牡丹花蕊黄酮对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用

目的：研究牡丹花蕊黄酮对H2O2诱导损伤的RAW264.7巨噬细胞的保护作用。方法：实验分为空白组、H2O2损伤组、VC对照组和牡丹花蕊黄酮低、中、高剂量组。应用H2O2建立RAW264.7巨噬细胞氧化损伤模型,噻唑蓝法测定细胞存活率,试剂盒法测定细胞和细胞培养液中谷胱甘肽和丙二醛含量及过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活力。结果：牡丹花蕊黄酮的质量浓度在10～30 μg/mL范围内时,可显著促进RAW264.7巨噬细胞的增殖（P＜0.05）。与H2O2损伤组相比,牡丹花蕊黄酮各剂量组能够提高细胞及细胞培养液中总抗氧化能力,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物酶、过氧化氢酶活力以及还原型谷胱甘肽含量,降低细胞及细胞培养液中丙二醛含量,提高细胞内乳酸脱氢酶的水平。结论：牡丹花蕊黄酮可以促进RAW264.7巨噬细胞的增殖,提高H2O2损伤的RAW264.7巨噬细胞的抗氧化能力,且存在剂量依赖效应。     

荔枝果肉多酚不同极性分部的构成谱及其抗氧化活性比较

利用乙酸乙酯和正丁醇2种不同极性溶剂对荔枝果肉多酚提取物水溶液分部萃取,采用高效液相色谱分析不同极性分部萃取物的多酚组分及其含量差异,并采用细胞抗氧化法评价其抗氧化活性差异。结果表明:荔枝果肉多酚不同极性分部的得率、总酚含量、总黄酮含量、多酚组成及含量、抗氧化活性存在显著性差异。3个极性分部萃取物的得率以水相最高(36%),正丁醇相(32%)次之,乙酸乙酯相(16%)最低。总酚含量以乙酸乙酯相最高,正丁醇相次之;总黄酮含量以正丁醇相最高,乙酸乙酯相次之;而抗氧化活性以正丁醇相最强,水相次之。乙酸乙酯相多酚组成主要为原花青素B2、表儿茶素等原花青素类化合物;正丁醇相多酚组成主要为槲皮素-3-芸香糖-7-鼠李糖苷等黄酮类化合物。     

化学发光法测定蕨菜黄酮的抗氧化活性

研究表明,蕨菜乙醇提取物具有显著的体外抗氧化活性。为了追踪蕨菜抗氧化活性,在单因素实验基础上,通过正交实验建立了"鲁米诺-邻苯三酚-碳酸盐缓冲液"发光体系测定抗氧化活性的方法,并对蕨菜乙醇总提物、乙醇总提物不同萃取部位抗氧化性进行评价。结果表明:蕨菜乙醇提取物经石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,可实现黄酮的初步分离。与总提物相比,乙酸乙酯萃取相黄酮含量高,体外抗氧化活性显著提高,且呈明显的量效关系,黄酮是蕨菜乙醇提取物主要的抗氧化活性物质。     

金银花叶黄酮体外抗氧化能力及对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用

目的：研究金银花叶黄酮的体外抗氧化能力和对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用。方法：金 银花叶粉经提取纯化后得到金银花叶黄酮粉,以抗坏血酸为阳性对照,测定金银花叶黄酮的总还原力,对羟自由 基、超氧阴离子自由基及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除能力。体外培养RAW264.7巨噬细胞,实验分为空 白组、模型组、对照组和金银花叶黄酮低、中、高剂量组,用H2O2诱导损伤RAW264.7细胞,噻唑蓝法测定细胞存 活率,试剂盒法测定细胞和细胞培养液中丙二醛、谷胱甘肽含量及超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活力。结果：金银 花叶黄酮的总还原力及对各自由基的清除能力较强,并在足够质量浓度下等同于对照品抗坏血酸。金银花叶黄酮呈 剂量依赖性保护H2O2引起的RAW264.7细胞的损伤,降低细胞及细胞培养液中丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶活力 及谷胱甘肽含量,提高细胞内乳酸脱氢酶活力。结论：金银花叶黄酮抗氧化能力较强,可修复H2O2诱导的RAW264.7 巨噬细胞的损伤,其作用可能与调节细胞氧化还原系统、清除自由基、提高细胞内抗氧化酶系的活力有关。     

