气相色谱法和折光率法测定乙醇-正丙醇物系组分含量比对

建立了气相色谱氢火焰离子化检测器(FID)测定乙醇-正丙醇物系含量方法,并通过实验拟合得到折光率和乙醇质量分数线性方程y=-4 194.6x+5 792.5(R~2=0.999 5)。比对气相色谱法和折光率法测定乙醇-正丙醇物系中乙醇和正丙醇含量。结果表明,当乙醇含量≥30%,折光率法检测相对误差RE≤3.0%,可以采用折光率法进行快速检测;当乙醇含量<30%,折光率法检测RE>5%,随着乙醇含量降低,RE逐渐升高达到19.50%,而GC检测RE均<2%,建议采用GC进行检测。该方法线性关系良好,乙醇回收率99%～101%,精密度良好,准确度高,耐用性好,溶液稳定,检测限为0.000 77%,定量限为0.002 6%,可用于乙醇-正丙醇物系定量检测。     

气相色谱法和折光率法测定乙醇-正丙醇物系组分含量比对

建立了气相色谱氢火焰离子化检测器(FID)测定乙醇-正丙醇物系含量方法,并通过实验拟合得到折光率和乙醇质量分数线性方程y=-4 194.6x+5 792.5(R²=0.999 5)。比对气相色谱法和折光率法测定乙醇-正丙醇物系中乙醇和正丙醇含量。结果表明,当乙醇含量≥30%,折光率法检测相对误差RE≤3.0%,可以采用折光率法进行快速检测;当乙醇含量<30%,折光率法检测RE>5%,随着乙醇含量降低,RE逐渐升高达到19.50%,而GC检测RE均<2%,建议采用GC进行检测。该方法线性关系良好,乙醇回收率99%～101%,精密度良好,准确度高,耐用性好,溶液稳定,检测限为0.000 77%,定量限为0.002 6%,可用于乙醇-正丙醇物系定量检测。     

气相色谱法测定依达拉奉中有机溶剂的残留量

建立了依达拉奉原料药中乙醇、乙酸乙酯残留量的测定方法。采用Rtx-5毛细管柱,程序升温法,FID检测器,以外标法进行测定残留溶剂的含量。乙醇、乙酸乙酯在所考察的浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.41%(RSD=3.2%)、100.4%(RSD=4.4%);检测限分别为3.09 ng、2.88 ng,精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于5%;乙醇,乙酸乙酯残留含量均符合药典规定。该方法简便、快速、灵敏及重现性好,适用于依达拉奉原料药中有机溶剂残留量的测定。     

GC法测定多肽原料药中残留溶剂的含量

建立GC法测定多肽药物中乙醇、乙腈、乙醚和异丙醇含量的方法,以FID为检测器,按照外标法计算含量。经考察,该方法具有专属性,各溶剂浓度与峰面积的直线回归系数均大于0.999,各溶剂的加标回收率均在80%~120%,重复性和中间精密度考察RSD均小于5.0%,乙醇、乙醚、异丙醇和乙腈的定量限分别为3.58、2.58、3.57、3.10μg/m L,并具有良好的耐用性,可用于多肽原料药中残留溶剂的分析。     

高效液相色谱法测定枸橼酸舒芬太尼的含量

建立高效液相色谱法测定枸橼酸舒芬太尼原料液含量的方法。采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,流动相为0.13mol·L~(-1) NH_4Ac溶濬液-甲醇-乙腈(31:45:24)(HAc调节溶液pH值至7.2)流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为228nm,柱温为40℃进样体积10μL。试验结果表明舒芬太尼的线性范围为:10.14～100.14μg·mL~(-1)(r=0.9998);检测限与定量限分别为1.22gg·mL~(-1)与4.15ng·mL~(-1);精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD2.0%;加样回收率为98.6%～101.3%(RSD=0.91%,n=9),因此本方法测定结果的准确度与精密度良好,适用于枸橼酸舒芬太尼原料药的含量测定。     

