葡萄籽原花青素对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞TM4细胞凋亡的影响

目的:研究葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对顺铂(cisdichlorodiamineplatinum (Ⅱ),cDDP)诱导小鼠睾丸支持细胞(TM4)细胞凋亡、细胞凋亡形态及凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法:体外培养正常TM4细胞,将实验细胞分为空白对照组、cDDP组(0.014 mg/mL)、GSPE(0.005 mg/mL)+cDDP组(0.014 mg/mL)、GSPE组(0.005 mg/mL)。流式细胞检测法测定GSPE对cDDP诱导TM4细胞凋亡率的影响,Hoechst染液染色法测定TM4细胞凋亡的形态学变化,Western blot蛋白免疫印迹法测定凋亡相关基因蛋白表达情况。结果:cDDP可显著增加TM4细胞凋亡,显著降低TM4细胞Bcl-2表达量以及处于酶原状态Pro-caspase3表达量,而明显增加TM4细胞Bax表达量,同时增加处于激活状态的Caspase-3表达量。GSPE可明显降低cDDP诱导的TM4细胞凋亡,降低Bax以及Caspase-3表达量,增加Bcl-2和Pro-caspase3表达...     

枸杞多糖对顺铂诱导人胚肾细胞凋亡的影响

目的：研究枸杞多糖(LBP)对顺铂(CDDP)所致人胚肾细胞(HEK293)凋亡的影响,并探讨其可能机理。方法：体外培养HEK293,四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法观察LBP对CDDP诱导HEK293细胞生长的影响,流式细胞仪检测LBP对CDDP诱导HEK293细胞凋亡率的变化：Western blotting检测LBP对CDDP诱导HEK293细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果：LBP能够拮抗CDDP诱发的细胞毒性,并且随着质量浓度的不同而产生变化。 流式细胞仪检测表明随着LBP质量浓度的增加,细胞凋亡率随之减少;Western blotting表明,加入LBP后能够使Bax基因的表达减少而Bcl-2基因的表达增加。结论：LBP对CDDP诱导人胚肾细胞凋亡有抑制的作用,其作用机理可能与其下调Bax及上调Bcl-2蛋白表达有关。     

枸杞多糖提取物对顺铂诱发大鼠肾毒性的影响

目的：观察枸杞多糖(LBP)对顺铂所致肾毒性的防护作用,并初步探讨其作用机制。方法：将50只大鼠随机分为空白对照组、顺铂(CDDP)模型组、LBP低、中、高剂量组(277、554、1008g/(kg·d))(以体质量计)。空白对照组和CDDP组每天灌胃蒸馏水,LBP组每天灌胃LBP,每日1次,灌胃10d后,空白对照组腹腔注射生理盐水,其余各组一次性腹腔注射CDDP 7.0mg/kg建立肾损伤动物模型,之后继续灌胃5d。腹腔注射后第5天宰杀大鼠,检测大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量、肾组织中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量和一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果：给予LBP可显著降低CDDP引起的BUN、Scr、MDA水平升高(P＜0.05或P＜0.01);并能降低CDDP导致的NO含量和NOS活性的升高(P＜0.05或P＜0.01)。结论：LBP经口给予能减轻CDDP所致的肾损伤,其机制可能与其降低NOS活性和MDA、NO含量有关。     

枸杞多糖对H2O2诱导的小鼠生殖细胞损伤的影响

目的：探讨枸杞多糖(LBP)对化学物质导致的生殖细胞损伤的影响。方法：用彗星电泳技术检测睾丸细胞拖尾细胞百分率及尾长。实验分四组：正常对照组：阳性对照组，睾丸细胞中仅加入H2O2染毒；LBP对照组，细胞中加入不同浓度的LBP：LBP H2O2组，细胞先用不同浓度LBP作用1h，再加入H2O2共同培养25min。结果：LBP各剂量均能使过氧化氧染毒细胞的拖尾细胞百分率和尾长显著降低，二者呈剂量—反应关系。结论：LBP能抑制H2O2诱导的睾丸细胞损伤，对生殖细胞具有明显的保护作用。     

