基于UPLC-QTOF-MS/MS技术分析荷叶乙酸乙酯相中主要化学成分

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串质谱技术分析荷叶乙酸乙酯相中的主要化学成分,根据色谱峰的精确分子质量、母离子、碎片离子、质谱裂解规律等信息,结合荷叶中已经鉴定的化合物以及相关参考文献对化合物的结构进行鉴定。从荷叶乙酸乙酯相中共鉴定出40 种化合物,包括27 种黄酮类化合物、6 种酚酸、4 种有机酸、2 种脂肪酸和1 种氨基酸。黄酮类化合物是荷叶乙酸乙酯相中的主要化学成分,主要为槲皮素糖苷、山柰酚糖苷、异鼠李素糖苷和黄酮-3-O-醇类,其次为酚酸。本研究可为荷叶资源在食品加工和功能性食品开发领域的应用提供理论基础。     

不同品种蓝莓花色苷及其抗氧化活性分析

为筛选功能性蓝莓品种,分别测定蓝丰、莱格西、珠宝、绿宝石蓝莓品种果实品质与抗氧化活性,并采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS/MS）测定成熟期蓝莓果皮花色苷组分及含量。结果表明,绿宝石的总酚和花色苷含量分别为13.11 mg/g、2.26 mg/g,比蓝丰提高29.10%及2.66倍;珠宝的花色苷含量、莱格西的类黄酮含量比蓝丰提高86.47%及2.41倍。花色苷单体均为单糖二聚体,二甲花翠素类花色苷占比为41%～68%,莱格西、绿宝石和珠宝以二甲花翠素-3-O-半乳糖苷为主,蓝丰以二甲花翠素-3-O-阿拉伯糖苷为主;绿宝石和珠宝的花色苷单体占比多分布于10%左右。珠宝、绿宝石的铁离子还原能力（FRAP值）分别比蓝丰显著提高62.29%和55.95%,珠宝的DPPH自由基清除率最高,达72.02%,比蓝丰显著提高58.25%。因此,珠宝、绿宝石可作为功能性蓝莓品种。     

枣花蜜酚类化合物组成及其抗氧化活性分析

以陕西佳县、府谷、大荔、渭南4 个地区枣花蜜为研究对象,测定其理化指标、酚类化合物含量、体外抗氧化活性、对·OH诱导的pBR322质粒DNA氧化损伤的保护作用及过氧化氢（H2O2）诱导的小鼠淋巴细胞DNA氧化损伤的保护作用。结果表明,枣花蜜总酚含量为196.55～454.95 mg/kg,总黄酮含量为22.03～39.40 mg/kg;高效液相色谱-电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱分析发现枣花蜜中含有15 种酚类化合物,包括4 种酚酸和11 种黄酮类化合物;体外抗氧化实验表明,枣花蜜具有较强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力（半抑制浓度为38.03～122.81 mg/mL）、Fe2＋络合能力（110.93～158.46 mg/kg）和Fe3＋还原力（166.68～365.06 mg/kg）;此外,枣花蜜对·OH诱导的pBR322质粒DNA氧化损伤有保护作用且能显著降低H2O2诱导的小鼠淋巴细胞DNA氧化损伤。本实验的研究结果可为枣花蜜资源的开发利用提供理论参考。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS的爬沙虫不同部位化学成分分析

采用超高效液相色谱与飞行时间质谱联用（UHPLC-Q-TOF-MS/MS）技术对爬沙虫不同部位头、胸、腹的化学成分进行分析,并进行差异物质含量检测,从而探讨爬沙虫化学成分分布规律。超高效液相色谱条件：Waters acquity BEH amide色谱柱（100 mm×2.1 mm, 1.7 μm）,流动相以25 mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.2 mL/min,柱温30 ℃。质谱条件：Triple TOF 6600型四极杆串联飞行时间高分辨质谱仪,电喷雾离子源（ESI）,在正负离子模式下采集数据。通过正、负离子质谱信息及元素组成分析,总共鉴定了25个成分,其中爬沙虫头、胸、腹中分别推定出19、21、19个化合物（包括9种氨基酸,6种有机酸,5种核苷和5个其他类成分）,且有19个成分为爬沙虫中首次报道。采用高效液相色谱法（HPLC）对爬沙虫不同部位的差异物质进行含量测定,表明差异物质含量在头、胸、腹中有显著差异（p<0.05）。该研究建立了一种高灵敏度、高分离度的爬沙虫化学成分快速分析方法,并鉴定出不同部位差异化合物,为爬沙虫的物质基础研究及使用部位的选择提供依据。     