石榴皮多酚超高压提取物的纯化、分离及功能性研究

为探明超高压提取石榴皮多酚的组分和功能特性,研究了石榴皮多酚超高压提取物的大孔树脂纯化和有机溶剂分级萃取,并对提取物、纯化物和分级产物的体外抗氧化活性和抑菌性能进行了测定。结果表明:大孔树脂纯化物的总酚含量高达77.40%,且抗氧化活性和抑菌性能均有显著提高;HPLC测定结果显示,大孔树脂纯化未改变多酚种类;有机溶剂分级萃取法能有效地将纯化物进一步分离,其中正丁醇相的萃取得率达到55.28%;不同萃取相产物的总酚含量大小顺序为:正丁醇相>乙酸乙酯相>水相,它们的抗氧化活性强弱顺序为:乙酸乙酯相>正丁醇相>水相;正丁醇相产物的抑菌活性最高,显著高于水相和乙酸乙酯相。     

覆盆子黄酮抗氧化活性研究

经分离提取后,对覆盆子黄酮提取物的体外抗氧化活性进行了研究,结果表明,覆盆子黄酮提取物对OH、H2O2、DPPH均有不同程度的清除作用,清除率强弱顺序为：纯化后的覆盆子黄酮〉覆盆子黄酮二次萃取物〉覆盆子黄酮粗提物;覆盆子黄酮提取物对花生油的自动氧化也有明显的抑制作用,0．2％覆盆子黄酮提取物在油脂中的添加量好于0．02％的BHT。     

金花葵花黄酮提取物不同溶剂萃取物的抗氧化活性

目的:研究金花葵花黄酮不同极性溶剂萃取物的体外抗氧化能力,并考察黄酮含量与抗氧化活性的相关性。方法:采用不同极性溶剂对金花葵花乙醇提取物进行液-液萃取,得到金花葵花黄酮样品为:石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相萃取物。测定不同极性溶剂萃取物中总黄酮含量,研究各萃取物的清除DPPH自由基能力、清除羟基自由基能力、还原能力、清除超氧阴离子能力和抗油脂氧化能力,分析黄酮含量与抗氧化活性的相关关系。结果:金花葵花黄酮不同极性溶剂萃取物均有抗氧化活性,顺序均为乙酸乙酯相正丁醇相乙醇提取物石油醚相水相。在0.20～1.00 mg/mL的萃取物质量浓度范围内,随着质量浓度的增加,抗氧化活性相应增大。质量浓度在1.00 mg/mL时,乙酸乙酯和正丁醇相萃取物的抗氧化活性接近于V_C。各萃取物中黄酮含量与抗氧化活性呈现较好相关关系(p0.05)。结论:金花葵花黄酮具有较高的体外抗氧化能力,乙酸乙酯相和正丁醇相萃取物可作为分离活性成分的研究重点。     

诃子果实活性成分提取及抗氧化活性研究

目的研究诃子果实不同萃取物及乙酸乙酯相各分离部分的抗氧化活性差异。方法用超声波法提取诃子果实的活性成分,依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取,比较不同萃取物的得率、总酚含量并采用DPPH法和ABTS法测定其抗氧化活性,抗坏血酸(VC)作为阳性对照。结果乙酸乙酯萃取物得率、总酚含量及抗氧化活性均显著高于其余萃取物(P0.05)。将乙酸乙酯萃取物通过Toyoperal 40-C柱进一步分离得到8个部分(Fragment 1-Fragment 8),其中Fragment 8和Fragment 2的抗氧化活性均高于VC,且Fragment 2的得率为Fragment 8的3.33倍。结论诃子果实不同萃取物抗氧化活性不同,其中乙酸乙酯萃取物的抗氧化活性较高。     