HPLC法测定无盐咪唑啉中丙烯酸含量

采用高效液相色谱(HPLC)法测定无盐咪唑啉中丙烯酸的含量。结果表明,丙烯酸在9.09~77.27μg/mL与峰面积有良好的线性关系(r=0.999 5),该方法的检出限和定量限分别为0.1μg/mL和0.3μg/mL;精密度、重复性实验相对标准偏差(RSD)均小于2.0%。丙烯酸的平均加标回收率为90.99%,RSD为2.52%(n=9)。     

折光率法快速测定N,N-二甲基甲酰胺中水分的含量

介绍了一种采用折光率法快速测定N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中水分含量的方法,该方法具有操作简单,准确度高,重复性好等优点,非常适用于化工生产行业中的现场监控。用该法测定高、中、低三个不同浓度添加量的相对误差(RE)在0.8%～2.0%之间,对同一样品重复测定的标准偏差(SD)为0.45,相对标准偏差(RSD)为2.85%(n=6)。     

双氯芬酸钠残留溶剂的GC法测定

建立GC法测定双氯芬酸钠中的残留溶剂(甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷)的含量。色谱柱:DB-624(30m×0.320 mm,1.8μm);进样口温度250℃,程序升温。甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷在5~5000 ppm范围内线性关系良好,检测限为1ppm,平均回收率分别为100.7%、99.1%、98.8%、101.3%、98.3%,RSD分别为1.78%、2.16%、3.01%、1.96%、2.37%。本方法简便、快速、准确、灵敏度高、专属性好、重复性好,可用于双氯芬酸钠原料的残留溶剂测定。     

HPLC法测定典必殊滴眼液中苯扎溴铵含量

建立了HPLC法测定典必殊滴眼液中苯扎溴铵含量的方法。方法色谱柱为Eclipse XDB-C18 150*4.6mm,5μm column;以乙腈-0.05mol/L醋酸铵(1%三乙胺溶液用冰醋酸调p H值至5.0)(65:35)为流动相;流速为1.0ml/min;检测波长为262nm;柱温为30℃;进样量为20μl~([1])。结果该方法专属性良好,准确度RSD为0.42%,重复性RSD为0.43%,稳定性RSD为0.6%,苯扎溴铵浓度在65.4~152.6μg/ml范围内与峰面积呈现良好线性关系(r~2=0.9998),平均回收率为99.8%,耐用性符合含量测定要求。三批次典必殊苯扎溴铵含量分别为102.2%、100.1%和98.3%。     

复元胶囊中山茱萸含量测定方法的探讨

建立复元胶囊中山茱萸的含量测定方法。采用HPLC(高效液相色谱)法对复元胶囊中山茱萸主要成分莫诺苷(C₁₇H₂₆O₁₁)和马钱苷(C₁₇H₂₆O₁₀)进行含量测定；色谱柱Waters Symmetry^?C₁₈柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液进行梯度洗脱，检测波长为240 nm。复元胶囊中山茱萸的两个被测组分的线性范围分别为：莫诺苷2.46～49.21μg/mL(r=0.9991)、马钱苷2.45～48.97μg/mL(r=0.9995);平均加样回收率分别为95.20%、93.42%,RSD分别为0.78%、0.93%(n=6);定量限分别为16.40,16.33 ng/mL;检测限分别为4.92、4.90 ng/mL;稳定性试验、重复性试验、精密度试验均良好，RSD均小于2.0%(n=6)。该方法操作简便、灵敏度高、准确可靠、稳定性和重复性良好，可作为复元胶囊的质量控制...     

