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目的:明确蓝莓多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。方法:分别采用硫酸铵分级沉淀法和疏水层析法分离纯化蓝莓PPO,比较两者的纯化效果,并对蓝莓PPO的酶促反应动力学、最适反应温度和pH以及稳定性进行研究。结果:硫酸铵分级沉淀法与疏水层析法的纯化倍数相近,但两者的得率分别为61%和84%。以绿原酸和邻苯二酚为底物时,蓝莓PPO的米氏常数(Km)分别为23.38mM和6.13mM。该酶的最适pH值为6.0,最适反应温度为25℃。该酶在40℃以上不稳定,而在70℃时,其酶活在60s后残余酶活仅为7.23%。随着pH值的不断降低,其稳定性会不断下降。结论:疏水层析法对蓝莓PPO的分离纯化效果更好。蓝莓PPO对邻苯二酚的亲和力更高,该酶对温度和pH都较为敏感。 相似文献
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《中国食品添加剂》2015,(8)
研究曲霉型豆豉酿造用米曲霉沪酿3.042产蛋白酶在其酿造过程中的最适作用条件。利用大豆豆汁培养基对米曲霉沪酿3.042菌株进行培养,并用(NH4)2SO4溶液对所产蛋白酶进行沉淀,脱盐处理后,研究该酶的最适作用pH及pH稳定性、最适作用温度及热稳定性以及Na Cl浓度对酶活力的影响。结果显示:该蛋白酶最适作用pH为6.0,酶活最高为1941U/m L,在pH为6.0~8.0时稳定性较高;最适作用温度为50℃,酶活为2658U/m L,在40℃以下其酶活力较稳定;Na Cl对淀粉酶酶促反应有明显的抑制作用,随着Na Cl浓度的升高,其抑制效果越明显。 相似文献
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杏鲍菇多酚氧化酶的酶学特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以杏鲍菇中多酚氧化酶(PPO)为研究对象,采用分光光度法在420nm处对其酶学特性进行研究.结果表明,杏鲍菇PPO的最适底物为邻苯二酚;最适pH为6.0;最适温度为35℃;90℃处理2min,可使酶完全失活;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,动力学参数为Km=0.0207mol/L,Vmax=41.32U/min;7种金属离子对PPO酶活性的影响效果各不相同,Al3+、Mn2+对PPO酶活性有一定的抑制作用,Mg2+、Zn2+、Ca2+和Cu2+对PPO酶活性的抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活性有激活作用;抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸和亚硫酸钠对PPO酶活性的抑制作用均随浓度的增大而加强,抑制能力由强到弱依次为:抗坏血酸>亚硫酸氢钠>L-半胱氨酸>柠檬酸. 相似文献
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白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.0,最适反应温度为40℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90℃热处理2.5 min或85℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。 相似文献
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白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH 值为6.0,最适反应温度为40 ℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90 ℃热处理2.5 min或85 ℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。 相似文献
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紫甘薯多酚氧化酶酶促反应最适条件的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
酶学特性研究表明紫甘薯PPO对pH的变化十分敏感,最适pH为4.1,pH6.0处还有一肩峰.pH值小于3.0或大于7.5时,酶活力迅速降低.紫甘薯PPO最适反应温度为16℃,30℃处有一肩峰.出现双峰现象可能是由于PP0同工酶所致.最适的酶液浓度和底物浓度分别为14.5%和0.5%.酶活随酶浓度、底物浓度升高呈上升趋势,并逐渐变缓直到达到最高反应酶活. 相似文献