超声波-微波协同辅助萃取紫苏叶黄酮工艺优化及其抗氧化活性研究

采用超声波-微波协同方式辅助萃取紫苏叶黄酮,并对其抗氧化活性进行研究。通过单因素试验和响应面优化试验,探究料液比、乙醇浓度、提取时间和微波功率4个因素对紫苏叶黄酮提取量的影响,以紫苏叶黄酮提取量为响应值,获得最佳提取工艺参数,并探究紫苏叶黄酮对H2O2致RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,紫苏叶黄酮的最佳萃取工艺参数为:料液比1∶17(g/mL)、乙醇浓度62%、提取时间20 min、微波功率300 W;此条件下黄酮的提取量为8.33 mg/g;此外,紫苏叶黄酮浓度在100μg/mL～400μg/mL范围内,可以显著缓解H2O2对巨噬细胞增殖的抑制作用及提高胞内抗氧化物酶系酶活力,具有较好的抗氧化活性,是一种新型的天然抗氧化剂。     

牛蒡叶乙醇提取物的抗氧化性能

用95%乙醇浸泡提取传统药食两用植物牛蒡叶,并用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次对浸提液进行萃取。利用DPPH自由基清除法、O2-.清除法及.OH清除法测定各萃取部位的抗氧化活性,以VC、VE和叔丁基对苯二酚(TBHQ)为对照物。结果表明:牛蒡叶乙醇提取物具有较好的体外抗氧化活性,其中乙酸乙酯萃取物(E2)和正丁醇萃取物(E3)具有较强的清除DPPH自由基的能力,且活性强于TBHQ,利用标准曲线法对乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行绿原酸含量的测定,发现绿原酸含量分别达44.34mg/g和35.48mg/g。     

乌饭树果乙醇提取物不同极性分部的体外抗氧化活性研究

目的筛选乌饭树果乙醇提取物中抗氧化活性最强的极性分部。方法采用石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇和水等5种不同极性溶剂对乌饭树果乙醇提取物进行进一步梯度萃取,并分析比较其总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T_(AC))、抗脂质过氧化能力及对羟基自由基OH·、超氧阴离子自由基O_2~-·的清除效果。结果乌饭树果乙醇提取物的5个不同极性分部均具有一定的抗氧化活性,但其活性大小差异极显著(P0.01),T_(AC)大小依次为:乙酸乙酯部氯仿部正丁醇部石油醚部水部。同时,在OH·、O_2~-·自由基清除能力和抗脂质过氧化能力上,乙酸乙酯部均优于氯仿部和正丁醇部,且呈明显的量效关系。结论乌饭树果乙醇提取物的乙酸乙酯部具有最强的抗氧化活性,且对OH·、O_2~-·的清除能力及抗脂质过氧化能力均强于L-抗坏血酸及其它部位,可作为天然抗氧化剂的潜在有效来源。     

泡叶藻聚糖低分子质量降解片段组成特征及其体外免疫诱导活性

目的：对从泡叶藻（Ascophyllum nodosum）中提取的泡叶藻聚糖进行化学法降解,将得到的低分子质量降解产物进行分离纯化,分析其基本组成特征和体外免疫诱导活性,为泡叶藻聚糖或其他海藻多糖的生物活性和基本结构特征研究提供参考。方法：通过酸水解法和双氧水氧化降解法制备泡叶藻聚糖低分子质量降解片段,利用超滤法和Sephadex G-50凝胶柱层析分离纯化得到4 个泡叶藻聚糖低分子质量片段：HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2;采用对氨基苯甲酸乙酯柱前衍生样品后进行高效液相色谱及化学方法分析其单糖组成和化学组成;采用高效分子排阻色谱法测定其重均分子质量;通过小鼠巨噬细胞RAW264.7模型分析HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2的体外免疫诱导活性。结果：泡叶藻聚糖低分子质量片段的组成特征表明HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2均为杂多糖,且单糖组成存在较大差异,其重均分子质量分别为4.80、4.20、5.30、2.30 kDa。免疫活性分析细胞模型结果表明,HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F2在所测定质量浓度范围（0～200 μg/mL）内能明显诱导RAW264.7细胞活化,释放NO和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）,而H2O2-F1诱导RAW264.7细胞释放NO和TNF-α的活性明显低于HCl-F1、HCl-F2和H2O2-F2。结论：泡叶藻聚糖低分子质量降解片段（HCl-F1、HCl-F2和H2O2-F2）具有明显的免疫诱导活性,其中HCl-F1和H2O2-F2的免疫诱导活性明显高于泡叶藻聚糖。结合其化学组成分析的结果,提示泡叶藻聚糖低分子质量降解片段的免疫诱导活性是由单糖组成和硫酸根质量分数共同决定的。     

