牦牛血抗氧化低聚肽制备工艺的优化及抗缺氧活性的初探

为简化牦牛血抗氧化低聚肽的制备工艺并对其抗缺氧活性进行初探,实验采用菌酶联合发酵、超滤分级制备牦牛血抗氧化低聚肽,常压耐缺氧实验以及亚硝酸钠中毒存活实验评价其抗缺氧活性。结果表明:1 k Da超滤分级得到的牦牛血抗氧化低聚肽具有良好的体外抗氧化活性,·OH清除能力、DPPH·清除能力、总抗氧化力以及脂质过氧化抑制能力均极显著优于商品化大豆低聚肽(P <0. 01);不同剂量的牦牛血抗氧化低聚肽对小鼠常压缺氧存活时间以及亚硝酸钠中毒存活时间均有不同程度的延长,并呈现剂量依赖性。综上,牦牛血抗氧化低聚肽可作为一种天然抗氧化剂,且具有提高小鼠抗缺氧应激的能力。     

牦牛血低聚肽对缺氧介导的H9c2心肌细胞损伤的保护及其作用机制

体外培养H9c2心肌细胞建立缺氧损伤模型,随机分为5组(n=6):正常对照组、缺氧组、牦牛血低聚肽低、中、高剂量组。结果表明,缺氧组的细胞存活率显著降低(P0.01)、细胞凋亡率显著升高(P0.01)、LDH释放水平显著升高(P0.01),线粒体膜电位极显著降低(P0.01),表明缺氧对H9c2心肌细胞产生了损伤。与缺氧组相比,牦牛血低聚肽干预组的细胞存活率增加,细胞凋亡减少以及细胞中LDH的释放水平下降,并呈良好的剂量依赖关系。同时,牦牛血低聚肽能够抑制线粒体膜电位下降,提高细胞T-AOC水平,降低TNF-α水平,抑制缺氧介导的细胞色素C的释放,上调抗凋亡蛋白(Survivin、p-Akt、Akt)的表达,降低促凋亡蛋白(Caspase-3/9)的活性,且牦牛血低聚肽也影响编码上述蛋白的m RNA水平。以上结果表明;牦牛血低聚肽对H9c2心肌细胞的保护与抑制PI3K-Akt信号转导通路、保护细胞线粒体结构功能完整性有密切关系。     

小麦低聚肽的结构特征及其体外抗氧化活性

通过扫描电镜、基础理化成分、相对分子质量分布、氨基酸组成、紫外光谱和圆二色光谱对小麦低聚肽结构特征进行分析,从羟基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和氧自由基吸收能力（ORAC）4个方面对其体外抗氧化活性进行考察。结果表明,小麦低聚肽具有明显的球体颗粒状,表面有不规则褶皱和气孔,蛋白质和肽含量分别为95.86%、83.74%（均以干基计）,分子质量1000 u以下的组分占92.22%,必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别为20.46%、33.38%,在270 nm波长处有最大吸收峰。二级结构以多种构象并存,α-螺旋、平行式β-折叠、反平行式β-折叠、β-转角和无规卷曲含量分别为5.83%、3.14%、37.57%、20.32%和33.14%。小麦低聚肽对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度（IC50值）分别为9.62、1.54 mg/mL,ABTS自由基清除能力为3.53 mmol Trolox/g,ORAC值为1035.52 μmol Trolox/g。因此,小麦低聚肽具有较强的抗氧化能力,为其在抗氧化功能食品的开发利用提供一定的理论依据。     

泰和乌骨鸡活性肽的分离及其体外抗氧化作用

利用制备型HPLC 对泰和乌骨鸡活性肽进行分离,流动相为0.01mol/L 的磷酸盐溶液,采用强酸型离子交换树脂和强碱型离子交换树脂两步脱盐法对泰和乌骨鸡活性肽各分离组分进行脱盐处理。以肌肽和抗坏血酸为对照,通过清除羟自由基作用、抑制脂质过氧化作用以及对Fe2+ 和Cu2+ 螯合能力4 个体系测定泰和乌骨鸡活性肽及其分离组分的体外抗氧化能力。结果表明：泰和乌骨鸡活性肽分离所得13 个组分均具有一定的抗氧化能力,且与质量浓度呈量效关系,绝大部分分离活性肽组分比活性总肽有更强的羟自由基清除能力、脂质过氧化抑制能力以及Fe2+ 螯合能力。     

