牛骨蛋白酶解工艺条件的优化

以水解度和氮收率为指标,研究酶制剂种类、底物质量浓度、加酶量、酶解时间、pH 值及酶解温度对牛骨酶解工艺的影响,并采用二次正交旋转组合设计进行工艺优化,得到最佳优化工艺条件：确定木瓜蛋白酶作为试验用酶、底物质量浓度1g/100mL、加酶量6000U/g、酶解温度60℃、pH6.5、酶解时间3h。在该条件下制备的酶解产物水解度可达26.27%。考虑到酶解后固形物的产率,选取底物质量浓度为5g/100mL 进行工艺试验,根据回归方程可得水解度的理论值为18.33%。经反复实验证实,在5g/100mL 的底物质量浓度条件下,牛骨酶解产物水解度可达16.5%～20%,氮收率可达84.5%～92%。     

响应面法优化海参卵酶解工艺

以水解度和肽得率为评价指标,从4种酶中选择出木瓜蛋白酶为水解海参卵最佳用酶.利用二次回归旋转正交组合设计,建立关于木瓜蛋白酶水解海参卵过程中温度、pH值、底物浓度对水解度影响的三元二次方程.通过对方程的拟合分析得到木瓜蛋白酶的最佳工艺条件并修正为:温度52 ℃、 pH值5.5、底物浓度8.4%、加酶量2 500 U/g、反应时间4 h.在此条件下,水解度为20.51%.     

复合酶解可溶性蛋膜蛋白制备多肽的工艺优化

为研究蛋膜蛋白的利用,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶进行单一酶解筛选实验,然后进行复合酶解实验。采用二次正交旋转组合设计,以水解度、氮收率为指标,研究酶制剂种类、加酶方式、复合酶比例、总加酶量、酶解时间、pH 值及温度对制备多肽工艺的影响。综合考虑水解度和氮收率因素,最终确定复合酶解可溶性蛋膜蛋白制备多肽的最佳工艺条件为：总加酶量16000U/g,并以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶活力配比为8:2 先后加入;酶解时间为碱性蛋白酶2h、木瓜蛋白酶1h;pH 值为碱性蛋白酶9.0、木瓜蛋白酶5.5;酶解温度为50℃。该条件下制备的蛋膜蛋白酶解产物水解度和氮收率分别为46.12%、85.56%。     

微波辅助酶解提取硫酸软骨素下脚料中胶原蛋白肽的工艺研究

以生产硫酸软骨素的下脚料为原料,采用微波辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度、相对分子量分布为指标确定最佳水解条件。通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及风味蛋白酶进行筛选,确定风味蛋白酶水解产物的水解度最高;研究了加酶量、底物浓度、反应温度、pH对酶解反应的影响,确定酶解的最优工艺条件为:加酶量6%,底物浓度10%,反应温度50℃,pH7.0。此外,与单独的酶解相比,微波辅助酶解缩短了酶解时间近50%,分子量小于1 000的胶原蛋白肽比例占91.2%。     

猪骨呈味物质提取的研究(I)——酶解猪骨最佳工艺条件

本实验对猪骨酶解前的热处理和超声波预处理等前处理方法及木瓜蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解猪骨工艺进行了研究。结果表明:猪骨热处理的最佳条件为温度90℃,时间10min;猪骨超声波预处理最佳反应条件是:总超声时间为10min、超声波功率为400W。猪骨酶解前经热处理后,水解度和氮收率分别提高了30.84%、10.99%;经超声波预处理后,水解度和氮收率分别提高了84.57%、66.45%;因此,超声波预处理要明显比热水预处理好。试验确定最佳的双酶水解工艺条件为底物浓度15%、E/S6000U/g、酶解时间4h、酶解温度50℃、酶解pH值7.5、木瓜蛋白酶量:胰蛋白酶量1:1。在确定的最佳条件下对猪骨进行超声波预处理和双酶水解,水解度为25.99%、氮收率为66.35%。     

双酶水解牛肉的研究

用复合蛋白酶和复合风味蛋白酶同步水解牛肉,最佳酶解条件为:底物浓度为16%、复合蛋白酶和风味蛋白酶的添加量均为1.0%、水解温度50℃,起始pH值6.5,酶水解时间8h,水解度为21.0%,酶水解产物中的小肽含量较为理想.     