超高效液相色谱法测定德谷胰岛素含量

目的：建立测定德谷胰岛素含量的超高效液相色谱法。方法：色谱柱为Waters C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相A为0.1 mol/L硫酸钠溶液（pH值5.7）-乙腈（体积比90∶10）,流动相B为50%乙腈,梯度洗脱;流速为0.25 mL/min,检测波长为214 nm,柱温为40℃,进样量为2μL。结果：德谷胰岛素浓度在0.1～1.2 mg/mL时与峰面积线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD均小于1%,平均回收率为100.10%,回收率RSD为0.63%(n=9)。结论：该方法专属性强,精密度、稳定性、重复性、耐用性好,可用于德谷胰岛素的含量测定。     

测定含甘油牛血清白蛋白样品Lowry法的优化及验证

目的优化《中国药典》三部(2015版)通则50中Lowry法2试验条件,进一步提高检测结果的准确性,并进行方法学验证,为柱纯化组分百日咳疫苗中间品蛋白准确定量提供参考。方法用Lowry法2测定经脱氧胆酸钠-三氯乙酸预处理的不同浓度且含50%甘油的牛血清白蛋白,使福林酚反应在20℃水浴条件下分别静置30、40和50 min,筛选出蛋白含量测定值相对误差最小的反应时间;再在10、20和30℃条件下,筛选出相对误差最小的反应温度。对该方法进行精密度、准确度、专属性验证,并确定线性范围。结果福林酚反应温度为30℃、反应时间为30 min时,测定值的平均相对误差最低,与其他试验条件的差异有统计学意义(P0.05)。在该试验条件下,同一工作日不同试验人员间及同一试验人员不同工作日检测结果的RSD均小于2.00%,重复性检测结果 RSD为0.50%,精密度良好;30、50和70μg/m L蛋白溶液测定值的RSD均小于2.00%,回收率在99%~102%之间,可对蛋白准确定量;含甘油50μg/m L蛋白溶液的回收率及其RSD分别为102%和0.50%;不含甘油对照组回收率和RSD分别为100%和0.82%,专属性良好;在0~140μg/m L标准范围内,检测含甘油样品的测定范围在15~140μg。结论采用Lowry法2测定含高浓度甘油的蛋白样品时,福林酚反应温度、反应时间是影响试验结果的重要因素。30℃条件下反应30 min,可提高测定结果的准确性,符合且更有利于柱纯化组分百日咳疫苗中间品的蛋白定量的要求。     

壮药千葛颈舒康颗粒质量标准的研究

采用TLC法对千葛颈舒康颗粒中千斤拔、鸡血藤和粉葛等药材进行定性鉴别;采用HPLC法测定粉葛中葛根素的含量。结果显示千斤拔、鸡血藤和粉葛的TLC图谱特征斑点显色清晰,分离度良好,且与阴性对照无干扰。葛根素在17.1～171.0μg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均<2.0%,平均加样回收率为99.42%,RSD为1.81%(n=9)。所建立的方法专属性强、简便可行,结果准确、可靠,可用于千葛舒康颗粒的质量控制。     

HPLC法测定肺炎球菌多糖疫苗中的苯酚含量

目的建立测定肺炎球菌多糖疫苗中苯酚含量的HPLC法。方法采用Novo-Pak C-18色谱柱(3.9 mm×150 mm,4μm),以甲醇-水(20∶80)为流动相进行洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为271 nm,柱温为25℃,进样量为10μl。对该方法的适用性、专属性、精密度、重现性、稳定性、准确性进行验证,并确定该方法的线性范围及定量限。用建立的方法检测6批23价肺炎球菌多糖疫苗中苯酚含量,并与溴量滴定法进行比较。结果苯酚浓度在0.031 25~0.500 2 mg/ml范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000),定量限为0.31μg/ml;供试品溶液的色谱峰与苯酚对照品溶液的主峰保留时间均约在4.5 min;苯酚对照品溶液连续进样6次,峰面积相对标准偏差(RSD)为0.09%,保留时间的RSD为0.02%;6份同1批供试品溶液中苯酚含量的均值为2.42 mg/ml,RSD为0.48%;同1份供试品溶液室温下放置,0~24 h测定12次,保留时间均值为4.485,RSD为0.53%,峰面积平均值为1 037 336,RSD为0.29%;9份加标供试品溶液的平均回收率为99.63%,RSD为1.18%。6批23价肺炎球菌多糖疫苗中苯酚含量的两种方法检测结果基本一致。结论建立的HPLC法操作简便,专属性、精密度、准确度、重现性、稳定性好,可对23价肺炎球菌多糖疫苗中的苯酚进行准确定量。     