枸杞果多糖对哮喘小鼠炎症损伤影响及作用机制

目的 探究枸杞果多糖对Ⅴ级卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型炎症损伤影响及其作用机制.方法 以OVA诱导的哮喘小鼠为模型,并进行枸杞果多糖干预.肺组织苏木素-伊红(HE)染色、流式细胞术检测肺组织嗜酸性粒细胞水平反映炎症细胞浸润程度;肺组织马松(masson)染色检测肺组织纤维化程度,过碘酸-雪夫(PAS)染色检测支...     

N-乙酰-半胱氨酸干预壬基酚对小鼠Sertoli TM4细胞的损伤作用

目的：研究N-乙酰-半胱氨酸（N-acetyl-cysteine,NAC）对壬基酚（nonylphenol,NP）诱导的小鼠Sertoli TM4细胞氧化损伤及凋亡的干预作用。方法：以Sertoli TM4细胞为对象,实验分为对照组、NP组（20 μmol/L NP处理）、NP＋NAC组（5 mmol/L NAC预处理4 h后20 μmol/L NP处理24 h）、NAC组（5 mmol/L NAC处理4 h后换正常培养基培养）,采用噻唑蓝法检测细胞存活率;流式细胞术检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量和细胞凋亡情况;试剂盒法检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量及Caspase-3相对活力;Western blot法检测细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）和c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）磷酸化情况。结果：与对照组相比,20 μmol/L NP处理24 h能显著降低细胞存活率（P＜0.05）,同时诱导细胞内ROS生成,下调SOD和CAT活力,增加MDA含量,诱导Sertoli TM4细胞凋亡,增加Caspase-3相对活力,促进ERK、JNK蛋白磷酸化激活;与NP组相比,NAC预处理能够明显削弱NP引起的细胞内ROS生成,使SOD、CAT活力下调,MDA含量增加,Sertoli TM4细胞凋亡,Caspase-3相对活力增强,激活ERK、JNK信号通路。结论：NAC具有干预NP对小鼠Sertoli TM4细胞损伤的作用,这可能与NAC抑制NP诱导的细胞氧化应激和凋亡以及阻断ERK、JNK信号通路的激活相关。     

枸杞多糖缓解小鼠体力疲劳研究

研究枸杞多糖缓解长期过量运动小鼠体力疲劳的作用及其机制。将60只雄性昆明小鼠随机分成5组:空白对照组、模型组及枸杞多糖低、中、高剂量组(75、150、300 mg/kg),每组12只。通过小鼠游泳实验建立小鼠疲劳模型,测定小鼠血清中尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,CREA)、乳酸(lactic acid,LA)含量以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、肝糖原(hepatic glycogen,HG)和肌糖原(muscle glycogen,MG)含量,测定肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。在枸杞多糖干预下,与模型组相比,各剂量组血清BUN和CREA浓度降低,LD含量下降,LDH活性升高,肝组织中MDA浓度降低,SOD活性升高。结果表明枸杞多糖具有一定的缓解体力疲劳、增强小鼠运动能力的作用。     