基于UPLC/Q-TOF MS/MS的花生油成分分析

采用超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS/MS)联用仪对花生油甲醇提取液分离检测,分析花生油成分,并通过二级质谱图和标准品确定物质。结果表明:正离子模式下检出86种化合物,鉴定30种物质,其中芥酸、棕榈酰胺、硬酯酰胺、油酸酰胺、11Z-二十二碳二烯酸为已知的花生油成分,亚油酰乙醇胺、亚油酰胺、鞘氨醇、N-油酰乙醇胺、十八碳四烯酸、顺-4-癸二酸等26种物质均为首次被检出;在负离子模式下,共检出27种化合物,鉴定15种物质,其中包括花生油中常见的7种脂肪酸,首次检出(Z)-13-氧-9-十八烯酸、蓖麻油酸、烯油酸、13-羟基十八酸和2(R)-羟基海藻酸5种脂肪酸和其他3种物质。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析苦荞醋饮的化学成分及作用机制

为明确苦荞醋饮中的主要化学成分,并进一步探讨其作用机制,该研究采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术分析苦荞醋饮中的化学成分,运用HIT 2.0、Drugbank 5.0、DAVID等数据库对苦荞醋饮发挥治疗“三高”的靶点及通路进行分析,并通过Cytoscape软件构建网络。结果表明,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术共鉴定出109个化学成分,其发挥降压、降脂、降糖作用的“成分-靶点-疾病”网络包含34个活性成分、286个药物靶点。京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析获得179条通路。“关键成分-关键靶点-信号通路-疾病”网络分析结果显示,苦荞醋饮可能以木犀草素、槲皮素等为关键成分,作用于细胞肿瘤抗原p53(TP53)、RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT1）等关键靶点,主要参与调控磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)等信号通路,发挥降压、降脂、降糖作用。     

山楂核抗氧化、抑菌活性物质的筛选和UPLC-Q-TOF/MS分析活性物质的化学成分

为了研究山楂核醇提物抗氧化和抑菌活性的有效物质及活性化学成分,通过评价DPPH、ABTS和羟自由基清除率、Fe3+还原能力和抑菌圈直径研究山楂核醇提物不同极性溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水)萃取物质的抗氧化和抑菌活性,通过超高效液相色谱与飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)分析活性物质。结果表明,乙酸乙酯萃取物质在清除DPPH和ABTS自由基、Fe3+还原能力方面优于其他部位;水萃取物质在清除羟自由基能力方面表现最好,乙酸乙酯萃取物质次之;在抑菌活性方面,相同生药浓度下仅有乙酸乙酯萃取物质对金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。通过UPLC-Q-TOF/MS从最佳活性物质乙酸乙酯萃取物质鉴定出10个成分,主要为木脂素和醛类成分。由此可知乙酸乙酯萃取物质有较好的体外抗氧化活性和抑菌活性,推测其可能活性成分为木脂素类和醛类成分。     

固相微萃取-气相色谱-质谱分析青钱柳叶挥发性成分

采用固相微萃取（SPME）和气相色谱-三重串联四极杆质谱联用仪（GC-QQQ-MS）相结合的方法对两个产地（江西修水野生和浙江文成人工栽培）的青钱柳叶挥发性成分进行研究,并比较了它们在挥发性化学成分及含量上的差异。结果表明:在两个产地的青钱柳叶中共鉴定出91种挥发性成分,其中两者共有挥发性成分45种,且主要是碳氢化合物类、醇类、醛类、酯类、酮类、醚类和萘类化合物,但两个样品在挥发性成分的具体组成和含量上存在一定的差异。野生青钱柳叶的挥发性成分主要是β-瑟林烯（18.52%）、石竹烯（8.11%）、β-甜没药烯（6.01%）、β-榄香烯（5.36%）、顺-香叶基丙酮（4.02%）等,人工栽培青钱柳叶的挥发性成分主要是β-波旁烯（11.05%）、β-瑟林烯（10.91%）、石竹烯（7.03%）、苯甲醇（7.01%）、2,6-二甲基-6-（4-甲基-3-戊烯基）-双环[3.1.1]庚-2-烯（5.36%）、2,6,11-三甲基十二烷（5.16%）等。      

