多波长高效液相色谱法测定米豆腐中4种色素

目的建立多波长高效液相色谱法监测米豆腐中添加柠檬黄、胭脂红、日落黄、亮蓝等4种人工色素。方法氨碱性条件下用水作溶剂超声提取米豆腐中色素,提取液用柠檬酸溶液调节p H值至弱酸性,高效液相色谱在线分离。经Waters C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离;以0.02 mol/L乙酸铵(p H值5.5)—甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温30℃,以各组分的最大吸收波长为检测波长,外标法定量。结果 4种组分在1.00~100μg/m L范围内线性关系良好,相关系数在0.9993~0.9997(n=7),平均加标回收率在87.4%~89.5%(n=3)。结论该斱法同时测定米豆腐中4种人工色素,前处理简单、快速,定量准确,灵敏度高,可用于米豆腐的质量控制。     

薏米茯苓黄酒中功能性成分的测定

以薏米、茯苓为主要原料,进行液态发酵薏米茯苓黄酒的实验,采用高效液相色谱方法对薏米茯苓黄酒中功能性成分进行定性定量分析,色谱条件为:酚类物质,Phenomenex Synergi Hydro-RP C_(18)色谱柱(250×4.6 mm,4μm)作为分离柱,乙腈和1%的乙酸水作为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL/min,紫外检测波长280 nm;薏苡素,Sino Chrom ODS-BP C_(18)色谱柱(250×4.6 mm,5μm)作为分离柱,乙腈和水作为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL/min,紫外检测波长235 nm;茯苓酸,Sino Chrom ODS-BP C_(18)色谱柱(250×4.6 mm,5μm)作为分离柱,乙腈和磷酸水作为流动相进行梯度洗脱,流速0.9 mL/min,紫外检测波长203 nm。结果表明,方法的检出限为0.202~0.337 mg/L,回收率均在87.10%~100.79%,相对标准偏差为0.47%~2.63%之间。     

RP-HPLC定量分析人工北虫草中3种核苷类有效成分

分析5个不同品种泰山人工北虫草中主要核苷类成分的含量并比较其差异。采用反相高效液相色谱(RPHPLC)法检测5个样品中尿苷、腺苷、虫草素的含量。色谱柱为Kromasil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(7∶93),流速1.0 m L/min,检测波长260 nm,柱温为室温。3种成分的进样量分别在5.4~540、5.2~520、5.0~500μg/m L范围与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 4、0.999 4、0.999 2);平均回收率分别为97.83%、98.10%、98.41%,RSD分别为2.51%、1.46%、2.21%(n均为5)。5个品种泰山人工北虫草中主要核苷类成分含量有差异。该方法快速、准确、重现性好,能有效鉴别虫草的核苷类成分,可用于天然虫草和人工虫草中核苷类成分的分析,评价不同来源虫草的质量。     

高效液相色谱法同时测定鸡尾酒中7种合成色素

建立高效液相色谱同时测定鸡尾酒中7种人工合成色素(柠檬黄、胭脂红、苋菜红、亮蓝、诱惑红、日落黄、赤藓红)的方法。方法:利用ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm×5μm)反相色谱柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵-甲醇梯度洗脱,流速0.8 m L/min,柱温35℃,进样量10μL。该方法检出限为0.05~0.1μg/m L,在1.0~50μg/m L范围内线性良好,相关系数R2均大于0.999 88回收率为96.7%~103.3%,RSD为0.61%~1.65%。     

高效液相色谱法测定虫草胶囊中腺苷的含量

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定虫草胶囊中腺苷的含量。方法样品经过研碎、超声处理、离心、过滤后上机待测。使用岛津VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.04 mol/L磷酸二氢钾(15:85,V:V)为流动相;流速:1.0 m L/min;进样量:10μL;检测波长为262 nm。结果腺苷在0.7~70μg/m L的范围内呈良好线性关系,r=0.9999,回收率为99.1%~99.5%,相对标准偏差为0.2%~0.6%。结论本研究建立的方法简便、快捷、准确,可准确测定虫草胶囊中腺苷的含量。     

蛹虫草及其培养基中主要核苷类成分的分析比较

采用高效液相色谱法测定虫草中的核苷类成分,优化后的色谱条件为YMC-Polyamine 柱(250mm × 4.6mm,5μm);采用梯度洗脱,流动相：乙腈- 水(V/V)：0～15min 为90:10,15～20min 为86.5:13.5,20～30min 为75:25,30～35min 为70:30;流速：1mL/min;柱温：30℃;检测波长：259nm;进样量：10μL。结果表明：胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离,该方法稳定性好、精密度高、重现性好,适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现,蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似,但含量差异非常显著,同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高,其他核苷类成分很少,因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。     

