发酵法制备沙光鱼多肽及其抗氧化活性

将米曲霉接种到pH5.0 的沙光鱼匀浆液中进行发酵培养,利用米曲霉产生的蛋白酶水解沙光鱼蛋白。研究发酵过程中蛋白酶的产生及沙光鱼蛋白的水解动态;对发酵液进行超滤,测定不同截留分子质量的发酵液清除自由基的活性及抗氧化活性。结果表明：随着发酵时间的延长,沙光鱼蛋白的水解度和多肽得率不断增加,多肽的平均链长度降低。发酵48h 后,多肽链平均长度为14,水解度为26.6%,多肽得率最高达到8.98%,抗氧化能力较强。不同截留分子质量的多肽液中,平均肽链长度为14 个氨基酸残基的多肽超滤液体外抗氧化能力较强。     

大豆多肽深层发酵过程中蛋白质变化的研究

在摇瓶发酵实验的基础上,我们将大豆多肽发酵工艺在5L发酵罐中进行了放大实验。利用各种分析技术对发酵过程中大豆蛋白的变化进行了检测分析,包括蛋白质水解度、多肽分子量分布以及氨基酸组成等。结果显示,大豆蛋白的水解在接种后6～8h后达到高峰期,24h后趋于平缓;发酵时间宜控制在24～36h内,发酵36h所得的多肽分子量主要分布在2000～3500Da范围内;而氨基酸分析的结果表明,发酵法制备的大豆多肽具有与大豆蛋白同样合理的氨基酸组成。     

发酵法制备鱼鳔多肽及其抗氧化活性研究

将米曲霉接种于鱼鳔匀浆液中对其进行直接发酵,利用菌产蛋白酶的作用水解鱼鳔蛋白。随着发酵时间的延长,发酵液水解度不断上升,发酵液中的多肽含量不断增加。对发酵所得鱼鳔多肽进行超滤,采用产O2·和·OH 化学模型研究其清除自由基的活性,采用亚油酸自氧化体系研究其抗氧化活性。结果显示,经发酵40h,水解度(22 ± 0.8)% 所得鱼鳔多肽体外抗氧化能力较强;超滤片段中,平均肽链长度为12 个氨基酸残基的多肽超滤液体外抗氧化能力较强;分子量分布在1000D 左右。发酵法所得鱼鳔多肽不仅对自由基具有强烈的清除作用,还能明显抑制脂质的氧化。     

一株地衣芽孢杆菌的分离及在大豆肽发酵中的应用

从土壤中分离得到1株蛋白酶高产菌株,经鉴定为地衣芽孢杆菌。以大豆分离蛋白为原料,用地衣芽孢杆菌来发酵生产大豆多肽,通过对发酵液中大豆蛋白起始浓度、发酵液初始pH值、发酵温度、摇瓶转速、发酵时间等因素进行研究,以多肽得率为指标初步探索了发酵工艺条件,并以大豆多肽含量为指标,采用响应面分析法,对发酵法制备大豆多肽的生产工艺进行了优化。结果表明,在大豆蛋白起始浓度为3%,初始pH值为6.5,发酵培养温度34.0℃,摇瓶转速180r/min,发酵时间为18h～21h的条件下,发酵大豆蛋白所得多肽的含量可达19.2mg/mL,多肽得率达到70%,且所得到的大豆多肽发酵液具有良好的口感。     

一株地衣芽孢杆菌的分离及在大豆肽发酵中的应用

从土壤中分离得到1株蛋白酶高产菌株,经鉴定为地衣芽孢杆菌.以大豆分离蛋白为原料,用地衣芽孢杆菌来发酵生产大豆多肽,通过对发酵液中大豆蛋白起始浓度、发酵液初始pH值、发酵温度、摇瓶转速、发酵时间等因素进行研究,以多肽得率为指标初步探索了发酵工艺条件,并以大豆多肽含量为指标,采用响应面分析法,对发酵法制备大豆多肽的生产工艺进行了优化.结果表明,在大豆蛋白起始浓度为3%,初始pH值为6.5,发酵培养温度34.0℃,摇瓶转速180r/min,发酵时间为18h～21h的条件下,发酵大豆蛋白所得多肽的含量可达19.2mg/mL,多肽得率达到70%,且所得到的大豆多肽发酵液具有良好的口感.     