茶多糖-茶多酚对D-半乳糖诱导的小鼠脑组织氧化损伤的改善作用

目的:探究茶多糖-茶多酚混合成分（茶多糖含量为56.93%,茶多酚含量为19.37%）对D-半乳糖（D-galactose,D-Gal）诱导的小鼠脑组织氧化损伤的改善作用,为功能性食品的研发提供理论依据。方法:以D-Gal诱导小鼠建立氧化应激损伤模型,保留12只小鼠作为正常组。将建模成功的小鼠随机分为模型对照组、阳性药物组（还原型谷胱甘肽,200 mg/kg·bw）、茶多酚对照组（50 mg/kg·bw,与茶多糖-茶多酚高剂量组中茶多酚剂量相当）以及茶多糖-茶多酚混合成分的低、中、高剂量组（40、100、250 mg/kg·bw）,连续灌胃45 d,测定小鼠脑组织匀浆中生物大分子氧化损伤标志物含量及酶类抗氧化系统相关指标的变化。结果:与模型组对比,茶多糖-茶多酚高剂量组小鼠脑组织匀浆中蛋白质羰基（protein carbonyl,PCO）、晚期蛋白氧化产物（advanced oxidation,AOPP）、3-硝基酪蛋白（3-nitrotyrosine,3-NT）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、8-异前列腺素（8-iso-prostaglandin,8-iso-PG）、8-羟基脱氧鸟嘌呤（8-hydroxy-2'-desoxyguanosine,8-OHdG）、5-羟基胞嘧啶（5- hydroxy-2'- desoxyguanosine,5-OH-DG）分别降低22.95%、15.23%、15.29%、25.23%、23.15%、32.36%、28.63%（P<0.05）;超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GPX）水平分别增加71.15%（P<0.05）、36.90%（P<0.05）,均恢复到正常水平（P>0.05）。与茶多酚组相比,茶多糖-茶多酚高剂量组的PCO、AOPP、3-NT、MDA、8-iso-PG、5-OH-DG水平分别降低4.06%、1.81%、4.96%、10.12%、3.40%、12.50%（P>0.05）,8-OHdG水平下降21.19%（P<0.05）;SOD浓度增加15.63%（P>0.05）,GPX浓度增加5.84%（P<0.05）。结论:茶多糖-茶多酚混合成分能有效改善小鼠脑组织的氧化损伤,且茶多糖-茶多酚混合成分的改善作用优于同剂量茶多酚。     

双酚A对小鼠睾丸组织的损伤作用及对细胞凋亡的影响

从毒性病理学角度了解双酚A(BPA)对小鼠睾丸组织病理损伤的作用,为研究BPA毒性作用提供形态学依据。方法 选用108只SPF雄性CD-1小鼠,称重后随机分为4个剂量组(0、100、300、600mg/kg BW)。BPA经口染毒8周,取睾丸组织固定,HE及免疫组化染色后进行光镜和电镜观察,并进行半定量统计。结果 BPA染毒8周后与对照组比较,BPA 300、600mg/kg BW组小鼠体重降低,睾丸指数呈现下降趋势。光镜观察发现BPA染毒小鼠睾丸曲精小管支持细胞、各级生精细胞变性坏死、脱落,精子数量减少;透射电镜观察发现BPA引起睾丸生精细胞出现核固缩、顶体囊和顶体帽发育不良或发育畸形,基膜增厚。免疫组化检测结果表明,与对照组比较,BPA染毒组小鼠睾丸组织NF-κB表达量明显升高(P＜0.01);BPA 300、600mg/kg BW剂量组Caspase-3表达量明显升高(P＜0.01)。TUNEL检测表明BPA染毒组小鼠睾丸凋亡阳性信号与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 上述结果表明经口染毒不同剂量BPA对小鼠睾丸组织均产生了不同程度的损伤,诱导睾丸组织细胞凋亡。     

枸杞多糖诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的形态学研究

采用热水法提取药材枸杞子中的枸杞多糖。本研究通过MTT 实验发现3.125～200mg/L 质量浓度范围内的枸杞多糖能显著抑制宫颈癌Hela 细胞的增殖;采用荧光显微镜、透射电镜和激光共聚焦扫描显微镜观察发现经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现出典型的凋亡特征;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法进一步证实经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现凋亡特征。结果提示枸杞多糖是一种潜在的抗癌复合物,其关键作用机制是诱导癌细胞凋亡。     