总有机碳检测法在血液制品清洁验证中的应用

目的利用总有机碳(total organic carbon,TOC)分析仪建立血液制品清洁验证分析方法。方法制备碳浓度为5、10、15 ppm的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)溶液,检测TOC值,并计算回收率,验证方法的准确性;制备6份碳浓度为10 ppm的BSA溶液,检测TOC值,计算相对标准偏差(relative standard deviation,RSD),验证方法的重复性;制备碳浓度分别为0、1、2.5、5、10、15和20 ppm的BSA溶液,检测TOC值,验证方法的线性;测定10次TOC检测用水的TOC值,计算SD,确定方法的检测限(limit of detection,LOD)和定量限(limit of quantitation,LOQ);制备碳浓度分别为0、1、2.5、5、10、15和20 ppm的BSA溶液,先以从低到高浓度,再以从高到低浓度顺序分析,检测TOC值,分别计算回归曲线决定系数,确定残留效应;分别在不锈钢和玻璃材质上擦拭取样,检测TOC值,计算回收率及RSD。对清洁后的血液制品生产用设备和器具擦拭取样,检测TOC值,确认清洁效果。结果 3个碳浓度的BSA溶液TOC值回收率均在90%~110%之间,RSD值均小于5%;6份BSA溶液的TOC值的SD为0.202 ppm,RSD为2.13%;碳浓度在0~20 ppm范围内的BSA溶液的加样TOC值与测得TOC值呈良好的线性关系,R2=0.999 5;检测用水的10次TOC检测值的LOD和LOQ值均明显低于10 ppm;两条回归曲线的决定系数的RSD为0.03%;不锈钢和玻璃材质擦拭取样的TOC检测值最低回收率分别为74%和77%,不同工作人员检测结果 RSD均≤20%。血液制品TOC检测擦拭法清洁验证结果均低于2μg/cm2。结论 TOC检测法具有良好的准确性、重复性、灵敏度、线性,血液制品清洁残留量均低于残留限度,达到预计的清洁效果。该方法快捷简便,适用于血液制品的擦拭法清洁验证。     

HPLC法同时测定市场上几种化妆品中10种α-羟基酸的含量

目的:通过建立10种α-羟基酸高效液相色谱法,测定市场上几种化妆品中限用组分a-羟基酸的含量。方法:采用HPLC法测定化妆品中10种α-羟基酸的含量,并进行方法学考察。结果在本方法中10种α-羟基酸检测限低、线性范围广且线性关系良好、精密度高、日间稳定性良好;平均回收率在93.30%～106.60%之间,RSD值在0.1%～0.5%;样品经过检测α-羟基酸总含量均低于6%。结论本方法简单,检测限低,精密度和稳定性都良好,可以满足对市场中各类化妆品中的a-羟基酸的限量筛查,为化妆品的监督管理提供了一定的依据。     

HPLC法测定银黄甘颗粒中甘草有效成分甘草酸的含量

运用HPLC法测银黄甘颗粒中甘草有效成分甘草酸的含量，以期为银黄甘颗粒的质量控制提供可靠的依据。结果本方法用于甘草酸的含量测定具有专属性；甘草酸在49.97～499.73μg/mL范围内线性关系良好，相关系数R²为0.999 9;甘草酸峰面积精密度RSD为0.3%;甘草酸的测定重复性RSD为0.7%;甘草酸的回收率为99.17%～101.46%;耐用性较好。表明该方法线性范围宽、分析时间短、样品前处理简便、定量结果准确、重现性好，为其质量控制提供了依据。     