乳清低聚肽的制备及其抗氧化活性

利用两步酶解法制备出乳清低聚肽,对其基础理化成分、氨基酸组成和分子量分布进行了分析,从羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力以及还原能力四个方面评价其抗氧化活性。组成分析结果表明:总蛋白质含量为86.83%,氨基酸组成丰富,富含抗氧化性氨基酸,其中亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸含量较高;分子量小于1000u的组分高达85.78%,132~576u范围内组分占59.55%。抗氧化实验结果显示:乳清低聚肽具有较强的抗氧化活性,并且呈量效关系,对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为:2.3、4.2mg/mL,浓度为2.5mg/mL时的还原能力与0.012mg/mL的抗坏血酸相当。      

克东腐乳中低聚肽的分离及其抗氧化活性研究

为研究克东腐乳中低聚肽的分离、纯化方法,评价其抗氧化活性,分别选取3 000 u及10 000 u超滤膜利用超滤、柱层析等方法从腐乳粗提液中分离、提取低聚肽,并结合硫代巴比妥酸法和DPPH法测定腐乳中低聚肽的抗氧化活性。结果表明:超滤后获得分子质量范围在3 000 u以下的粗提物较分子质量范围在3 000 u~10 000 u粗提物具有较强的抗氧化能力。经Sephadex G-25纯化后获得5个吸收峰,测定其抗氧活性,清除自由基能力最大可达38.68%,脂质体系抗氧化能力最大可达0.397 mg/kg。     

食源性低聚肽体外抗氧化活性研究

对工业化生产的食源性低聚肽进行了清除DPPH自由基、抑制亚油酸自氧化2种体系下的体外抗氧化活性的研究。结果表明:在清除DPPH自由基体系中,卵白肽和大豆肽的抗氧化活性最高,其IC50分别为5.767,6.268mg/mL。在抑制亚油酸自氧化体系中,大豆肽和海洋胶原肽对于亚油酸自氧化的抑制率分别达到了75.16%和58.69%。几种食源性低聚肽均有不同程度的抗氧化活性。     

阿胶低聚肽的成分分析及其抗氧化活性

采用复合酶解法制备阿胶低聚肽,分析阿胶低聚肽的营养成分、氨基酸组成和分子量分布,并比较阿胶与阿胶低聚肽清除自由基和防护H₂O₂诱导成纤维细胞氧化损伤的能力。结果表明,阿胶低聚肽含有8种人体必需氨基酸和2种半必需氨基酸,疏水性氨基酸占比较高,约占氨基酸总量的46.23%。阿胶低聚肽的相对分子质量主要集中在900 Da以下,约83.87%。阿胶和阿胶低聚肽对DPPH、ABTS自由基清除率的IC₅₀值分别为1.89和1.39、3.33和2.06 mg/mL。10 mg/mL阿胶和阿胶低聚肽的预处理可使H₂O₂诱导损伤的成纤维细胞存活率分别提高了6.72%和14.34%,SOD的活性分别提升了178.04%和497.88%,减少了细胞内ROS水平。表明,阿胶和阿胶低聚肽均可清除DPPH、ABTS自由基和减轻H₂O₂诱导的成纤维细胞的氧化损伤,且阿胶低聚肽的效果优于阿胶。     

低值海洋鱼低聚肽抗氧化和抗疲劳活性

目的：研究低值海洋鱼（以鳀鱼为主的海产小杂鱼）低聚肽体外抗氧化活性和抗疲劳作用。方法：通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼等4 种体外化学模型、DNA氧化损伤模型及小鼠生理生化指标综合评价低值海洋鱼低聚肽的抗氧化与抗疲劳能力。结果表明：低聚肽清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）分别为（4.76±0.57）、（5.09±0.27）、（5.91±0.23）mg/mL,还原力IC50为（1.31±0.12）mg/mL;与空白组相比,不同剂量的低值海洋鱼低聚肽均延长了小鼠力竭游泳时间,降低了小鼠疲劳后乳酸和尿素氮含量,提高了肝糖原含量和超氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶活力。结论：低值海洋鱼低聚肽具有一定的抗氧化活性,并且能够提高运动耐力,缓解疲劳。     

海洋胶原低聚肽的分离纯化及其抗氧化活性研究

通过总抗氧化能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力及还原能力实验,对海洋胶原低聚肽的体外抗氧化活性进行考察,然后采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）对海洋胶原低聚肽进行分离纯化,测定收集得到的11个组分的总抗氧化能力。结果表明,海洋胶原低聚肽具有一定的总抗氧化能力、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力,并且具有一定的还原能力;RP-HPLC分离纯化后,5个组分的抗氧化活性显著提高,对总肽整体的抗氧化活性起到了重要的作用,并且疏水性肽组分对抗氧化活性的贡献大于亲水性肽组分。      