山银花不同萃取部位抗炎、抗氧化体外活性评价及化学成分分析

本研究采用脂多糖（LPS）诱导的细胞炎症模型和H₂O₂诱导的细胞氧化应激模型,对山银花不同萃取部位进行抗炎、抗氧化活性评价,并通过超高压液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS）分析具有显著活性的萃取部位的化学成分。结果表明,山银花甲醇提取物及其各萃取部位（50 μg/mL）均有不同程度的抗炎、抗氧化活性。其中水饱和正丁醇萃取部位的抗炎活性最强,对RAW264.7细胞内NO、TNF-α、IL-6等炎症因子的抑制率分别达66.40%、13.14%、79.66%,初步鉴定该部位中的17个有机酸类和皂苷类成分;乙酸乙酯萃取部位的抗氧化能力最强,可对RIN细胞中抗氧化酶SOD、GSH、CAT三种抗氧化因子的活性分别提高2.51、4.40、8.89倍,初步鉴定该部位中的12个有机酸类成分。因此,有机酸和皂苷类成分可能是山银花具抗炎、抗氧化活性的主要物质基础。本文为进一步阐明山银花具生物活性的物质基础及开发利用提供数据支撑。     

矢车菊素-3-O-葡萄糖苷保护RAW264.7细胞免受过氧化氢诱导的氧化损伤

本研究旨在探究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷（cyanidin-3-O-glucoside,C3G）对H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用及其机制。通过噻唑蓝法测定C3G和过氧化氢分别对RAW264.7细胞存活率的影响;采用酶联免疫吸附测定法检测细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力以及一氧化氮（nitric oxide,NO）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平;利用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯活性氧荧光探针检测细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;通过逆转录定量聚合酶链式反应和Western blot法分别测定相关mRNA和蛋白表达水平。结果表明,C3G（6.25～25.00 μmol/L）能显著抑制H2O2诱导RAW264.7细胞活性降低（P＜0.05）。C3G显著降低H2O2诱导RAW264.7细胞内ROS过表达、MDA水平和NO释放（P＜0.05）,显著增加SOD和GSH-Px活力（P＜0.05）。此外,与空白对照相比,400 μmol/L H2O2处理组中,蛋白激酶Mst1/2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白Keap1的mRNA及蛋白相对表达水平显著上调（P＜0.05）,而细胞中核因子E2相关因子和下游抗氧化酶HO-1的mRNA及蛋白相对表达水平显著下调（P＜0.05）;而采用C3G干预RAW264.7细胞,上述相关mRNA及蛋白的相对表达水平被逆转。结论：C3G对H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤保护作用,可能与激活Mst/Nrf2信号通路和提高抗氧化酶活性有关。     

五味子蜂花粉不同萃取物对小鼠肝脏脂质过氧化及DNA氧化损伤的作用

五味子蜂花粉具有强抗氧化活性,为了探究其抗氧化活性成分分布,本研究采用体积分数75%乙醇溶液对五味子蜂花粉进行浸提,分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,测定不同萃取物的活性成分和体外抗氧化活性,研究其对小鼠肝脏脂质过氧化的抑制作用和对·OH诱导的pBR322质粒DNA氧化损伤的保护作用。结果表明,五味子蜂花粉不同萃取物抗氧化活性及其对小鼠肝脏脂质过氧化的抑制作用和对DNA氧化损伤的保护作用均存在显著差异（P＜0.05）,其顺序为：正丁醇萃取物＞乙酸乙酯萃取物＞石油醚萃取物。正丁醇萃取物的总酚含量最高,为26.11 g/100 g,总黄酮含量为27.90 g/100 g;有很强的Fe2＋络合能力、还原力和对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除能力;0.2 mg/mL正丁醇萃取物对小鼠肝脏脂质过氧化的抑制率可达85%以上。本研究为进一步分离纯化五味子蜂花粉高抗氧化活性酚类物质提供依据,同时为抗氧化功能食品的开发提供参考。     

