牛奶中β-内酰胺和四环素类抗生素二联检测试纸条的初步研究

抗生素越来越多地被应用于畜牧业中,其在乳制品中的残留问题也备受关注.乳品中残留抗生素不仅危害人体的健康,而且影响经济贸易的正常进行.为适应基层检测牛奶中抗生素残留的需求,作者采用胶体金免疫层析方法,建立了可以同时测定牛奶中的β-内酰胺类抗生素和四环素类抗生素的二联胶体金试纸条.该方法简单可靠,可同时检测牛奶中12种β-内酰胺类抗生素和4种四环素类抗生素,是一种值得推广的定性筛选方法,可作为液相色谱等定量检测仪器法的补充.     

乳品中β-内酰胺类抗生素快速检测试纸条研制

通过β-内酰胺类抗生素-载体蛋白偶联物的合成,单克隆抗体的制备与纯化,胶体金标记物的制备,β-内酰胺类抗生素单克隆抗体-胶体金标记物的制备并冻干到微孔试剂,样品吸收垫和反应膜的制备等研究过程,研制出乳制品中β-内酰胺类抗生素的快速检测试纸条。检测限分别为:青霉素G2μg/L、氨苄青霉素4μg/L、阿莫西林5μg/L、苯唑青霉素/邻青霉素/双青霉素均为6μg/L、头孢洛宁10μg/L、萘夫西林20μg/L、头孢喹肟20μg/L、头孢曲松25μg/L、头孢哌酮50μg/L、头孢噻呋90μg/L;本试纸条特异性好、假阳性率不高于3%、假阴性率为0,检测时间不超过15min,检测限量达到了我国和欧盟的要求,适用于乳品流通环节乳品中β-内酰胺类抗生素残留的检测。     

乳品中β-内酰胺类抗生素快速检测试纸条研制

通过β-内酰胺类抗生素-载体蛋白偶联物的合成,单克隆抗体的制备与纯化,胶体金标记物的制备,β-内酰胺类抗生素单克隆抗体-胶体金标记物的制备并冻干到微孔试剂,样品吸收垫和反应膜的制备等研究过程,研制出乳制品中β-内酰胺类抗生素的快速检测试纸条。检测限分别为:青霉素G2μg/L、氨苄青霉素4μg/L、阿莫西林5μg/L、苯唑青霉素/邻青霉素/双青霉素均为6μg/L、头孢洛宁10μg/L、萘夫西林20μg/L、头孢喹肟20μg/L、头孢曲松25μg/L、头孢哌酮50μg/L、头孢噻呋90μg/L;本试纸条特异性好、假阳性率不高于3%、假阴性率为0,检测时间不超过15min,检测限量达到了我国和欧盟的要求,适用于乳品流通环节乳品中β-内酰胺类抗生素残留的检测。      

检测三聚氰胺胶体金免疫层析试验的建立

采用混合酸酐法制备三聚氰胺-OVA偶联抗原,胶体金标记三聚氰胺单克隆抗体,建立了检测三聚氰胺的胶体金免疫层析试验.该试验具有较好的敏感性,最低可检测50μg/L的三聚氰胺.胶体金免疫层析试验对原料奶和奶粉样品中三聚氰胺的最低检测量分别为250μg/L和1000μg/L,可初步应用于基层实验室快速筛查检测.     

牛奶中β-内酰胺类抗生素残留检测试剂盒的研制

以牛奶中残留的β-内酰胺类抗生素为检测目标,开发一种能快速检测其残留的试剂盒。利用嗜热脂肪芽孢杆菌BS 10208对酸和β-内酰胺类抗生素敏感的特点,优化其最优的生长条件,并制成在2.5 h内能发生显色反应的检测试剂盒。单因素结果表明,当菌液接种量5%、生长初始pH 8.0、培养温度55℃、蛋白胨添加量0.50%,其菌落数对数值分别为2.9、7.5、7.3、5.8。正交结果表明,在外加入0.5%蛋白胨营养肉汤中,接种5%种子液,在65℃恒温振荡器中培养24 h,其菌落数对数值为7.6。优化后检测试剂盒在2.5 h内能检测牛奶中β-内酰胺类抗生素残留,其各项参数为:反应体积为0.5 mL,1.5%琼脂,0.01 g/L溴甲酚紫浓度,BS 10208细胞总数为1.30×108 cfu,最适反应温度65℃,青霉素钠的限值为2～4μg/L。该试剂盒还能检测牛奶中残留的四环素类、磺胺类、大环内酯类、氨基糖苷类等抗生素。     

