一种简易快速的扫描电镜样品干燥的方法

在扫描电镜观察大多数制样采用临界点干燥法。这里向大家介绍的是用HMDS法,这一新的方法的全过程,包括组织先在3.1％戊二醛溶液中固定,再用1％锇酸后固定,并进行系列乙醇脱水,HMDS干燥,再离子测射,最后通过扫描电镜观察。我们经过对小鼠的脏器,兔的主动脉,培养细胞以及立克次氏体等样品的制备,并通过扫描电镜的观察,发现不仅在样品的表面形态,而且在微细结构方面均与临界点干燥法无明显差别。常规干燥方法,采用临界点干燥法,它需要临界点干燥仪,还需要高纯度二氧化碳。在夏季特别是室温超过30℃时,液态CO_2难于装满干燥仪的样品室。因此,在样品室加热时,CO_2液面要穿过样品,     

大鼠板层骨的扫描电镜观察

骨组织经常处于活跃的形成、吸收和改造,这主要发生于骨表面,故很适于用扫描电镜观察。下面介绍我们用扫描电镜对大鼠板层骨进行研究的初步的结果。材料和方法:(1)为观察骨表面细胞,经主动脉向下肢灌流2％戊二醛固定后取股骨中段,用牙科薄砂轮纵行锯开,经注射器用盐水轻轻冲掉骨髓,戊二醛浸泡,1％锇酸后固定,临界点干燥、离子溅射仪喷金,JSM35—CF扫描电镜观察骨内膜表面细胞。同时取胫骨上端、矢状锯开,观察新生骨梁;(2)为观察去掉表面细胞后类骨组织的表面,取胫骨中段如前法,用力冲洗,足可去掉绝大部分表面细胞,必要时使用超声震荡;(3)为观察骨组     

“814”体外杀精剂对人精子杀伤效果的扫描、透射电镜观察

“814”体外杀精剂以下简称“814”是从茶叶中提炼出来的外用避孕药。经药物毒性实验和其他生物学实验表明“814”较之目前国内其他的外用避孕药、具有毒性低,付作用小,杀精效果明显等优点。本文用扫描电镜和透射电镜观察经“814”作用后精子的形态学改变。材料与方法:将新鲜精液加等量的5％葡萄糖生理盐水稀释并分成四个实验组和一个对照组。四个实验组再加等量的“814”生理盐水溶液,使“814”的最终浓度分别为3％、0.3％、0.03％、0.003％。对照组以生理盐水代替之,混合后1Omin,即行标本制作。扫描电镜样品经戌二醛、锇酸固定,CO_2临界点干燥,离子溅射喷金后,行扫描电镜观察。透射电镜经双重固定后Spurr′s树脂包埋、超薄切片,行透射     

日本脑炎病毒感染鼠脑神经元的超微结构研究

多种节肢动物传播的人类病毒性脑炎病毒能在鼠脑神经元内复制、增殖、并产生严重的细胞病变。本研究应用透射电镜观察日本脑炎病毒(JEV)感染小白鼠后,发病动物大脑海马回神经元的超微结构病变特征以及病毒在细胞内增殖的形态特点。7—8克小白鼠,脑内接种JEV(京卫研_1A_2株)病毒悬液,发病后经麻醉取大脑海马回部位脑组织,按常规固定、脱水、Epon812包埋、半薄切片经精确定位后制作超薄切片,Phiilps EM-400T电镜观察。     

应用扫描电镜技术显示染色体方法的初探

光镜观察染色体,已沿续多年。扫描电镜问世以来,尤其是近10年来,国内外学者选用光镜观察认定的染色体标本,再重新用锇酸(1％O_sO_4)、丹宁酸(2％)浸渍,然后进行漂洗、自然干燥、黄金离子镀膜后上镜观察。其目的试图经电镜放大之后与光镜观察结果进行对比。近几年我们试用扫描电镜技术,经反复试验,成功地制备了染色体样品。其方法独特,结构新颖,为研究染色体开创了一条新路。一、材料与样品制作取临床病人静脉血0.5ml,注入装有1ml培养基(1640)的培养瓶中,置37℃培养箱72小时,取材前2小时加入秋水仙素1滴(10μg/ml),然后将其倒入离心管离心10分钟(2000转/分),弃上     