微生物发酵法产大豆多肽液水解度的测定

建立了一种适于蛋白质水解液水解度测定的新方法。以脱脂豆粕粉为原料，具产蛋白酶能力的微生物为生产菌种进行发酵。微生物所产蛋白酶作用于豆粕粉中的大豆蛋白将其水解成大豆多肽。通过新建立的方法测定了不同发酵时间发酵液的水解度，并与文献所报道的常规测定方法进行比较。结果表明，新建立的水解度直接测定法快速简便，灵敏度高，可重复性强，不仅适于微生物发酵法产大豆多肽液水解度的测定，还普遍适用于其它蛋白水解液水解度的测定。     

大豆肽对小鼠生理的影响

将48只健康的昆明系小鼠分为6组,分别利用纯净水、大豆多肽液、大豆蛋白酶解液、豆浆液、大豆蛋白液及大豆蛋白发酵液对其连续灌胃30d,研究每组小鼠的抗疲劳能力及其脾脏、肾脏、肝脏功能及血液特征.经研究发现,大豆多肽、酶解液、豆浆液及发酵液利于小鼠增重,延长小鼠爬杆和游泳时间,并能提高脾脏指数和肾脏指数,增加肝脏糖原储备能力;与纯净水组相比,各种灌胃试剂在一定程度上有利于血液中乳酸脱氢酶含量的升高,而大豆多肽和大豆蛋白发酵液可以使血液中血尿氮含量降低.     

米曲霉发酵大豆多肽工艺条件研究

以大豆分离蛋白为原料,通过米曲霉的发酵生产大豆多肽,先以水解度为指标初步探索发酵工艺条件,然后通过正交试验,并以大豆多肽含量为指标确定摇瓶发酵的最佳工艺条件,即发酵液初始pH6.0,发酵培养温度28℃,培养基中大豆分离蛋白含量3%,摇瓶转速180r/min,发酵时间60h～70h,得到的大豆多肽发酵液具有良好的口感。     

液体发酵法制备风味良好的大豆多肽

研究了液体发酵法制备大豆多肽的一些影响因素 ,包括培养基的组成、发酵温度、pH、接种量、菌龄以及发酵时间等。结果表明 ,在 2 8℃ ,pH6,发酵 2 4～ 3 0h的条件下可获得色泽良好、风味纯正的大豆蛋白水解液 ,其水解度达到 2 5 %～ 3 0 % ,多肽得率高达 75 %。经质谱分析 ,发酵液分子质量主要分布在 40 0 0u ,这表明深层液体发酵法是工业化生产制备大豆多肽的一种很有潜力的方法     

通过大豆蛋白的酶水解作用来制成功能性低聚肽(缩氨酸)

本文系统地研究了用蛋白酶和AS.1398中性蛋白酶对大豆蛋白进行水解而制成功能性低聚肽的加工工艺。详细地介绍了主要的工艺步骤,包括大豆蛋白溶液的预处理、大豆蛋白的酶水解、水解物的脱苦和脱盐等。重点讨论了通过大豆蛋白水解作用生产功能性低聚肽时,影响其生产的各种因素如基质的浓度、酶的剂量、反应温度及时间.PH值等。在最佳条件下,大豆蛋白的水解程度可达到35%。大豆低聚肽链会有2-4氨基酸。     

酱油酿造过程中微生物及生物酶的研究进展

酱油是以大豆或豆粕、小麦粉或麸皮为原料,依靠微生物发酵而生产的一种液态调味品。在发酵过程中,微生物对原料中的蛋白、淀粉等营养物质进行分解,此过程起主导作用的是微生物所分泌产生的生物酶。当前国产酱油采用米曲霉沪酿3.042（Aspergillus oryzae 3.042）进行发酵,利用其产生的碱性和中性蛋白酶把原料中的蛋白分解为 氨基酸和多肽,为酱油提供以鲜味为主的多种滋味,但仅以米曲霉单菌种酿造的酱油存在原料利用率低、风味相对差等问题。随着消费者对酱油品质要求的提高,学术界和生产企业正在通过微生物诱变、多菌种发酵、生物酶制剂应用等多种方式改善发酵过程中生物酶的种类和活性,以进一步提升酿造酱油的品质。该文重点综述了酱油酿造过程中的关键微生物、生物酶及其研究进展和在酱油中的应用,以期对利用微生物、生物酶制剂提升酱油品质提供理论指导。     