牛奶中β-内酰胺类抗生素残留的快速检测方法

将微生物方法与仪器分析方法相结合，用嗜热脂肪芽孢杆菌作为指示菌，通过“阻抗分析仪”的自动检测、分析，根据DT时间的产生，判断牛奶中抗生素的残留情况。结果表明，该方法操作简单、快捷，灵敏度高、结果易判断，全部检测过程可在2～3h内完成。本方法检测牛奶中青霉素G的检测限可达3μg／kg。     

牛乳中β-内酰胺类抗生素残留及检测方法的比较

介绍了牛乳中抗生素残留的原因及危害，描述了β-内酰胺类抗生素在牛乳中的残留特性及残留现状，阐述了不同抗生素残留检测方法的优缺点，为牛乳中抗生素残留的检测提供理论参考。     

牛乳中β-内酰胺类抗生素残留及检测方法的比较

介绍了牛乳中抗生素残留的原因及危害，描述了β-内酰胺类抗生素在牛乳中的残留特性及残留现状，阐述了不同抗生素残留检测方法的优缺点，为牛乳中抗生素残留的检测提供理论参考。     

液体乳中三聚氰胺的快速检测产品评价研究

目的 评价液体乳中三聚氰胺的快速检测产品。方法 采用空白基质加标的方式制备了三聚氰胺3个不同浓度水平的牛奶盲样,并验证盲样的均匀性和稳定性,对3个不同厂家的三聚氰胺胶体金试纸条、3台不同的便携式拉曼光谱仪进行评价测试,系统性地研究了快速检测产品评价方法。结果 评价结果表明,各快速检测产品灵敏度分别为100%（5个）和99.3%（1个）,特异性均为100%,假阴性率为0%（5个）和0.7%（1个）,假阳性率均为0%。结论 本研究用于液体乳中三聚氰胺检测的快速检测产品符合性能指标的要求,满足市场监管的需要。     

牛乳中β-内酰胺类抗生素残留检测方法的对比研究

对乳中抗生素残留的2种微生物检测法进行了比较,确定2种方法对6种广谱-β内酰胺类抗生素的检测限,同时指出了国标TTC法对6种广谱抗生素均不能检出欧盟法典规定的MRL残留浓度,而AOAO纸片法对其检测限均在MRL浓度范围内,且符合欧盟药典确定的最大残留量限制。建议乳中抗生素残留检测过程中,采用特异性与灵敏度高、经济简便、检测限达到MRLs规定的AOAO纸片法作为国标TTC检测法的补充。     

液相色谱-质谱联用检测乳β-内酰胺类抗生素研究进展

β-内酰胺类抗生素是畜牧和牛乳生产中最广泛应用的、治疗动物细菌感染的抗生素。由于它们常用作治疗细菌感染的兽药，因此对于动物性食品和乳中β-内酰胺类抗生素的残留量分析是很重要的。论述了在检测牛乳中β-内酰胺类抗生素中的最新应用状况，表明液相色谱-质谱联用法(LC-MS)是一种高灵敏度和选择性的检测方法，具有广阔的发展前景。     

液相色谱-质谱联用检测乳中β-内酰胺类抗生素研究进展

β-内酰胺类抗生素是畜牧和牛乳生产中最广泛应用的、治疗动物细菌感染的抗生素。由于它们常用作治疗细菌感染的兽药,因此对于动物性食品和乳中β-内酰胺类抗生素的残留量分析是很重要的。论述了在检测牛乳中β-内酰胺类抗生素中的最新应用状况,表明液相色谱-质谱联用法(LC-MS)是一种高灵敏度和选择性的检测方法,具有广阔的发展前景。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中4种 β-内酰胺类抗生素及其主要代谢产物

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法检测牛奶中青霉素G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林及其代谢产物脱羧噻唑酸含量的分析方法.方法 样品经0.2％氨水乙腈溶液超声离心提取,通过Oasis PRiME HLB固相萃取柱进行净化,采用超高效液相色谱-串联质谱法进行测定.结果 青霉素G、青霉素V、氨苄西林、阿莫西林及其代谢产物脱...     

高效液相色谱-高分辨质谱法定性筛查牛奶中49种β-内酰胺类抗生素残留

目的 开发和验证定性筛查牛奶中49种β-内酰胺类抗生素残留的高效液相色谱-高分辨质谱法(high performance liquid chromatography coupled with high resolution mass spectrometry,HPLC-HRMS)。方法牛奶经磷酸盐缓冲液及乙腈提取后,加入硫酸钠(Na2SO4)和氯化钠(NaCl)进行盐析,离心后取部分上清液经Na2SO4和C18混合的分散式固相萃取填料(dispersive solid phase extraction,d-SPE)净化,净化液浓缩定容后,使用HPLC-HRMS分别以全扫描-数据依赖型二级扫描(full scan-data dependent secondary acquisition,Full MS/dd-MS2)和全扫描-平行反应监测二级扫描(full scan-selected ion monitoring/parallel reaction monitoring,Full MS/PRM)两种模式进行数据采集。结果在Full MS/PRM模式下,45种抗生素通过方法验证,假阳性率和...     