沉香茶提取物的体外抗氧化和体内降血脂作用评价

本文以广东大面积种植的白木香叶为原料制成的沉香茶为研究对象,采用体外抗氧化法测定其水浸液的抗氧化能力,体内高血脂小鼠模型评价其降血脂作用。实验结果显示沉香茶水浸液具有较强的体外抗氧化能力和体内降血脂能力。其水浸液具有清除羟自由基(OH)、超氧阴离子(O2-)、DPPH自由基(DPPH)以及络合亚铁离子(Fe2+)和还原磷钼酸的能力,IC50分别为700.45±38.04、58.03±4.4、16.24±2.4、70.69±2.8、215.46±14.27 mg/mL;能明显降低高血脂症小鼠血清中TC、TG水平和升高HDL-C水平,与模型组比较,差异具有显著性(P<0.05)。     

DNJ对正常小鼠脂代谢的影响及作用机理初探

本文为探索DNJ对脂代谢的影响及作用机理,给正常小鼠灌胃DNJ 40 d后,用试剂盒测定各实验动物脂代谢相关生化指标、酶活及抗氧化指标。结果显示与阴性对照组比较,8.0 mg/(kg bw?d)剂量DNJ使雌、雄小鼠的体重增加率分别降低59.40%和9.15%;腹腔脂肪系数降低38.30%和15.18%;肝脏脂肪含量降低18.42%和36.66%;血清TC降低27.40%和28.57%,TG降低0.89%和15.03%,HDL增加42.19%和6.80%;肝脏SOD活性上升29.24%和25.17%,GSH增加16.29%和15.00%,8-isoprostane下降18.53%和15.19%;雌鼠FAS、ACO活性下降14.02%和9.67%,雄鼠ACO活性上升21.63%。说明适量DNJ主要通过抑制雌鼠脂肪酸合成、加速雄鼠脂肪酸氧化来减少脂肪蓄积,且对雌鼠具有更好的预防肥胖作用;同时可增强小鼠机体抗氧化能力,预防脂代谢异常。     

发酵小麦制酒精残渣中寡肽的抗氧化及免疫活性

研究从发酵小麦制酒精残渣中提取分离出的寡肽抗氧化和免疫活性。将112 只4 周龄雌性健康昆明小鼠随机分成14 组,基础对照组和实验1～6组饲喂正常基础料的同时分别灌胃生理盐水、低、中、高3 个剂量的寡肽（五肽和七肽）,高脂对照组和实验7～12组饲喂高脂料的同时分别灌胃生理盐水、低、中、高3 个剂量的寡肽（五肽和七肽）,连续灌胃28 d后,测定基础对照组和实验1～6组血清中丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,肝匀浆中MDA含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性,脾脏中淋巴T细胞CD3＋、CD4＋和CD8＋数量,测定基础对照组、高脂对照组和实验7～12组十二指肠、空肠和回肠中MDA含量、SOD、CAT、GSH-Px活性。结果显示,与高脂对照组相比,灌胃寡肽后,血清、肝脏和肠道中MDA含量显著下降（P＜0.05）,SOD、CAT、GSH-Px活性显著升高（P＜0.05）,CD4＋/CD8＋显著升高（P＜0.05）。结果表明寡肽均具有体内抗氧化能力和免疫活性,而且能够清除高脂饮食带来的氧化损伤。     

牦牛酸奶中一株具有抗氧化活性乳酸菌的分离及鉴定

本研究旨在从传统发酵牦牛酸奶中筛选获得具有抗氧化活性的乳酸菌。采用平板计数法对牦牛酸奶样品进行总菌与乳酸菌的菌落计数,采用添加2.5% CaCO₃的M17固体培养基进行乳酸菌的分离筛选,对筛选出的菌株采用16S rDNA基因克隆测序进行分子鉴定以及产酸、糖醇发酵试验,通过测定菌株培养上清液、菌体裂解液和菌体PBS重悬液的总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力和羟自由基清除能力,评价乳酸菌的抗氧化活性。结果表明,分离出的革兰氏阳性球形菌株X1具备产酸特性,糖醇发酵实验表现为屎肠球菌生化反应特征,16S rDNA克隆测序鉴定菌株X1为屎肠球菌。体外抗氧化活性检测发现,菌株X1培养上清液的总抗氧化能力与DPPH自由基清除率显著高于对应的菌体裂解液和菌体PBS重悬液(P<0.05);而菌体PBS重悬液对羟自由基清除率显著高于培养上清液和菌体裂解液(P<0.05)。本试验成功从牦牛发酵酸奶中分离出一株具备抗氧化活性的屎肠球菌X1,其抗氧化活性物质主要存在于菌体培养上清液中,该结果为将牦牛酸奶来源乳酸菌开发为新型抗氧化微生态制剂、缓解畜禽养殖过程中的氧化应激提供菌种来源。     