猪骨呈味物质提取的研究（Ⅰ）—酶解猪骨最佳工艺条件

本实验对猪骨酶解前的热处理和超声波预处理等前处理方法及木瓜蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解猪骨工艺进行了研究。结果表明：猪骨热处理的最佳条件为温度90℃，时间10min；猪骨超声波预处理最佳反应条件是：总超声时间为10min、超声波功率为400W。猪骨酶解前经热处理后，水解度和氮收率分别提高了30.84%、10.99%；经超声波预处理后，水解度和氮收率分别提高了84.57%、66.45%；因此，超声波预处理要明显比热水预处理好。试验确定最佳的双酶水解工艺条件为底物浓度15%、E/S6000U/g、酶解时间4h、酶解温度50℃、酶解pH值7.5、木瓜蛋白酶量：胰蛋白酶量1：1。在确定的最佳条件下对猪骨进行超声波预处理和双酶水解，水解度为25.99%、氮收率为66.35%。     

脱脂油菜籽饼粕蛋白质分步酶水解研究:碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶分步水解

本文对脱脂油菜籽饼粕中蛋白质的碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶分步水解进行了研究。结果表明在碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的最适作用温度和起始pH值下，先用3,000u/g碱性蛋白酶水解3小时后，再用3,000u/g木瓜蛋白酶水解3小时，水解产物的水解度和氮收率分别高达30.95%和90.12%。水解产物的口味平淡，在pH3～9范围内，氮溶解指数在76.92%以上，三氯乙酸氮溶解指数达85.46%。     

木瓜蛋白酶酶解7S大豆球蛋白的研究

采用实验室提取的7S大豆球蛋白为底物,以水解度为试验考察指标,选择底物浓度、温度、时间、pH值、木瓜蛋白酶酶添加量进行试验.结果表明,木瓜蛋白酶酶解7S大豆球蛋白的最佳工艺条件为:底物浓度4.5%,酶解时间3 h,体系pH值7.2,酶解温度50℃,酶用量为6 000 U/g.原7S大豆球蛋白氮溶解指数(NSI)为40.6%,经最佳酶解条件处理后其NSI值为78.5%.     

罗非鱼下脚料酶法水解条件优化的研究

以罗非鱼下脚料为原料,进行酶法水解工艺的研究,分析酶的种类、酶的添加量、温度、pH值、反应时间和底物浓度等因素对蛋白水解的影响。通过正交试验,确定了木瓜蛋白酶水解的最佳工艺条件:温度为65℃、水解时间为3h、酶加量为1.5%、pH值为6.0、底物浓度为5∶9,此时水解度为9.38%,氨基氮含量为2.03mg/mL,蛋白质提取率为71.27%。     

响应面法优化豆豉蛋白酶解工艺

以豆豉蛋白为原料,选用木瓜蛋白酶与复合风味酶分步水解制备豆豉蛋白水解物。通过单因素试验和响应面分析,确定了木瓜蛋白酶的水解条件为:反应温度62.93℃、pH7.49、酶/底物4.91%、底物浓度5.48%,在此条件下水解5h;木瓜蛋白酶水解液再加入复合风味酶酶解,优化的水解条件为:在pH6.0,酶/底物为3%,55℃条件下反应3h,豆豉蛋白最终水解度达到28.37%。     

酶法制备联合Plastein反应修饰牡蛎ACE抑制肽工艺优化

以牡蛎为原料,采用酶解联合Plastein反应修饰的方法,获得高活性血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。以ACE抑制率和水解度为指标,对比胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶这5种蛋白酶对牡蛎肉的酶解效果,筛选出木瓜蛋白酶最佳。通过单因素试验和正交试验对酶解工艺进行优化,得到最佳酶解工艺为料液比1∶8(g/m L)、加酶量2.0%、温度65℃、时间1.0 h、pH6.0,此条件下酶解产物的ACE抑制率可达到63.30%,在此基础上采用Plastein反应对酶解产物进行修饰,以游离氨基酸减少量和ACE抑制率为指标,考察反应过程中酶种类、底物质量分数、加酶量、时间和温度对修饰结果产生的影响。通过该反应的修饰,得到选用中性蛋白酶、底物质量分数40%、加酶量1.0%、温度30℃、时间2.5h、pH7.0时,ACE抑制率最高可达82.31%,比修饰前提高了19%。     

响应面法优化黄粉虫蛋白制备ACE抑制肽的条件

以黄粉虫蛋白粉为原料,利用酶解技术对制备血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽进行优化。通过单因素及响应面试验,确定木瓜蛋白酶的酶解工艺,利用酶标法测定酶解产物的ACE抑制率,研究底物质量浓度、加酶量、pH值、酶解时间、酶解温度对ACE抑制肽活性的影响。结果表明：当底物质量浓度为7 g/100 mL、加酶量1%、pH 6.5、酶解时间7 h、酶解温度55 ℃时,黄粉虫蛋白粉酶解产物的ACE抑制率达到58.86%。     

