超声波协同复合嫩化剂对生鲜猪肉嫩度的影响

采用超声波协同氯化钙及复合磷酸盐(三聚磷酸钠、六偏磷酸钠)对生鲜猪肉进行嫩化后,以植物蛋白酶(木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶)对其进行酶法嫩化,在单因素试验基础上通过正交试验,以剪切力为考察指标,探讨生鲜猪肉最优嫩化工艺条件。结果表明:超声功率、超声时间、复合磷酸盐添加量、植物蛋白酶添加量、酶作用温度影响显著,氯化钙添加量及水浴时间影响不显著,各因素对剪切力影响的主次关系为超声时间植物蛋白酶添加量超声功率酶作用温度复合磷酸盐添加量氯化钙添加量水浴时间。功率150 W条件下超声处理25min、1.0%氯化钙、0.20%复合磷酸盐、0.03%植物蛋白酶、酶作用温度20℃、水浴30 min,生鲜猪肉剪切力最小,肉最嫩。     

木瓜蛋白酶嫩化鸭肉效果的研究

以剪切力为评价指标,采用单因素实验和响应面优化实验对木瓜蛋白酶嫩化鸭肉的工艺进行了优化。实验结果表明,鸭肉的最佳嫩化工艺条件为:嫩化温度31.33℃、p H为6.72、木瓜蛋白酶用量686.92U/g、嫩化时间为40min。采用逐步回归拟合,得到剪切力(N)对嫩化温度℃(A),p H(B),酶用量(C)的模型如下:N=540.5717-0.8832A+1.145448B-70.2707C-0.2869BC+0.00637A2+0.012027B2+5.999425C2,此时预测最大剪切力为20.39N。经修正后嫩化温度30℃、p H为6.7、木瓜蛋白酶用量690U/g、嫩化时间为40min,此条件下剪切力的预测值为21.32N,实测值为22.14N。SDS-PAGE电泳图谱显示嫩化组鸭肉大分子蛋白被水解成小分子,透射电镜发现经过嫩化的鸭肉肌原纤维Z线断裂,肌节变短,出现了肌原纤维小片化现象和结缔组织的降解。本研究表明木瓜蛋白酶对鸭肉有极好的嫩化作用,为鸭肉质地的改善提供了良好的方案。     

淘汰蛋鸡肌肉复合嫩化技术的研究

以淘汰蛋鸡鸡腿肉和鸡胸肉为原料,通过以木瓜蛋白酶用量、真空滚揉时间、嫩化时间、嫩化温度为实验因素,以剪切力降低率、保水性为响应指标的响应面法来研究淘汰蛋鸡肌肉的复合嫩化技术,获得的最佳工艺参数为:鸡胸肉的酶用量3.0U/g、真空滚揉时间28min、嫩化温度20℃、嫩化时间40min,经处理后的鸡胸肉剪切力值降低率为50.9%,保水性值92.7%;鸡腿肉的酶用量2.76U/g、真空滚揉时间30min、嫩化温度23℃、嫩化嫩化时间38min,经处理后的鸡腿肉剪切力值降低率为52.2%,保水性87.2%。结果表明,机械滚揉结合酶解作用形成的复合嫩化法能够有效改善淘汰蛋鸡肌肉的嫩度和保水性。      

氯化钙-无花果蛋白酶-猕猴桃蛋白酶复合嫩化剂体系改善兔肉嫩度和保水性的工艺优化

为提高兔肉的嫩度和保水性,试验以伊拉兔后腿肉为研究对象,以剪切力和蒸煮损失为因变量,首先研究CaCl_2、无花果蛋白酶和猕猴桃蛋白酶以单一和复合的形式对兔后腿肉的嫩化效果,研究表明三者复合的效果更显著;再以响应面法优化三者复配比例;以正交试验优化嫩化条件;最后以剪切力,蒸煮损失,肌纤维小片化指数,质构分析作为验证试验的指标。结果显示,当CaCl_2、无花果蛋白酶、猕猴桃蛋白酶以质量浓度18、11、6 mg/L复配;在pH=8,温度30℃,时间90 min条件下有最显著嫩化效果。处理组剪切力值为15. 49 N,蒸煮损失为25. 73%,与对照组相比,剪切力、蒸煮损失、硬度分别降低了50%、17%、65%,肌纤维小片化指数及弹性分别增加54%和40%。结果表明,该复合嫩化剂可以显著改善兔肉嫩度及保水性,对兔肉加工具有一定参考价值。     