心肌纤维的ODO高分辨扫描电镜观察

本文采用ODO高分辨扫描样品制备技术,观察了小白鼠、大白鼠和犬心肌纤维表面及断面的微细结构,并讨论了高分辨扫描电镜观察法的技术特点,分析了心肌纤维的超微结构及其与功能之间的关系。技术方法按常规取材、将样品修成梭形,放入1％锇酸中固定1～2小时;继以1/15M磷酸缓冲液清洗,用25％、50％的二甲基亚砜分别浸泡20分钟,并在TF-2型冷冻割断台上将样品割断;尔后,用1％锇酸对样品作后固定,0.1％锇酸软化细胞基质,再以1～2％单宁酸对样品作导电处理,用1％锇酸对样品进行终末固定;最后,对其进行脱水、干燥、镀膜处理后,用扫描电镜观察。     

高温环境对腹腔巨噬细胞的影响

本文观察了外界高温(干球40℃,湿球35℃),不同劳动负荷等因素对SD大鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及超微结构的影响。材料与方法:81只160～230gSD大鼠被随机分成七个组。Ⅰ组为对照组,Ⅱ组为受热1小时组,Ⅲ组为受热2小时组,Ⅳ组为单纯游泳组V组为受热1小时游泳组,Ⅵ组为受热1小时延期4小时活杀组,Ⅶ组为受热1小时延期24小时活杀组。受热动物放入人工气候室受热,游泳组动物投入32℃温水中游泳,沉入水中10秒者判为劳动力衰竭。断颈活杀,收集腹腔巨噬细胞,做腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数、Fc受体、酸性磷酸酶活性等观察。在巨噬细胞混悬液中加鸡红细胞孵化10分钟后,用1％戊二醛固定,按常规方法电镜制样。在电镜随     

单用叔丁醇的扫描电镜样品制备法

单用叔丁醇扫描电镜样品制备法。是在叔丁醇冷冻干燥法的基础上作适当改良,以叔丁醇代替酒精脱水,不需进行置换直接进行叔丁醇冷冻干燥。我们用此法获得满意的结果,兹介绍如下。材料和方法将常规取材的新鲜标本,大白鼠气管、肾脏、小肠等组织,用生理盐水冲洗干净后迅速放入3％戊二醛固定液中固定2h。用0.1mol/L磷酸缓冲液冲洗3次,每次10min。用1％锇酸水溶液后固定1h。用双重蒸馏水冲洗3次,每次10min。用50％,70％,80％,90％,95％,100％的液体叔丁醇梯度脱水置换,每次10min。最后100％的叔丁醇需换两次。将纯叔丁醇在4℃冰箱中降温10min后,放入真空干燥器中干燥40min。等干燥后的样品温度升到室温后再取出,用导电胶贴在样品托上。用日产JFIC-1100型离子溅射仪镀膜5min。用日产林S-520型扫描电子显微镜观察照相。     

遗传性球形红细胞增多症的扫描电镜诊断

目的：为探讨遗传性球形红细胞增多症异形红细胞的形态分类,发生演变,发病机理和诊断及鉴别,本文运用扫描电镜技术对遗传性球形红细胞增多症的血工细胞进行研究。方法：５例遗传性球形红细胞增多症患者及２例农系成员的静脉血经抗凝和固定,离心和漂洗,干燥和喷金后置于扫描电镜下观察。结果：在观察红细胞从盘形到口形,最终至球形的过程中,作者对各型红细胞直径和中央凹陷直径及细胞厚度的变化作了测量,并结合细胞表面形态和     

肺巨噬细胞在某些实验病理情况下超微结构变化的电镜观察

本文以健康家兔为实验对象,分别采用夹闭肠系膜上动脉所造成的动脉闭塞性(SMAO)休克、自耳静脉注入油酸所复制的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)为实验模型,应用“洗肺”技术采取肺巨噬细胞,进行超薄切片和冷冻蚀刻电镜观察;分析比较了肺巨噬细胞在上述实验性疾病时的超微结构变化,探讨了肺巨噬细胞与某些病理过程的关系。一、材料与方法:将健康成年家兔,分为正常对照组,SMAO休克组和ARDS组。各组动物均以适量温生理盐水缓冲液(约50毫升),经气管插管反复灌洗肺组织(六次),再将洗出液三次离心沉淀(500克,8分钟/次),制得5×10~6/毫升肺巨噬细胞混悬液。此后,样品分别经2.5～4.0％戊二醛固定,以618树脂包埋制备超薄切片;经30％甘油生理盐水防冻处理,用日立FHZ—1型冷冻蚀刻装置制得冷冻复型膜。样品送H—500电镜观察,加速电压75KV。     

