价指标,通过单因素试验筛选得到3种效果较佳的单酶。在此基础上,借助混料试验,对三酶复合的配比进行优化。当风味蛋白酶、中性蛋白酶与菠萝蛋白酶质量比为0.54︰0.23︰0.23时,产物具有最高的ACE抑制率,IC50值为0.55 mg/mL。探究金属离子和体外模拟胃肠消化道酶系对对产物ACE抑制率稳定性的影响,结果显示,Zn^2+、Al^3+、Fe^2+离子能显著降低大鲵多肽的ACE抑制率,胃蛋白酶系对大鲵多肽的ACE抑制率影响较小,但胰蛋白酶系能显著降低ACE抑制率。     

红岛蛤蜊肉酶解工艺优化及其产物降血压功能研究

以营养价值较高且具地域性特色的红岛蛤蜊为研究对象,以水解度为指标,比较了复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对蛤蜊肉的酶解效果。结果表明,复合蛋白酶的酶解效果优于其他蛋白酶。选用复合蛋白酶,通过酶解温度、pH、料液比、加酶量、酶解时间的单因素实验以及正交试验确定蛤蜊肉酶解的最佳工艺条件为:酶解温度58 ℃、酶解时间6 h、初始pH7.0、料液比1:2（g:g）、加酶量1000 U/g,在此条件下的水解度达71.03% ± 0.69%。通过高效液相测定蛤蜊肽的分子量分布,得出相对分子质量小于1000 Da的占比为94.29%。对蛤蜊肽进行降血压活性研究,结果显现了良好的血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制活性,其IC₅₀=0.67 mg/mL。本研究结果为红岛蛤蜊的精深加工和利用提供了理论依据。     

海蜇胶原蛋白肽的酶解制备工艺

以海蜇加工下脚料为原料提取胶原蛋白,以还原力(RP)和水解度(DH)为指标,采用响应面法研究了酶解温度、酶解时间、pH、料液比、酶添加量对还原力和水解度的影响,得到最佳酶解胶原蛋白的工艺条件;并进一步与复合酶水解工艺进行比较,确定海蜇胶原蛋白肽的最优制备工艺。结果表明:胰蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH8.5、料液比0.50 g/mL、酶添加量3.0%和酶解时间4 h;风味蛋白酶的最优酶解条件为:温度44℃、pH7.5、料液比0.56 g/mL、酶添加量4.0%和酶解时间4 h;进一步进行复合酶实验,结果表明采用风味蛋白酶和胰蛋白酶分别在其最适条件下进行先后酶解获得的酶解液的DH和RP最高,分别为(71.56%±0.0076%)和(0.341±0.0101)。     

大鲵肽酱香酒酶解工艺优化及抗氧化活性研究

为研发一种具有抗氧化活性的大鲵肽酱香酒,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率为主要指标,多肽含量为辅助指标,比较酸水解、酶水解和直接浸泡等不同预处理方式对大鲵肽酱香酒抗氧化活性的影响,并在单因素试验基础上采用响应面法对大鲵肽酱香酒酶解条件优化。结果表明,酶水解法优于酸水解法和直接泡制,其最佳酶解工艺为木瓜蛋白酶添加量6 126 U/g、酶解时间4 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 4.5。在此优化条件下,大鲵肽酱香酒多肽含量为（14.20±0.11） mg/mL,对DPPH自由基的清除率为（77.98±0.99）%,羟自由基清除率为（70.66±0.70）%,还原能力（吸光度值A700 nm）为0.651,表明大鲵肽酱香酒具有一定抗氧化性。     

酶解泥鳅蛋白制备小分子肽的工艺研究

以泥鳅为原料,酶解泥鳅蛋白制备小分子肽。运用响应面分析法优化泥鳅蛋白酶解的工艺条件,探讨了泥鳅蛋白酶解过程中液料比、酶解温度、酶解时间对多肽得率的影响。结果表明,泥鳅蛋白酶解的工艺条件为:液料比1.3、酶解温度57℃、时间9.42h,肽的得率为36.3%(模型预测值为36.37%)。通过OriginPro7.0软件计算,在显著性水平P>0.05下,预测值与实际值无显著不同,表明运用响应面分析法优化泥鳅蛋白酶解工艺条件是可行的。