菠萝蛋白酶结合滚揉嫩化马肉工艺的优化

以系水力、蒸煮损失率、剪切力和感官评定为评价指标,通过注射菠萝蛋白酶液,结合滚揉处理,研究菠萝蛋白酶在不同的添加量、处理温度、处理时间和p H条件下对马肉(半腱肌)嫩度的影响,采用L9(34)正交试验对嫩化条件进行优化。试验结果表明:蛋白酶添加量、处理温度和处理时间对马肉的嫩度有显著影响。菠萝蛋白酶的最佳嫩化条件是:菠萝蛋白酶添加量12 U/g,处理温度60℃,处理时间1.5 h,p H7.0;或者菠萝蛋白酶添加量16 U/g,处理温度60℃,处理时间2 h,p H7.0。     

超声波-微波设备联合嫩化淘汰蛋鸡鸡胸肉

一种新型的超声-微波设备应用在淘汰蛋鸡的嫩化。对超声波、微波及超声-微波联合作用3种不同嫩化淘汰蛋鸡的方法进行探讨,结果表明,超声波-微波联合作用较任何单一方法的嫩化效果均好。在超声-微波的基础上,结合复合嫩化剂处理淘汰蛋鸡。采用L₉（3⁴）正交试验对处理条件进行优化,以探讨超声-微波与嫩化剂对蛋鸡嫩化效果的影响。结果表明:各因素对蛋鸡剪切力的影响主次顺序为超声-微波时间>木瓜蛋白酶>氯化钙>复合磷酸盐;最佳组合为功率400W、超声-微波10min,超声/间隙时间4s/4s、1.5%CaCl₂、1.0%复合磷酸盐、450U/g木瓜蛋白酶,可达到较好的嫩化效果。此时蛋鸡肉的剪切力为2.09kg/cm²。方差分析表明,超声-微波及木瓜蛋白酶对淘汰蛋鸡嫩化效果显著,而复合磷酸盐嫩化效果不显著。嫩化后的蛋鸡口感大大提高,经感官评定与肉鸡口感接近。     

弹性蛋白酶嫩化卤牛肉的工艺研究

采用弹性蛋白酶和复合磷酸盐为嫩化剂,选用工程法速溶调味料和真空滚揉技术,开发了嫩化性卤牛肉生产新工艺。通过正交试验设计和对卤牛肉持水性测定及感官评定,确定卤牛肉嫩化的较优工艺参数为:弹性蛋白酶用量为0.001%,溶液注射量为15%,滚揉时间为20-30min,滚揉间歇时间10min,腌制时间为6h,煮制时间15min。     

复合蛋白酶对腌制猪肉嫩化效果的影响

试验先采用单因素试验添加不同水平量的复合蛋白酶、CaCl2、抗坏血酸钠在猪肉样品中,通过测定处理后猪肉的剪切力、pH值和色泽、黏度、弹性、气味等感官指标,筛选出各种嫩化剂的较好添加量;在此基础上用L9(34)正交试验确定复合蛋白酶、CaCl2、抗坏血酸钠的最佳配比;同时还考察了最佳配比下不同处理温度和处理时间对猪肉各测试指标的影响.试验结果表明,对腌制猪肉最佳的嫩化条件为复合蛋白酶1.5%、CaCl2 2.0%、抗坏血酸钠0.2%,在处理温度为60℃,处理时间为30min时,肉的嫩化效果最好.     

嫩化型五香风味牛肉干的研制

目的研制嫩化型五香风味牛肉干。方法以剪切力值为评价指标,利用单因素与正交试验确定木瓜蛋白酶、复合磷酸盐和氯化钙的最佳复合配比;以感官评分为评价指标,采用单因素试验与正交试验确定嫩化温度、嫩化时间、复煮时间与烘干时间的最佳工艺参数。结果复合嫩化剂最佳配比为:木瓜蛋白酶0.03%、复合磷酸盐0.3%、氯化钙1%,嫩化后的剪切力值降低,符合肉的可接受范围。最佳工艺参数为:嫩化温度55℃、嫩化时间3 h、复煮时间60 min、烘干时间3.5 h,此条件下感官评分最高。结论根据上述最佳复合配比嫩化剂和最佳工艺参数制得的嫩化型五香风味牛肉,干色泽棕黄,甜咸适中,风味独特。     

软枣猕猴桃粗蛋白酶嫩化牛肉工艺优化及其嫩化机制

研究了软枣猕猴桃粗蛋白酶提取及对牛肉的嫩化效果,对酶用量、处理温度、处理时间对牛肉嫩化的影响进行了实验,并进一步通过L9(33)正交试验选择出最佳嫩化工艺并且通过测定其显微结构阐明其嫩化机制.结果表明:软枣猕猴桃粗蛋白酶的比活力为2098U/mg,对牛肉的剪切力、烹饪失水率和持水力均有影响,有较好的嫩化效果,通过正交试验确定软枣猕猴桃粗蛋白酶对牛肉嫩化的最佳工艺条件为酶用量0.05％、处理温度50℃、处理时间1.0h,影响因素次序为:处理温度＞酶用量＞处理时间,蛋白酶处理后的肉样和未处理的肉样相比肌原纤维直径变小,密度变大,小片化指数变大,其Z线断裂,肌间隙变大,肌间质增多,肌节长度变大,嫩度增加.     