扫描电镜生物标本制备的超快微波处理技术

由于生物标本含有较多的水分,而扫描电镜内部是高真空的,它要求放入的标本必须干燥,但在样品空气干燥时由于液体表面张力的作用样品发生皱缩、龟裂,样品表面发生塌陷,使细胞外形发生明显改变、与生活形态的形状相差太多。为此,须对扫描电镜观察的生物样品进行固定、脱水,最后用临界点干燥器进行干燥,临界点干燥是传统的常规干燥方法。国外曾有人使用连续的微波照射固定扫描电镜样品,我们根据自己的实验经验,改进了微波固定样品的方法,使用微波照射干燥扫描电镜洋品取得很好的效果。胃和小肠,经缓冲液洗后,放入磷酸缓冲的2.5％戊二醛(pH7.3)中。实验共分三组:第1组为对照组;第2     

十二指肠上皮细胞的亚显微结构

本文以健康家兔十二指肠为实验材料,在超薄切片透射电镜观察的基础上,采用冷冻蚀刻技术对十二指肠上皮细胞的亚显微结构及其膜表面特化结构,进行观察分析。实验方法取新鲜材料,经4％戊二醛和1％锇酸双固定后,为了提高样品的反差和较好地显示细胞的膜结构,将样品放入1％单宁酸浸泡60分钟,尔后再用丙酮逐级脱水,EPON812包埋,超薄切片后送H—500电镜观察。冷冻蚀刻样品,系用HFZ—1型冷冻蚀刻装置,按常规操作步骤制备复型膜。     

家兔肺巨噬细胞的“洗肺”取材及其超微结构观察

许多实验研究证明,肺巨噬细胞不仅有很强的吞噬功能,而且参与某些免疫反应,因此被视为肺脏防御体系的重要组成部分,并引起人们的广泛重视。本文以家兔为实验材料,应用“洗肺”技术采取肺巨噬细胞,进行了超薄切片与冷冻蚀刻电镜观察,,以探讨巨噬细胞亚显微构造及其细胞膜结构与该细胞功能之间的关系。 (一)材料与方法:本实验用成年健康家兔,经放血处死后,立即切开气管并插入特制气管插管,注入适量(约50毫升)温生理盐水缓冲液,且随即吸出,如此反复灌洗6次。再将全部洗出液经三次离心沉淀(500克,8分钟/次),制得约5×10~6/毫升的肺巨噬细胞混悬液。接着,将离心后的细胞经4％戊二醛予固定,618树脂包埋,按常规方法制备超薄切片;同时,选用FHZ—1型冷冻蚀刻装置,制取冷冻蚀刻复型膜。最后送H—500透射     

隐埋扩散工艺点滴体会

我厂生产TTL双极型数字电路,采用一次外延两次扩散的p-n结隔离技术。即隐埋扩散—外延—隔离扩散。在此就隐埋扩散谈谈点滴看法和体会。 1.工艺条件 予氧化: 炉温=1180℃,水温=95℃。 氧气流量:700～800毫升/分 脱水: 炉温=1230℃,氮气流量:1000毫升。 时间=20～30分。     

狗肾血管构筑及血管和肾小管相互关系

成年狗4只,采用两种标本制作方法:①肾血管铸型,使用甲基丙烯酸甲酯(70％)和甲基丙烯酸丁酯(30％)混合予聚液为铸型剂,方法见文献1。②肾血管灌注乳胶后,除去结缔组织,同时显示肾血管和肾小管。主要步骤:肾动脉插管,注入氯丁乳胶至肾血管完全充盈;10％福尔马林固定一周;将肾横切成1mm左右的薄片;8N HCl,58℃30分钟;2％Tween—20,58℃,20分钟;酒精序列脱水;CO_2临界点干燥。两种标本真空镀金,在Hitachi—S450及JSM—35CF扫描电镜下观察及照相。     