枸杞多糖-4的提取、分离及其对雌性下丘脑损伤性肥胖小鼠的减肥作用

提取、分离了枸杞多糖-4,并研究了其对雌性下丘脑损伤性肥胖小鼠的减肥作用及其作用机制。雌性下丘脑损伤性肥胖小鼠模型造型后分别以20、40和60mg/(kg·d)的剂量连续灌胃30d后,称量体重,测量体长,眼球取血处死,称量全身脂肪重量,计算李氏指数和脂肪指数,测定血脂水平,将脂肪组织固定、染色后400倍显微镜下记数单个视野内脂肪细胞个数,测定脂肪组织中AccmRNA含量。结果表明,枸杞多糖-4可显著降低雌性下丘脑损伤肥胖小鼠的体重和脂肪指数;摄入适当剂量的枸杞多糖-4可显著降低血清TC和TG的含量,提高血清HDL含量;并可显著减小脂肪细胞大小和增加脂肪组织内AccmRNA的含量。表明枸杞多糖-4可通过调节机体的能量代谢达到降脂减肥的作用。     

枸杞多糖对小鼠肠道上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量、分布及对IL-2水平影响

为了研究枸杞多糖(LBP)对肠黏膜屏障结构的影响,给10只C57BL/J健康小鼠连续灌服枸杞多糖7d后,显微镜观察小肠上皮内淋巴细胞(IEL)、杯状细胞(GC)数量和分布变化及测定肠黏膜白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)水平。结果表明,应用枸杞多糖小鼠的肠黏膜IEL数量和GC的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜IL-2水平升高。证实枸杞多糖在一定程度上可促进小鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。     

顺铂诱发大鼠睾丸毒性的机制及葡萄籽原花青素的防护作用

目的：探究葡萄籽原花青素（grape seed proanthocyanidin extracts,GSPE）对顺铂（cis -diamminedichloroplatinum,CDDP）诱发大鼠睾丸氧化损伤和细胞凋亡的防护作用。方法：将40 只大鼠随机分为空白对照组、CDDP模型组、GSPE低剂量组（200 mg/（kg•d））、GSPE高剂量组（400 mg/（kg•d））。分别以蒸馏水和相应剂量的GSPE对大鼠连续灌胃15 d,灌胃10 d后一次性腹腔注射CDDP,剂量为7 mg/kg,空白对照组注射相同剂量的生理盐水。注射CDDP后第5天处死大鼠,检测精子指标、大鼠睾丸组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）与谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）与丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,流式细胞仪检测大鼠睾丸细胞凋亡率,并观察睾丸组织在光镜下形态的变化。结果：CDDP模型组大鼠睾丸和附睾的质量、附睾精子的浓度和活动度、GSH-Px、SOD活力以及GSH含量均显著降低,而MDA水平和睾丸细胞凋亡率显著升高。预防性口服GSPE显著改善了CDDP引起的大鼠睾丸质量减小、功能减弱以及氧化应激、脂质过氧化和细胞凋亡这些不利影响。结论：GSPE对CDDP诱发的大鼠睾丸毒性有剂量依赖性防护作用,其机制很可能与抑制体内氧化应激及细胞凋亡有密切关系。     

枸杞及其多糖对家兔血脂的影响

将枸杞、枸杞多糖及其构格多糖—X三者对实验性家兔高血脂症进行降血脂试验（开放型单向质反应序贯试验），探讨枸杞及其多糖降血脂的作用。结果表明，构相及其多精能显著降低血清胆固醇及甘油三酯含量，降脂有效率达100％。     

鱼油对顺铂损伤HEK293细胞及A549细胞的影响

目的：探讨鱼油对顺铂（cis-dichlorodiamineplatinum (Ⅱ),CDDP）抗A549人肺腺癌细胞活性的影响及对CDDP损伤HEK293细胞的保护作用。方法：体外培养A549和HEK293细胞,将细胞分为对照组、CDDP组、鱼油组、鱼油+CDDP组;分别用不同浓度的鱼油对细胞进行预处理,同时建立CDDP组、鱼油+CDDP组CDDP损伤模型,CCK-8法检测细胞活力,试剂盒测定HEK293细胞中丙二醛(MDA)含量,二还原型谷胱甘肽(GSH)含量,超氧化物歧化酶(SOD)的活力等指标。结果：4～16 mg/L浓度的鱼油能够显著抑制CDDP造成的人胚肾HEK293细胞毒性（P<0.05）,其中4 mg/L浓度的鱼油保护效果最佳,且此浓度的鱼油能够显著抑制CDDP(20 mg/L)引起的GSH含量降低以及MDA含量升高（P<0.05）。当鱼油浓度≥32 mg/L时显著增强了CDDP对A549细胞的抑制效果（P<0.05）。结论：一定浓度范围内,鱼油对CDDP致人胚肾细胞HEK293损伤具有一定的保护作用。低浓度鱼油对CDDP所致A549细胞的抑制作用没有...     