Tenderization effect of cold-adapted collagenolytic protease MCP-01 on beef meat at low temperature and its mechanism

The enzymes currently used to increase meat tenderness are all mesophilic or thermophilic proteases. This study provides insight into the tenderization effect and the mechanism of a cold-adapted collagenolytic enzyme MCP-01 on beef meat at low temperatures. MCP-01 (10 U of caseinolytic activity) reduced the meat shear force by 23% and increased the relative myofibrillar fragmentation index of the meat by 91.7% at 4 °C, and it also kept the fresh colour and moisture of the meat. Compared to the commercially used tenderizers papain and bromelain, MCP-01 showed a unique tenderization mechanism. MCP-01 had a strong selectivity for degrading collagen at 4 °C, showed a distinct digestion pattern on the myofibrillar proteins, and had a different disruption pattern on the muscle fibres under scanning electron micrograph. These results suggest that the cold-adapted collagenolytic protease MCP-01 may be promising for use as a meat tenderizer at low and moderate temperatures.     

The applicability of using a protease extracted from cashew fruits (Anacardium occidentale), as possible meat tenderizer: An experimental design approach

Meat tenderness is one of the most important organoleptic properties in determining consumer acceptance in meat product marketability. Therefore, an effective meat tenderization method is sought after by exploring plant-derived proteolytic enzymes as meat tenderizer. In this study, a novel protease from Cashew was identified as a new alternative halal meat tenderizer. The extraction of cashew protease was optimized using response surface methodology (R² = 0.9803) by varying pH, CaCl₂ concentration, mixing time, and mass. pH 6.34, 7.92 mM CaCl₂ concentration, 5.51 min mixing time, and 19.24 g sample mass were the optimal extraction conditions. There was no significant difference (n = 3; p < 0.05) between the calculated (6.302 units/ml) and experimental (6.493 ± 0.229 units/ml) protease activity. The ascending order of the effects was pH < mixing time < CaCl₂ < sample mass. In meat tenderizing application, the meat samples treated with 9% (v/w) crude protease extract obtained the lowest shear force (1.38 ± 0.25 N) to cause deformation on the meat. An electrophoretic analysis showed that protein bands above ~49.8 kDa were completely degraded into protein bands below ~22.4 kDa. Scanning electron microscopy shows the disruption of the muscle fibers after being treated by the Cashew protease. The results of this study show the Cashew (Anacardium occidentale) crude extract can be used as an alternative of the animal and microbial protease as meat tenderizer and subsequently overcome the shortcoming of the halal industrial protease.     

Functional characterization of purified pear protease and its proteolytic activities with casein and myofibrillar proteins

This study was performed to characterize pear protease proteolytic activity and investigate the use of pear protease as a meat tenderizer. Pear protease was purified and stabilized by 5% dextrin during lyophilization (dry) or concentration (liquid). Pear protease was further characterized with respect to pH, thermodynamics, and enzyme kinetics. Pear protease was stable at a pH range of 5-8 with an optimum pH of 6.5. From Arrhenius plots, liquid protease showed higher temperature dependency (23.49 kJ/mol) than dry protease (18.62 kJ/mol) due to its higher activation energy. The kcat/Km, catalytic efficiency of enzyme, was similar with 2.9 and 2.7 µM/min with dry and liquid proteases. Pear protease was evaluated for its proteolytic activities with casein and beef myofibrillar proteins by individually and combination with fig and kiwifruit proteases. These result indicated that pear and kiwifruit proteases could be complementary to be a desirable product for meat tenderization.     

氯化钙-无花果蛋白酶-猕猴桃蛋白酶体系对兔肉肌原纤维蛋白结构的协同作用

探究氯化钙-无花果蛋白酶-猕猴桃蛋白酶复合体系对肌原纤维蛋白(myofibrillar protein,MP)的协同降解作用,对比经复配组、氯化钙组、猕猴桃蛋白酶组和无花果蛋白酶组处理后的兔肉肌原纤维小片化指数、MP溶解度、可溶性蛋白含量(soluble protein content,SPC)、MP表面疏水性及十二烷...     