In Vitro Antioxidant and Antiglycation Properties of Methanol Extract and Its Different Solvent Fractions of Musa paradisiaca L. (Cv. Nendran) Inflorescence

Methanolic extract of Musa paradisiaca inflorescence and its different solvent fractions, petroleum ether, ethyl acetate, butanol, and water were studied for their total phenolic and flavonoid content, free radical scavenging, and antiglycation activities, and these properties were compared with standard antioxidant compounds. Ethyl acetate fraction exhibited higher antioxidant and antiglycation properties than other fractions. IC₅₀ values of ethyl acetate fraction for 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl method, 2,2-azinobis-3 ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid method, superoxide radical scavenging, hydroxyl radical scavenging, nitric oxide radical scavenging, and antiglycation activities were 9.80, 13.50, 26.40, 19.71, 25.73, and 31.00 μ g/ml, respectively. Total phenolic content of ethyl acetate (21.52 mg GAE/g) was significantly higher than other fractions. There was positive linear correlation between antioxidant activity and total phenolic content.      

Antioxidant activity of the ethanolic extract from the bark of Chamaecyparis obtusa var. formosana

BACKGROUND: Chamaecyparis obtusa var. formosana (Taiwan hinoki) is an endemic conifer in Taiwan and the purpose of this study is to evaluate the antioxidant activity of various fractions obtained from the bark of this plant material. The ethanolic extract of the bark was sequentially separated into three fractions, including n‐hexane, ethyl acetate and ethanol soluble fractions, by liquid–liquid partition. Then the antioxidant activities of crude extract and three fractions along with 13 subfractions obtained from the ethyl acetate (EA) soluble fraction were tested for several antioxidant assays. RESULTS: The total phenolic content of the samples varied from 27.71 to 102.86 mg GAE g^?1 dry weight for fractions, and from 49.94 to 206.46 mg GAE g^?1 for subfractions (where GAE is milligrams of gallic acid per gram of extract). The Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) ranged from 0.15 to 0.26 mmol L^?1 Trolox equivalents. The EA soluble fraction was found to be the best antioxidant‐rich fraction in terms of DPPH and reducing power assays. With further data analysis it was found that there was a positive correlation between the total phenolic content of extracts and TEAC is R² = 0.61. CONCLUSION: Results from various antioxidant assays showed that the EA fraction possessed strong antioxidant activity. This would provide additional information about the antioxidant activity of bark extract of this plant species. Copyright © 2008 Society of Chemical Industry     

Chemical composition and antioxidant activity of Korean cactus (Opuntia humifusa) fruit

The chemical composition and antioxidant activities of the Korean cactus (Opuntia humifusa, OH) fruit were investigated in this study. Major minerals in the OH fruit were P, Ca, and Mg. Total dietary fiber content was 22.8% and the soluble dietary fiber/insoluble dietary fiber ratio was 1:1.3. An 80% ethanol extract was used to investigate antioxidant activities based on DPPH radical scavenging ability as well as total phenolic and flavonoid content. OH fruit extract from 80% ethanol was sequentially fractionated according to the polarity of solvents. Among various fractions, the ethyl acetate fraction showed the highest antioxidant activity as well as the highest total phenolic and total flavonoid contents compared to other fractions. The most abundant phenolic acid in the ethyl acetate fraction was ferulic acid, followed by protocatechuic acid. The most abundant flavonoid was taxifolin, followed by myricetin. The results suggested that OH fruit could be a good potential source of antioxidant.