木瓜蛋白酶制备大豆抗癌活性肽的条件优化

用木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶解,制备大豆抗癌活性肽,并对其细胞生长抑制率、水解度和木瓜蛋白酶的最优作用条件进行研究。结果表明：在整个酶解过程中,大豆抗癌活性肽都具有明显的抗癌作用,但水解度与大豆抗癌活性肽的细胞生长抑制率之间不呈线性关系。底物质量浓度、酶用量、酶解温度、酶解时间和反应pH值都影响大豆抗癌活性肽的细胞生长抑制率。木瓜蛋白酶制备大豆抗癌活性肽的最优酶解条件为：底物大豆抗癌活性肽的浓度6g/100mL、酶用量7000U/g、酶解温度55℃、酶解时间4h、反应pH7.5,在此条件下得大豆抗癌活性肽细胞生长抑制率为28.13%。     

低值淡水鱼蛋白酶法水解工艺研究

以水解度为指标,考察酶解温度、pH、底物浓度、加酶量等因素对鲢鱼蛋白水解度的影响。在单因素实验基础上采用中心复合组合设计实验对酶解温度、pH和加酶量进行优化,以氨基酸态氮为指标,确定最佳酶解时间。结果表明:酶解pH9.37,酶解温度48.33℃,酶与底物比93.87AU/kg,酶解时间6h,在此条件下水解体系水解度为39.54%,氨基酸态氮含量为2.31g/L,总氮回收率为93.55%,蛋白质浓度为3.62%。     

酶因子对水飞蓟蛋白酶解液抗氧化活性、理化指标和感官品质的影响

为促进水飞蓟蛋白的高效利用,研究不同蛋白酶对酶解液抗氧化活性、水解度、氮回收率、苦味值等指标的影响。结果表明,与糜胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和复合蛋白酶相比,木瓜蛋白酶为水飞蓟蛋白的最佳酶解用酶,可获得较高的抗氧化活性、适宜的水解度和氮回收率,以及较低的苦味值;当酶解温度为45～50℃、时间240～270 min和pH 6～7时,酶解液抗氧化活性可达到14U/mg蛋白,水解度和氮回收率分别在20%和60%以上,而苦味值低于2,酶解液总体质量较优,可作为功能性食品的配料。     

高活性酪蛋白抗氧化肽的制备方法研究

采用木瓜蛋白酶对酪蛋白进行水解,得到抗氧化活性较好的酪蛋白水解物,并且水解物在木瓜蛋白酶作用下进行类蛋白反应制备出高活性酪蛋白抗氧化肽。第一步制备酪蛋白水解时酶添加量为500 U/g酪蛋白、温度45℃、底物浓度5%、反应时间2 h。第二步类蛋白反应的最优条件为：酶添加量为500 U/g水解物、温度30℃,底物浓度50%、作用时间5.5 h。毛细管电泳结果确认,类蛋白反应修饰后抗氧化肽的组成情况发生变化。抗氧化活性分析结果表明,类蛋白反应修饰后的酪蛋白抗氧化肽对两种自由基的清除能力显著提高。     

牦牛血红蛋白活性肽酶法制备工艺的优化及脱色技术研究

为开发具有保健功能的新型高附加值生物制品,本实验采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及AS1.398中性蛋白酶3种食品级内切蛋白酶对牦牛血红蛋白进行酶解,以水解度及三氯乙酸可溶性氮为评价指标,采用酶解-活性炭法对水解液进行脱色,筛选出AS1.398中性蛋白酶为最佳水解用酶。通过正交实验对其酶解工艺进行优化后,得出AS1.398中性蛋白酶最佳水解条件为:底物浓度5%,加酶量8000U/g,温度55℃,初始pH7.5,酶解时间5h。在此条件下水解产物为淡黄色,并具有较高的低分子量生物活性肽含量。     

大豆粕蛋白酶酶解条件和产物分析研究

以水解度为衡量指标,通过正交试验设计,对木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和As1.398蛋白酶酶解大豆粕的最佳水解条件进行了筛选.试验结果表明:木瓜蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度60℃、时间5 h、酶浓度5%.胰蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH7.0、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%;As1.398蛋白酶水解大豆粕的最佳条件为pH6.5、温度50℃、时间7 h、酶浓度5%.对酶解产物进行超滤和SDS-PAGE电泳分析表明,因酶解条件不同,大豆粕酶解产物中蛋白质和肽的组成及其数量也不同;酶的种类不同,大豆粕酶解产物组成也不同;大豆粕水解度越高,其酶解产物中小分子肽数量越多.     

麦胚蛋白酶解物的溶解性研究

利用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶对麦胚蛋白的溶解特性进行改善。系统研究了底物浓度、酶浓度、酶解时间、pH、温度等工艺条件对麦胚蛋白酶解物的溶解特性的影响。试验结果表明：中性蛋白酶的水解度以及水解产物的溶解度优于木瓜蛋白酶。在底物浓度10％,中性蛋白酶浓度1．0％,酶解时间2．5h,pH6．5,温度35℃条件下麦胚蛋白水解度1．40％,溶解度58．7％,比酶解前溶解度24．3％有较大提高。