基于UPLC-QTOF-MS技术对庐山云雾茶成分分析及真伪判别

采用UPLC-QTOF-MS技术分析庐山云雾茶提取物,93种化合物可初步鉴定,包括2种异黄酮,28种黄酮醇,16种黄烷醇,5种黄烷酮,11种有机酸,4种氨基酸,27种酚酸。通过对掺假绿茶与正宗庐山云雾茶特征提取定量对比,构建PLS-DA模型,对测试茶样进行真伪判别。采用此方法,庐山云雾茶真伪判别率为100%。     

海蒿子多酚组分的化学成分、抗氧化和降血糖活性分析

以海蒿子为研究对象,首先从中提取游离酚(free phenolics,FP)、酯(esterified-bound phenolics,EP)和糖苷结合酚(glycoside-bound phenolics,GP)3种不同存在形式的可溶性多酚,并采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法分析各多酚组分的化学成分;其次,评价各多酚组分的体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果发现海蒿子中可溶性多酚以结合态为主,GP的总酚含量(68.30 mg/g)最高,EP的总黄酮含量(83.49 mg/g)最高。从3个多酚组分中共鉴定出22个化合物,其中包括3种酚类化合物、4种黄酮和2种酚酸。生物活性研究表明：GP的细胞抗氧化活性(细胞抗氧化值为18.18μmol/g)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(IC₅₀=84.6μg/mL)和2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基(IC₅₀=127.01μg/mL)清除能力最强。EP的氧自由基吸收能力(5 322.85μmol/g)和α-葡萄糖苷酶抑制活性(IC₅₀     

青钱柳多糖的体外抗氧化活性评价

目的评价青钱柳多糖的体外抗氧化活性。方法从青钱柳中超声提取多糖,苯酚-硫酸法测定多糖含量。以维生素C为阳性对照,研究青钱柳多糖对DPPH、O_2~-·、·OH、NO_2~-的清除作用和对脂质过氧化的抑制作用。结果结果表明青钱柳粗多糖中多糖含量为4.32%,精制多糖中多糖含量为11.79%。在试验浓度范围内,青钱柳多糖对DPPH、O_2~-·、·OH和NO_2~-有一定的清除效果,其中对DPPH清除能力最强,同时青钱柳多糖也具有抑制脂质过氧化的活性。同浓度的青钱柳粗多糖清除自由基和抗氧化活性均高于其精制多糖,但均低于阳性对照维生素C。结论青钱柳多糖具有良好的抗氧化活性,可开发成新型的保健茶或高附加值功能产品。     

青钱柳提取物体外抗氧化活性研究

研究青钱柳不同溶剂提取物的体外抗氧化活性。测定了青钱柳不同溶剂提取物对DPPH自由基的清除作用,用化学发光法测定对超氧阴离子自由基(O·2)和羟自由基(·OH)的清除能力,并用烘箱储藏法测定对油脂的抗氧化活性。实验结果表明,醇提物具有较强的清除自由基能力和抗油脂氧化活性。     

大孔树脂吸附纯化青钱柳叶三萜化合物

为得到纯度较高的青钱柳叶三萜化合物,采用大孔树脂吸附法对青钱柳叶三萜粗提物进行纯化研究。静态吸附实验结果表明,AB-8树脂对青钱柳叶三萜化合物吸附、解吸性能较好,比饱和吸附量为77.49mg/g,解吸率为85.44%,总回收率可达72.01%。AB-8树脂动态吸附-解吸实验表明：上柱流速增大,吸附率呈降低趋势;随着上柱液质量浓度增大,吸附率先升后降;95%乙醇洗脱效果较好,10BV为合理用量;随着洗脱流速增大,洗脱液峰浓度降低,洗脱率减小,综合考虑以1.5mL/min较为适宜。经AB-8树脂纯化后,三萜类物质纯度可达44.30%。     

超高压提取青钱柳多糖条件优化及抗氧化活性

试验以青钱柳叶为原料,研究青钱柳多糖的超高压提取工艺,对提取的青钱柳粗多糖进行抗氧化活性试验。采用单因素及正交试验对青钱柳多糖的超高压提取工艺进行优化,结果显示,青钱柳多糖最佳提取条件为:料液比1︰25(g/mL)、提取温度30℃、提取压力500 MPa。在此条件下,青钱柳多糖得率最高,为3.70%。将青钱柳粗多糖进行清除DPPH自由基、清除羟基自由基试验,以抗坏血酸(VC)为对照,测定青钱柳叶粗多糖的体外抗氧化能力。结果表明,青钱柳叶粗多糖清除DPPH自由基效果较好且较对照组浓度低,最高清除率为93.0%,而清除羟基自由基效果低于对照。     