复合嫩化剂对猪肉嫩化效果的研究

首先通过单因素实验确定不同浓度的木瓜蛋白酶、氯化钠和氯化钙对猪肉嫩度的影响。再采用Box-Behnken设计和响应曲面中心组合设计法,建立复合嫩化剂对猪肉嫩度影响的响应模型,对木瓜蛋白酶浓度、氯化钠浓度和氯化钙浓度三因素及其两两交互作用进行分析与评价。实验结果表明:响应模型的拟合度高,试验误差小,通过实验数据分析发现木瓜蛋白酶、氯化钠和氯化钙都可增加猪肉脯的嫩度,其中氯化钙与木瓜蛋白酶对猪肉剪切力影响显著,而氯化钠的加入能显著降低猪肉的烹饪失水率,通过对剪切力拟合方程和烹饪失水率拟合方程的联合求解,优化出复合肉嫩化剂的配方组成为:氯化钠浓度6%、氯化钙浓度3.5%,木瓜蛋白酶120U/ml。在上述优化条件下,实际验证猪肉剪切力为2.10kg,烹饪失水率为34.5%。     

响应面法优化真菌蛋白酶嫩化马肉的工艺

为了改善马肉（半腱肌）的嫩度,以蒸煮损失率、剪切力和感官评分为评价指标,结合滚揉处理,研究了真菌蛋白酶在不同的添加量、处理温度、处理时间和pH值对马肉嫩度的影响,并利用响应面优化出了真菌蛋白酶的最佳嫩化条件。结果表明：真菌蛋白酶的添加量对马肉的嫩度影响极显著,处理温度和处理时间影响显著;最佳的嫩化条件是：真菌蛋白酶添加量20.63 U/g,处理温度53.12 ℃,处理时间98.88 min,pH值为6.86。     

嫩化型猪肉脯的加工技术优化

以剪切力或感官评价为考察指标,研制嫩化型猪肉脯。通过单因素试验和正交试验,探讨嫩化剂和加工工艺对肉脯嫩度的影响。结果表明：最佳的肉脯嫩化剂配方(m/m)为木瓜蛋白酶添加量0.035%、乳酸钠添加量2%、复合多聚磷酸盐添加量0.4%、氯化钙添加量0.1%;最佳的肉脯嫩化工艺条件为拌料20min、静置15min、热风炉45～85℃程序升温干燥5h。在最适条件下生产的嫩化型肉脯出品率55%、水分含量13.7%、蛋白质含量40.8%、嫩度与空白相比提高了136%。     

响应面法优化生鲜调理猪肉嫩化技术

研究调理猪肉的嫩化技术,对胰蛋白酶浓度、嫩化温度和嫩化时间对调理猪肉剪切力的影响进行测试,并采用响应面法优化胰蛋白酶嫩化调理猪肉的最佳条件,利用Design Expert软件对胰蛋白酶嫩化调理猪肉的二次回归模型进行分析。结果表明,在一定温度下胰蛋白酶可有效降低调理猪肉的剪切力,提高肉的嫩度。Box-Behnken试验结果显示,胰蛋白酶嫩化调理猪肉的最佳条件为:胰蛋白酶质量浓度0.04g/100mL,嫩化温度31℃,嫩化时间2.8h,在此条件下调理猪肉的实测剪切力为9.73N。方差分析表明:所建的回归模型极显著,模型能很好地预测调理猪肉嫩度的变化。其中,胰蛋白酶质量浓度,胰蛋白酶质量浓度和嫩化温度以及嫩化温度和嫩化时间的交互作用均显著影响调理猪肉的剪切力。     

重组弹性蛋白酶在猪肉嫩化中的应用

以木瓜蛋白酶作为对照,研究本实验室构建的重组毕赤酵母表达产物即弹性蛋白酶在肉类嫩化方面的应用,测定酶的活力,并对酶的最佳作用条件进行研究,进一步对其在肉类嫩化应用中加酶量、加入方式,肉的处理温度和时间进行优化。实验利用质构仪和嫩度计测定肉的剪切力的变化,按照剪切力与嫩化程度成反相关的规律并结合显微镜观察结果综合判断肉的嫩化程度。结果显示：利用注射法把酶液均匀注射入经过75～80℃水浴加热20～30min 处理的肉样中,加入酶量约20～37mg/mL,处理时间为2.5～6h 时,该重组弹性蛋白酶对肉的嫩化效果较好。     

肌肉嫩化方法及其机理分析

嫩度是肌肉重要的食用肉品质特征之一,影响肌肉嫩度的因素多种多样,包括肌原纤维、胶原蛋白、内源酶在内的内部因素,和温度、pH值等外部因素。阐述了物理(电刺激、高压处理、超声波)、生物化学(盐类、有机酸和生物酶)处理技术以及多种嫩化方法结合技术改善肌肉嫩度的方法,分析了不同的嫩化机理,并就肌肉嫩化机理分析研究进行了展望。