大米蛋白渣酿造酱油发酵工艺

大米蛋白渣是大米淀粉糖企业的副产品,用于酿造酱油具有潜在优势。首先以氨基态氮为指标,在大米蛋白渣与豆粕比例为1∶2,40℃无光照发酵,确定最佳发酵时间为15 d。然后以温度、原料配比、光照和变温为试验因素进行发酵工艺的优化试验,确定最佳的发酵工艺条件为:大米蛋白渣与豆粕配比为1∶2,45℃恒温有光照发酵15 d,所得酱油氨基态氮和感官质量均达到国标。     

酱油的罐式与池式发酵过程中关键呈味物质对比分析

从发酵罐和发酵池中选取发酵过程中的酱油进行中性蛋白酶活力、氨基酸态氮含量、游离氨基酸含量、pH值、总酸含量、有机酸含量、还原糖含量、淀粉酶活力和食盐含量的检测与分析。结果表明：池式发酵酱油的中性蛋白酶活力、氨基酸态氮含量、氨基酸总量、有机酸总量、淀粉酶活力、还原糖含量、总酸含量和pH值都高于罐式发酵酱油;食盐含量则是罐式酱油更多;其中鲜味氨基酸在发酵12 d后池式酱油的含量就高于罐式酱油的含量,尤其是池式酱油的谷氨酸在发酵45 d时已达到10.42 g/kg,而罐式酱油的谷氨酸含量仅7.91 g/kg;两种方式发酵的酱油都能检测出7种有机酸,且含量较高的两种有机酸分别是乳酸和乙酸;在发酵结束时池式酱油的还原糖含量比罐式酱油的还原糖含量高1.01 g/100 g;池式酱油的食盐含量比罐式酱油的食盐含量低0.90 g/100 g,说明在关键呈味物质上池式发酵酱油优于罐式发酵酱油。     

面粉对发酵酱油品质的影响研究

在工业化生产条件下,以面粉和小麦粉混合发酵酱油(FWSS)和纯小麦粉发酵酱油(WSS)为研究对象,通过测定其理化指标、氨基酸组成以及挥发性化合物组成,结合感官评价结果分析两类酱油风味品质差异的形成原因。结果显示：除总酸外,其他理化指标均无显著性差异;FWSS酱油中大部分氨基酸含量均高于WSS酱油,差异较大的为谷氨酸含量(FWSS=21.11%,WSS=20.35%)。挥发性化合物测定结果显示FWSS酱油挥发性化合物相对含量较高,其中酱油中常见的香气活性物质4-羟基-5-乙基-2-甲基-3(2H)-呋喃酮(HEMF,焦糖香),4-乙基愈创木酚(4-EG,烟熏香)含量差异较为明显,与感官评价结果中FWSS酱油其烟熏香味、焦糖香味更加丰富的结果一致。表明在工业生产中,加入40%的面粉替代小麦粉发酵酱油(FWSS),可明显降低酱油中总酸含量(FWSS的总酸含量为1.15 g/100 g,WSS的总酸含量为1.24 g/100 g),提高酱油的香气饱满度和滋味特征。本研究可为高盐稀态酱油的风味品质提升提供理论指导。     

2 种米曲霉发酵酱油风味物质比较

为进一步比较传统菌株米曲霉沪酿3.042和前期实验诱变菌株米曲霉100-8酿造酱油的差异。通过高效液相色谱、气相色谱-质谱联用仪比较酱油中有机酸、氨基酸和风味物质成分的差异。通过发酵终期酱油有机酸的结果比较发现：米曲霉100-8发酵的酱油中苹果酸含量增加,柠檬酸和琥珀酸含量下降。通过酱油发酵在大曲阶段和后期阶段的氨基酸比较发现,使用米曲霉100-8菌株发酵的酱油大曲及其后期发酵为酱油阶段,天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸这3 种氨基酸含量都明显升高。这些有机酸和氨基酸含量之间比例的差异性是造成酱油风味不同的原因之一。对风味物质成分的分析发现：与对照相比,米曲霉100-8发酵的酱油中醇、醛、酸和吡嗪类物质都有所增加,其中风味物质增多最明显的是吡嗪类。通过米曲霉100-8酿造的酱油与传统米曲霉沪酿3.042比较,其有机酸、氨基酸和风味物质都有明显的不同。     

ACE inhibitory and hydrolytic enzyme activities in textured vegetable protein in relation to the solid state fermentation period using Bacillus subtilis HA