青钱柳多糖的乙酰化修饰及抗氧化活性

以青钱柳多糖为原料,使用乙酸酐法制备得到乙酰化青钱柳多糖样品。以乙酰化多糖取代度为评价指标,采用正交试验考察乙酸酐-多糖比例、反应时间、反应温度对乙酰化修饰的影响。在此基础上,选择取代度为0.681的乙酰化多糖样品进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除实验。结果表明,青钱柳多糖乙酰化最优反应条件为：m（多糖）∶V（乙酸酐）＝1∶60、反应时间2 h、反应温度40 ℃,同时,乙酰化修饰可以显著提高青钱柳多糖的DPPH自由基清除活性,乙酰化修饰可作为青钱柳多糖改性的方法之一,为青钱柳资源的进一步开发利用提供新的方向。     

青钱柳多糖抑菌活性及及作用机理

为研究青钱柳多糖的抑菌活性和作用机制，用不同质量浓度的青钱柳多糖处理细菌，通过最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）、抑菌生长曲线分析青钱柳多糖对细菌的抑菌效果，并从抑制效果最佳的受试菌菌体电导率、细胞蛋白和核酸含量、还原糖的释放、呼吸链脱氢酶活性、脂质过氧化程度、细胞内ATP含量、细胞外碱性磷酸酶活力的角度来揭示其抑菌机理。结果表明，青钱柳多糖对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coil）、单增李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）和鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）有明显的抑制作用，MIC分别为2、4、6、6 mg/mL，对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的抑菌性不明显；对指示菌的电导率、蛋白质和核酸渗漏、还原糖释放、呼吸链脱氢酶活性、细菌脂质过氧化程度、菌体胞内ATP和胞外碱性磷酸酶（AKP）含量均有影响。以上现象表明，青钱柳多糖的抑菌性主要是破坏菌体细胞壁和细胞膜完整性，改变其通透性，使得胞内大小分子物质外泄，抑制了细胞的呼吸代谢和引起氧化损失，进而影响细胞的生长代谢或造成细胞死亡，达到抑菌效果。     

青钱柳胶囊的装量稳定性及其降糖功效评价

对影响青钱柳硬胶囊装量稳定性的相关指标进行了考察,并通过动物实验评价了该青钱柳硬胶囊的药效学作用。装量稳定性主要检测了青钱柳硬胶囊颗粒的含水量、堆密度和休止角等指标。药效学作用则通过链佐霉素(STZ)诱导建立了糖尿病小鼠模型,将其随机分成模型组、消渴丸阳性对照组、青钱柳胶囊高、中、低剂量组,同时以正常小鼠做对照组,连续给药3周后,测定各组小鼠的多项生理生化指标,并取胰腺进行病理组织检查。结果显示,该青钱柳硬胶囊颗粒的含水量、堆密度和休止角,均在较理想的范围内。青钱柳胶囊高剂量组不仅可以极显著的降低(与模型组相比p<0.01)糖尿病小鼠的血糖值和总胆固醇量,改善肝糖原含量和受试小鼠的体质量,而且可以增加胰岛数目,增大胰岛面积,减轻胰岛细胞变性程度。上述结果表明该青钱柳胶囊的装量稳定性较好,且对STZ所诱导的糖尿病小鼠的典型病症具有改善和治疗作用。      

青钱柳叶总三萜刺激3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗

青钱柳为我国特有植物,以其叶制成的茶叶具有较好的降血糖效果。为了进一步研究其降糖作用,以超声辅助法提取青钱柳叶总三萜,经萃取、大孔树脂吸附、脱色等纯化后纯度达86.3%,其中熊果酸、齐墩果酸、山楂酸、科罗索酸和白桦脂酸的含量分别为19.35%、17.38%、7.53%、4.59%和1.42%。对于3T3-L1前脂肪细胞,纯化后的青钱柳叶总三萜(CPTT)在基础状态下对葡萄糖消耗没有明显的影响,但在同时添加10 nM胰岛素进行刺激时能显著提高葡萄糖消耗;对于成熟的脂肪细胞,无论是在基础状态下还是胰岛素刺激状态下,CPTT均能显著促进其葡萄糖消耗;对于由地塞米松诱导的胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞,CPTT能有效地改善其胰岛素敏感性,提高葡萄糖消耗,且呈剂量-效应关系,以25μg/mL的效果最佳。以上研究结果表明,CPTT能促进脂肪细胞的葡萄糖消耗,在食品和药品领域有很好的应用前景。