玉米低聚肽的体外抗氧化作用

在对玉米低聚肽的蛋白质含量、氨基酸组成和分子质量分布进行分析的基础上,从DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除能力以及还原能力4个方面对玉米低聚肽的体外抗氧化活性进行考察。组成分析显示：总蛋白质含量为89.28%,酸溶蛋白质占总蛋白质含量的94.31%;氨基酸组成独特,富含抗氧化性氨基酸,其中亮氨酸、脯氨酸、丙氨酸含量较高;相对分子质量小于1000的组分高达93.05%,主要分布在132～576范围内。体外抗氧化实验结果显示：玉米低聚肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为：1.9、5.4mg/mL和14.9mg/mL,质量浓度为5.0mg/mL时的还原能力与0.02mg/mL的抗坏血酸相当,并且抗氧化能力与其质量浓度呈现剂量关系。     

不同种类蜂蜜抗氧化活性的研究

本文以5种不同蜜源的蜂蜜为研究对象，在测定其总酚酸含量的基础上，研究了蜂蜜对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、脂质过氧化的清除作用，同时还测定了蜂蜜的总还原力。实验结果表明，5种蜂蜜均有显著的抗氧化性，呈剂量效应关系，酚酸含量、还原能力、抗氧化能力之间呈正相关，酚酸含量较高的枇杷蜜和荆条蜜的抗氧化能力较强。     

脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性检测方法

越来越多研究表明,很多疾病和衰老现象都与脂质过氧化有关。该文对近年脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性检测方法作简单综述,包括气相色谱、液相色谱、质谱、化学发光法等,并对不同方法进行综合比较与评价。因各种检测技术对象各有不同,且各自各有优缺点,因此,要针对不同实验目的及条件以选择不同检测方法。     

益生菌发酵牦牛肉血肠的制作工艺优化

本研究采用牦牛血制作益生菌发酵牦牛血肠,优化发酵牦牛肉血肠生产过程中牦牛血添加量、发酵温度、发酵时间和菌种添加量,并探讨其对发酵牦牛血肠的品质影响。通过单因素和正交试验设计,确定发酵牦牛血肠的最优工艺参数条件为牦牛血添加量20%,发酵温度25 ℃,发酵时间16 h,发酵菌株接种量1.5%,在此条件下,发酵牦牛血肠的pH为5.10,蒸煮损失率为6.76%,感官评分为89.87分,发酵牦牛血肠质地口感适中、色泽良好、香味浓郁纯正,无血腥气味,综合品质较好。     

中华真地鳖酶解短肽的抗氧化作用

目的：研究中华真地鳖酶解短肽的体内外抗氧化作用。方法：测定中华真地鳖酶解短肽体外对?OH、O2－?和DPPH自由基的清除作用;并将中华真地鳖酶解短肽灌胃,颈背部皮下注射D-半乳糖致衰老模型小鼠,以小鼠血浆和肝脏中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(T-SOD)及清除?OH活性为指标,研究其体内抗氧化活性。结果：中华真地鳖酶解短肽对?OH、O2－?和DPPH自由基有较强的清除作用,其IC50分别为0.40、8.73、1.32mg/mL;并且与模型组相比,中华真地鳖酶解短肽能显著降低模型小鼠血浆和肝脏中MDA含量(P＜0.01),显著提高其CAT活力(P＜0.05)、GSH-Px活力(P＜0.01)及清除?OH(P＜0.05)能力,显著提高小鼠肝脏T-SOD活力(P＜0.05)。结论：中华真地鳖酶解短肽有较强的体内外抗氧化作用。     

大蒜、生姜、洋葱醇提物抗氧化活性的比较

通过测定大蒜、生姜、洋葱醇提物的还原力、螯合能力及其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力研究了它们的抗氧化活性。实验结果表明,大蒜、生姜、洋葱醇提物均具有较强的还原力和螯合能力,对超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH自由基具有不同效果的清除作用,即大蒜、生姜、洋葱醇提物均具有显著的体外抗氧化活性,值得进一步研究开发。