Textured vegetable protein (TVP) was fermented by solid-state fermentation using Bacillus subtilis HA and production of biologically active compounds were examined with fermentation time. The TVP fermented resulted in the highest protease activity at 48 hr, where as α-amylase activity was the highest at 24 hr. During the fermentation the peptide and tyrosine content increases drastically and then it decrease gradually after 48 hr. The fast protein transition to low molecular peptides in early fermentation period was confirmed with sodium dedecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and size exclusion chromatography (SEC) analysis. Fibrinolytic enzyme activity proportionately increased with the fermentation time and the highest enzyme activity was 25.2 unit/g after fermentation for 120 hr. In the evaluation of ACE inhibitory effect, IC₅₀ value of fermented TVP and its crude peptides was similar with 2.19 and 1.21 mg/mL, respectively. Peptide fraction below 3,000 Da showed 0.5 mg/mL of IC₅₀ value. The peptide fraction (III) with molecular weight of 500–999 Da separated from SEC was consisted of 7 amino acids, indicated 0.094 mg/mL of IC₅₀ value which is 23 times higher than the fermented TVP.     

甘氨酸甜菜碱及复合纤维素酶对酱油发酵的影响

将甘氨酸甜菜碱作为渗透压保护剂,于酱醪上罐时(0d)或酱醪发酵30d后添加到高盐稀态酱油发酵的酱醪中,同时添加外源复合纤维素酶,观察其对酱醪发酵的影响。结果表明：在酱醪上罐时(0d)或酱醪发酵30d后同时添加不同质量分数的甘氨酸甜菜碱(0.20%、0.30%)及质量分数0.15%的复合纤维素酶(105EGu/100g酱醪),均能有效提高发酵酱油中蛋白质转化率,达2.26%～7.92%。添加甘氨酸甜菜碱能显著改善高盐稀态发酵酱油头油品质,平均缩短发酵时间15d左右;另外,在酱醪发酵30d后再添加甘氨酸甜菜碱和外源复合纤维素酶其效果更佳,同0d时添加相比,蛋白质转化率平均提高了3.17%。     

解淀粉芽孢杆菌SWJS22和米曲霉混合制曲在酱油发酵中的应用

以解淀粉芽孢杆菌SWJS22和米曲霉为发酵菌株,考察米曲霉单独制曲发酵、米曲酶和解淀粉芽孢杆菌曲料混合发酵以及双菌种混合制曲发酵对酱油理化指标及风味的影响。结果表明:曲料混合发酵的酱油氨基酸转化率有较大提高,色率和色深物质均低于米曲霉单独制曲发酵的酱油和双菌种混合制曲发酵的酱油,曲料混合发酵酱油和双菌种混合制曲发酵的酱油谷氨酸含量有明显提高。采用气相色谱-质谱对比分析3种不同曲料发酵酱油的风味物质,结果表明:3种酱油的风味物质种类差别不明显,重要风味成分在3种酱油中均有检出,曲料混合发酵的酱油酸类物质的含量最低。     

Proposing sequences for peptides derived from whey fermentation with potential bioactive sites

In fed-batch fermentation by Kluyveromyces marxianus var. marxianus, whey-soluble proteins were converted into oligopeptides. To assess whether bioactive peptides could be produced during whey fermentation, K. marxianus was cultured in batch in deproteinized media containing 5 or 15% (wt/vol) dehydrated whey for 20 h and then was in fed-batch mode for 50 h. After harvesting the biomass (25,000 x g, 15 min), at 6-h intervals, the wort was analyzed to determine protein consumption and oligopeptide production by HPLC. The proteins in the wort showed an oscillatory degradation with a constant increase in the production of oligopeptides. Four major peaks were collected and were analyzed by API mass spectroscopy. Sequences of fermented peptides were compared with sequences of known bioactive peptides. On the basis of their molecular weights, two amino acid sequences were proposed. The presence of sites containing the peptide sequence of beta-lactorphin (YLLF) suggests that these oligopeptides may have antihypertensive properties.     

Lactobacillus salivarius for Conversion of Soy Molasses into Lactic Acid

The feasibility of conversion of soy molasses, a low value by-product of soy protein production, to lactic acid by fermentation with Lactobacillus salivarius was investigated. The basic environmental parameters affecting growth and lactic acid production were determined. Lactic acid production in soy molasses was optimal at pH 5.6 and 42°C. Addition of 0.5% yeast extract to soy molasses reduced fermentation time from 36 to 10 hr and increased lactic acid production by 30%.