重组蛋白中G418残留量超高效液相色谱-蒸发光散射检测方法的建立

目的建立定量检测重组蛋白中G418残留量的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)-蒸发光散射检测(evaporative light scattering detection,ELSD)法,并进行验证。方法G418经UPLC洗脱后,通过蒸发光散射检测器检测,首先将柱洗脱液雾化形成气溶胶,然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发,余下不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中进行检测,通过标准曲线计算质控品中G418浓度。对建立的方法进行专属性、重复性、中间精密度、定量限、耐用性、线性验证。结果G418浓度在0.01~0.20 mg/mL范围内,标准曲线的线性较好,R2>0.99,定量限为0.01 mg/mL;质控品的加样回收率在80%~120%之间;中间精密度试验回收率的RSD为3.44%;定量限试验回收率的RSD为5.38%;耐用性试验回收率的RSD为4.56%。结论UPLC-ELSD法精密度良好,可用于重组蛋白研发及生产过程中G418残留的监测。     

b型流感嗜血杆菌结合疫苗中蔗糖含量检测方法的建立及验证

目的建立测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗中蔗糖含量的旋光法,并对方法进行验证。方法建立旋光法,检测b型流感嗜血杆菌结合疫苗中的蔗糖含量,并对方法进行专属性、线性范围、重复性、准确性、耐用性和稳定性验证。结果 b型流感嗜血杆菌结合疫苗中其他组分对蔗糖旋光度无干扰;蔗糖浓度在2~10 mg/ml范围内与旋光度具有良好的线性关系(r=0.999 998);重复测定供试品溶液6次,相对标准偏差(RSD)为0.46%;低、中、高浓度的供试品平均回收率分别为99.18%、99.14%、98.95%;温度在10~30℃范围内对旋光度无明显影响;样品于20℃放置5 h内旋光度无明显变化。结论建立了旋光法检测b型流感嗜血杆菌结合疫苗中蔗糖含量的方法,该方法操作简单快速,在确定的限度范围内具有较好的专属性、重复性、准确性、耐用性和稳定性。     

高效液相色谱串联三重四级杆质谱法检测重组铜绿假单胞菌外毒素A蛋白质原液中氨苄西林残余量

目的建立高效液相色谱串联三重四级杆质谱法检测重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)蛋白原液中氨苄西林残余量。方法用乙腈沉淀蛋白质,离心后收集上清,采用高效液相色谱串联三重四级杆质谱法上样分析,色谱条件:色谱柱Zorbax SB-C18 Rapid Resolution HT,1.8 Micron2.1 mm×100 mm,流动相30%乙腈,流速0.1 ml/min;质谱检测条件:多重反应监测(multiple reaction monitoring,MRM),正离子模式,ESI电压3 500 V,碎裂电压110 V,碰撞能10,气体流速8 L/min,母离子的质荷比(mass to charge ratio,m/z)=350.1,定量子离子m/z=105.8,定性子离子m/z=159.9。对建立的方法进行系统适用性、专属性、精密度、稳定性验证,确定该方法的线性范围及最低检出限、定量限,并进行基质效应试验。结果该方法试验参数符合检测要求,对氨苄西林的检测专属性强,当氨苄西林浓度在10~100 ng/ml范围内,r20.999 00,最低检出限为5 ng/ml,最低定量限为10 ng/ml。氨苄西林加标试验的回收率在98%~110%之间,重复性及日间精密度RSD均小于5.5%;冻融稳定性、样品前处理后的稳定性、短期稳定性试验中,样品回收率均在95%~120%之间;以超纯水5倍稀释的r EPA蛋白原液作为溶剂配制的3个不同浓度的氨苄西林对照品溶液的回收率均接近120%,RSD值在3%~5%之间,准确度和精密度良好。结论该方法系统适用性好,灵敏度高,专属性强,准确度和精密度好,检测时间短,是一种易于实现仪器自动化分析的方法。