红细胞扫描电镜样品的快速制作法

近年来红细胞疾病越来越多，许多疑难病例经临床常规方法难以确诊。为使医生对病人的红细胞外形及时了解，以便对病人尽快做出诊断和治疗方案，我们摸索出了一套简洁、快速、方便的红细胞扫描电镜样品的制作方法，经过对百余例临床活检的红细胞进行扫描电镜观察，及时、准确的观察到病人的红细胞外形及表面情况，为临床诊断提供了可靠的依据，其方法介绍如下。     

草鱼出血病病毒的电镜观察

草鱼出血病是我国淡水渔业的一大病害,我所与长江水产所协作开展对草鱼出血病病毒的分离,防治和分子生物学的研究。本文侧重介绍利用电子显微镜对草鱼出血病病毒的形态和超微结构的研究。材料与方法病毒制备成悬液,滴于火棉胶炭膜铜网上待干后,2％磷钨酸负染。取病鱼的肝、脾、肾组织和病变细胞,用2％戍二醛和1％锇酸双固定,苯二甲酸二丙烯酯包埋,LKB—8800型超薄切片,于JEM—100C电子显微镜观察。     

玻璃粉料粒度对B-Al-Si/Al_2O_3性能的影响

通过改变球磨时间,得到不同粒度的B2O3-Al2O3-SiO2(简称B-Al-Si或BAS)玻璃粉料。在玻璃粉料中混入质量分数为40%的Al2O3陶瓷粉末,用流延法制备了低温共烧BAS/Al2O3玻璃/陶瓷复相材料。研究了烧结温度和玻璃的粒度对复相材料的烧结性能、介电性能和热稳定性的影响。结果表明:在800～900℃,材料致密化后析出钙长石晶体;球磨1h的玻璃粉料与w(Al2O3)40%混合烧结的复相材料的性能最优,850℃保温30min后,于10MHz测试,其εr=7.77,tanδ=1×10-4;扫描电镜显示其微观结构致密,有少量闭气孔。     

电信服务标准(试行)

（续上期）法规标准4通信质量指标4．1固定电话通信质量指标41．l拨号前时延：平均值＜0．8秒，最大值1秒拨号前时延是用户搞机后至听到拨号音瞬间的时间间隔。41．2拨号后时延：长途呼叫的拨号后时延平均值＜6秒，最大值＄10秒，有卫星电路接入时放宽到20秒；本地呼叫的拨号后时延平均值＄22秒，最大值＄6秒拨号后时延是用户拨号终了至网络送出回铃音或忙音之间的时间间隔。41．3网络接通率：固定网内长途呼叫的接通率385％，固定网内本地呼叫的接通率395％网络接通率为用户应答、用户忙和用户久叫不应的次数与总呼叫次数之比（在忙时统计）。4．14传输损耗：＜21dB传输损耗指网络中任意两个用户之间的传输损耗。4．1．5振鸣和准振鸣：振鸣的概率＄O．1％准报鸣的概率＜1％41．6发话人回声：概率＜1％4．1．7可懂单话：本局用户间＄0．l％非本局用户间SI％4．1名单向传输时间：～般情况下单间传输时间＜150ms，对于有卫星电路的连接其单向传输时间＜400＜S。端到端的单向传输时间对话音等交互型业务是一个很重要的参数。过长的传输时间将导致用户通话困难。在本地局之间是纯数字网情况下，单向传输时间可按下式估算：3＋（0005＊...     

植物细胞中病毒内含体的电镜观察

植物病毒在寄主植物细胞中,其内含体都有一定形态。M.N.高尔琴应用光学显微镜研究了植物细胞内的病毒内含体,並用于植物病毒的初步诊断。作者应用电子显微技术,研究了PVX、PVY、PVS、PVA、TMV、CMV、SMV、TuMV、PMMV、及BYMV等10种病毒在不同寄主细胞内,其内含体的形态,取得一些结果。实验材料均为经生物纯化的病毒,回接在寄主植物上发病的典型株叶片。取样后切成约1mm~2小块,放0.1M PB液(pH7.0)中处理12小时,然后放入2％多聚甲醛与2.5％戊二醛混合固定液中,固定3—7天,经0.1M二甲砷酸钠缓冲液漂洗、2％锇酸固定20小时左右,使样品变黑为度,再经常规包埋。