枸杞多糖对过敏性哮喘小鼠肠道菌群的影响

探讨枸杞多糖(Lycium barbarum Polysaccharide,LBP)对过敏性哮喘小鼠肠道菌群的影响。本研究将C57BL/6小鼠随机分为3组:空白对照组、过敏性哮喘模型组与LBP干预哮喘疾病组。在LBP干预7周后,分别观察了小鼠的常规状况,HE染色检测了肺组织病理改变,16 S rRNA测序分析了肠道菌群的多样性改变。研究结果表明,LBP干预小鼠哮喘表现显著缓解,呼吸频促的程度较轻,无口唇爪甲黯淡。HE病理染色表明,LBP干预后炎症细胞浸润显著减少,病理损伤明显减轻。为了进一步研究相关机制,又检测了LBP干预后的肠道菌群的多样性改变。测序分析结果表明,LBP干预哮喘疾病组显著改变了肠道菌门水平的厚壁菌门(p=0.0351)和拟杆菌门(p=0.0015);在菌群属水平上显著改变了乳酸菌属(p=0.0105)、梭菌属(p=0.0027)、拟杆菌属(p=0.0385)与Alistipes菌属(p=0.0467)。结果说明,LBP改善过敏性哮喘并改变了肠道菌群的组成,可能丰富哮喘的发病机制与提供新的防治手段。     

物理条件对枸杞水浸提液中枸杞多糖的影响

通过在几种物理条件下(浸提温度、浸提时间与浸提溶剂比)对枸杞水浸提液中枸杞多糖的测定,得出在实验条件下最佳的实验结果:浸提温度90℃、浸提时间3h、浸提溶剂比1:15.为生产枸杞饮料等产品提供参考.     

葡萄籽原花青素对顺铂诱导人胚肾细胞凋亡的拮抗作用

目的： 探讨葡萄籽原花青素（ g r a p e s e e d p r o a n t h o c y a n i d i n , G S P E ） 对顺铂（cis-diamminedichloroplatinum,CDDP）诱导人胚肾细胞HEK293凋亡及相关凋亡基因的影响,并探讨可能的机制。方法：体外培养正常HEK293细胞,噻唑蓝法测定GSPE、CDDP分别对HEK293细胞生长的影响以及GSPE对CDDP诱导HEK293细胞毒性的保护作用,流式细胞仪测定GSPE对CDDP所致HEK293细胞凋亡率的变化,Western blotting测定GSPE对CDDP所致HEK293细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果：GSPE对CDDP所致HEK293细胞毒性具有拮抗作用,可减轻CDDP所致HEK293细胞凋亡,减弱Bax表达、增强Bcl-2表达。结论：GSPE对CDDP所致HEK293细胞凋亡具有拮抗作用,其机制可能与GSPE降低促凋亡基因Bax,升高抗凋亡基因Bcl-2的表达有关。     

松茸多糖的体外抗氧化性及对乙醇氧化损伤小鼠作用的研究

本文以超氧阴离子自由基(Superoxide anion radicals,O₂^-·)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(2,2’-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)自由基清除能力、总还原能力为指标研究松茸多糖(Tricholoma matsutake polysaccharide,TMP)体外抗氧化能力;建立乙醇氧化损伤小鼠模型,通过测定小鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)的活力以及肝脏中过氧化氢酶(Catalase,CAT)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSHPx)的水平研究松茸多糖的体内抗氧化活性。体外抗氧化结果表明,松茸多糖对超...