动物源性食品中β-内酰胺类抗生素前处理及检测方法研究进展

β-内酰胺类抗生素兽药残留是目前重要的动物源性食品安全问题之一,检测食物基质中痕量兽药残留依赖于有效的前处理方法和精密的分析仪器。文中阐述了β-内酰胺类抗生素兽药的研究背景和现状,并对国内外食品中β-内酰胺类抗生素兽药残留的液液萃取、固相萃取(SPE)、基质辅助固相分散萃取和Qu ECHERs等前处理方法及微生物测定、免疫测定、液相色谱法、液相色谱质谱法、毛细管电泳分析方法等检测方法进行了综述,拟为动物源性食品中β-内酰胺类抗生素药物的残留监控提供理论参考,综述指出SPE为最有前景的前处理方法,而质谱技术的发展和仪器的小型化为检测仪器的发展趋势。     

液相色谱-串联质谱法测定水产品中β-内酰胺类抗生素的残留

建立了同时测定水产品中6种β-内酰胺类抗生素药物残留的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）检测方法。样品经乙腈-水（15∶2,v∶v）混合液提取,HLB固相萃取柱净化。以乙腈-0.01mol/L醋酸铵溶液（pH4.5）作为流动相,C18色谱柱进行分离,电喷雾正离子多反应监测模式进行检测。方法检测限为0.2～2.0μg/kg,加标回收率为80.8%～92.9%,相对标准偏差为2.6%～9.1%（n=9）。该方法准确、灵敏、简便,适用于水产品中6种β-内酰胺类抗生素残留的测定。      

应用酶联免疫法快速检测乳品中β-内酰胺类抗生素残留

建立乳品中β-内酰胺类抗生素残留酶联免疫快速检测方法。应用氨苄青霉素抗体,通过人工制备了氨苄青霉素(Amp)和辣根过氧化物酶(HRP)的结合物Amp-HRP,建立直接ELisa竞争法检测β-内酰胺类抗生素,确定了各种β-内酰胺类抗生素的检出限,并对检测条件进行了优化。检测了已知阴性和阳性的生鲜牛乳样品,结果表明对于阴性和阳性牛奶样品的检测未出现假阳性或者假阴性结果。该方法检测结果准确可靠,可广泛应用于检测乳品中β-内酰胺类抗生素残留的检测。     

牛奶中新霉素残留胶体金免疫层析快速检测技术的研制

建立了一种快速、简单的检测牛奶中新霉素残留量的胶体金免疫层析法,将抗新霉素单克隆抗体-胶体金标记物冻干于微孔板中,将新霉素人工抗原和羊抗鼠抗抗体分别包被在醋酸纤维素膜上作为检测线（T线）和质控线（C线）,T线的新霉素人工抗原与待测牛奶样品中的新霉素竞争结合新霉素单克隆抗体-胶体金标记物,通过T线和C线的显色情况读出结果。试纸条对牛奶样品的检测限为200μg/L,牛奶样品无需稀释,可直接检测,检测时间只需3⁵min,与磺胺类、四环素类、氯霉素类等药物均无交叉反应,检测结果重复性好,可作为现场快速筛查牛奶中新霉素残留的有效手段。      

牛奶中新霉素残留胶体金免疫层析快速检测技术的研制

建立了一种快速、简单的检测牛奶中新霉素残留量的胶体金免疫层析法,将抗新霉素单克隆抗体-胶体金标记物冻干于微孔板中,将新霉素人工抗原和羊抗鼠抗抗体分别包被在醋酸纤维素膜上作为检测线(T线)和质控线(C线),T线的新霉素人工抗原与待测牛奶样品中的新霉素竞争结合新霉素单克隆抗体-胶体金标记物,通过T线和C线的显色情况读出结果.试纸条对牛奶样品的检测限为200μg/L,牛奶样品无需稀释,可直接检测,检测时间只需3～5min,与磺胺类、四环素类、氯霉素类等药物均无交叉反应,检测结果重复性好,可作为现场快速筛查牛奶中新霉素残留的有效手段.     

国标TTC法与AOAC纸片法检测乳中β-内酰胺类抗生素残留对比研究

对乳中抗生素残留的两种微生物检测法进行了比较,确定2种标准方法对6种广谱β-内酰胺类抗生素的检测限,同时指出国标TTC法在检测灵敏度方面的缺陷.建议乳中抗生素残留检测过程中,采用特异性与灵敏度高、经济简便、检测限达到MRLS规定的AOAC纸片法作为国标TTC检测法的补充.