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以鲜榨桃汁为原料,分别研究了热处理对其多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)的灭酶效果影响和超高压对其微生物的灭菌效果影响。结果显示:PPO、POD相对残存酶活随着热处理温度和时间的增加而减小,PPO对热处理的耐受性明显高于POD,最适灭酶条件为75℃1min;菌落总数、霉酵总数和乳酸菌数均随着超高压处理压力和时间的增加而减少,霉菌和酵母菌对超高压的耐受能力明显差于细菌,最适灭菌条件为600MPa10min;按以上最适条件生产的桃汁在1个月贮藏期内达到商业无菌。 相似文献
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苹果梨多酚氧化酶(PPO)的部分特性 总被引:11,自引:0,他引:11
苹果梨多酚氧化酶仅作用于邻苯酚,与对苯酚、间苯酚和一元酚无作用。以儿茶酚为底物,该酶的最适pH为6.5,在30℃下活性最强。除氯化钠和蔗糖外,供试的其它7种抑制剂均可不同程度地对该酶产生抑制,其中以焦亚硫酸钾效果最好。 相似文献
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用分光光度计法在波长420nm下,以邻苯二酚为底物研究了兰州百合鳞茎中多酚氧化酶(Polyphenoloxidase,PPO)的部分特性。实验发现百合PPO的活性在4~25℃时,随着温度的升高而升高,25℃时PPO活性达到最大值,之后PPO活性随着温度的升高而下降;百合PPO有两个最适pH,分别为4.0和6.0,当pH低于4.0、高于6.0时活性均较低。抗坏血酸、异抗坏血酸钠、半胱氨酸在实验用的五种抑制剂中对PPO的抑制作用最强。 相似文献
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番石榴多酚氧化酶的部分纯化及其特性研究 总被引:10,自引:0,他引:10
番石榴PPO的粗提取液经过80%硫酸铵盐析和DEAE-Toyopearl 650M、CM-Sephadex C-50离子交换柱层析分离后,被纯化了约126倍,回收率为16.13%。该酶迅速地催化焦性没食子酸的酶促氧化反应,而对对苯二酚和绿原酸则完全无催化活性。该酶对焦性没食子酸的Km值为4.6 mmol/L,其最适pH为7.5,pH稳定性范围在pH4.0~11.0,最适温度为50℃,热稳定性相对较高,在≥90℃加热10 min后仍残留约15%的酶活性。该酶的最佳抑制剂是抗坏血酸和NaHSO3,其次是植酸、盐酸-L-半胱氨酸、柠檬酸,Ca2+、Mg2+等金属离子对该PPO也有较强的抑制作用。 相似文献
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本实验对火龙果果皮中多酚氧化酶(PPO)的活性及不同抑制剂的抑制效果进行研究。结果表明:火龙果果皮多酚氧化酶的最适pH为7.0,最适温度为 40℃,底物浓度与酶活性成正相关;亚硫酸氢钠、抗坏血酸、L-半胱氨酸、柠檬酸等对该酶表现出不同的抑制作用,抑制效果为:亚硫酸氢钠>抗坏血酸>L-半胱氨酸>柠檬酸,抗坏血酸的浓度越高,对酶的抑制效果越明显。 相似文献
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杨桃多酚氧化酶的部分纯化及其特性研究 总被引:6,自引:0,他引:6
杨桃多酚氧化酶粗酶液经过DEAE-Toyopearl650M离子交换柱层析,Butyl-Toyopearl650M疏水柱层析后,被纯化了21.6倍,回收率为45.2%。该酶能迅速地催化焦性没食子酸的酶促氧化反应,而对邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和绿原酸则完全无催化活性。该酶对焦性没食子酸的Km值为7.92mmol/L,其最适pH为8.0,pH稳定性范围在pH4.0-11.0,最适温度为60℃,热稳定性相对较高,在≥90℃加热30min后仍残留约9%的酶活性。该酶的最佳抑制剂是抗坏血酸,其次是NaHSO3和盐酸-L-半胱氨酸,Cu2+、Zn2+、Ca2+等金属离子对该酶也有一定的抑制作用。 相似文献
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荔枝壳中多酚氧化酶活性研究 总被引:8,自引:0,他引:8
本文对荔枝壳中多酚氧化酶(PPO)的活性及不同抑制剂的抑制效果进行研究。结果表明:荔枝壳多酚氧化酶的最佳底物浓度为0.04mol/L,最适pH为7.0,最适温度为40℃;柠檬酸、抗坏血酸、硫代硫酸钠对PPO活性表现出较好的抑制效果,三种抑制剂联合作用的最佳条件为0.01mmol/L的柠檬酸+0.04mmol/L的抗坏血酸+0.004mmol/L的硫代硫酸钠,PPO活性的抑制率达85.8%。 相似文献