高效液相色谱法同时测定保健食品中11种功效成分

建立高效液相色谱同时测定保健食品中11种功效成分的高通量分析方法。样品前处理采用甲醇-水-磷酸溶液提取,对油脂样品则采用甲醇-水-磷酸溶液与正己烷液液萃取除脂。采用Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-2 g/L辛烷磺酸钠溶液(加入1 m L磷酸)作为流动相,流速1.0 m L/min,梯度洗脱,用二极管阵列检测器串联荧光检测器检测,外标法峰面积定量。VB2在0.25~25 mg/L、VB6在0.5~20 mg/L、烟酸、烟酰胺在1~100 mg/L、其余5种功效成分在0.5~50 mg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数r为0.999 1~1.000 0。在样品中待测成分含量约0.5、1倍和2倍3个水平的添加回收率为86.4%~110%之间,相对标准偏差为0.21%~11.7%。方法的定量限:烟酸、烟酰胺为20 mg/kg,其余9种功效成分方法的定量限为10 mg/kg。     

固相萃取-超高效液相色谱法同时测定肉制品中5种合成着色剂

目的建立同时测定肉制品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄和诱惑红等5种合成着色剂含量的固相萃取-超高效液相色谱(SPE-UPLC)方法。方法样品以乙醇-氨水(75:25,v/v)为提取液,振荡超声提取肉制品样品中的着色剂,调节pH后经OASIS WAX固相萃取小柱净化和富集,在ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)上以甲醇-乙酸铵水溶液(0.02 mol/L)为流动相进行梯度洗脱色谱分离,流速0.3 m L/min,柱温30℃,进样量3μL,检测波长200~500 nm。结果 5种合成着色剂在0.5~25.0 mg/L范围内线性关系良好(r20.9999),检出限为0.05~0.20 mg/kg,最低定量限为0.15~0.60 mg/kg,RSD为1.2%~3.3%,在加标水平为检出限3倍和6倍时,5种合成着色剂在肉制品样品中的加标回收率分别为89.7%~96.0%和91.3%~97.5%。结论本法准确度高,具有良好的重现性和精密度,可用于肉制品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄和诱惑红等5种合成着色剂的测定。     

超声波提取HPLC-UV法测定人工蛹虫草中8种核苷类物质

蛹虫草中核苷及其代谢化合物的分析检测对于蛹虫草的生理和药理研究是非常重要的。该文采用超声波辅助提取HPLC-UV法,以反相DIAMONSIL C1(8250mm×460mm,5μm)为色谱柱,以水(含0.1%乙酸)和甲醇混合液为流动相进行梯度洗脱,同时测定了人工蛹虫草中的尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素等8种化合物。结果表明,超声波提取的最优条件为提取溶剂为甲醇,提取温度25℃,提取时间15min,超声功率100W,料液比1:100,在最优的超声提取和色谱分离条件下,8种核苷类化合物在检测范围内的线性关系较好(r2>0.9995),检出限和定量限最低可达到16.9ng/mL和56.4ng/mL,日内和日间精密度(RSD)分别小于4.1%和4.6%,加样回收率为81.9%~93.7%。此法可用于冬虫夏草及其代用品中核苷类化合物的分析检测。     

超声辅助低共熔溶剂法提取葡萄皮中残留农药

建立超声辅助低共熔溶剂结合液液萃取技术提取葡萄皮中甲霜灵、吡虫啉、多菌灵3种农药的方法。采用ChCl-乙二醇(1∶2/mol∶mol)和ChCl-丙三醇(1∶4/mol∶mol)比例为体积比1∶1混合体系,用量2 mL,超声时间5 min,pH值为5,进行提取。色谱条件,色谱柱:Venusil MP C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;检测波长:280 nm和210 nm;进样量:20μL;流动相:甲醇(A)-0.05%磷酸水溶液(B);梯度洗脱。多菌灵、吡虫啉、甲霜灵的提取回收率分别为多菌灵91%,吡虫啉112%,甲霜灵85%。3种成分在线性范围内关系良好。超声辅助低共熔溶剂结合液液萃取方法能有效地提取出葡萄皮中甲霜灵、吡虫啉、多菌灵3种农药。     

反相高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

建立一种新的反相高效液相色谱方法,用于蛹虫草中腺苷和虫草素的定性定量分析。样品经水超声提取,以终浓度20mmol/L柠檬酸、40mmol/L醋酸、20mmol/L三乙胺的混合溶液- 乙腈(体积比98:2)为流动相,流速1.0mL/min,色谱柱Capcellpak C18(150mm × 4.6mm,5μm)分离,柱温40℃,进样量10μL,紫外检测波长260nm。在此条件下,腺苷在1～1000μg/mL 范围内有良好的线性关系(Y=33574X+54.526,R2=0.9999),检测限0.2μg/mL,回收率93.75%～96.90%,RSD 为0.116%;虫草素在2～1000μg/mL 范围内有良好的线性关系(Y=34385X+23.103,R2=1.0000),检测限0.2μg/mL,回收率92.03%～97.35%,RSD 为0.104%。该方法样品处理简便、分离度高、杂质干扰小、回收率高、重复性好,能够对蛹虫草中腺苷和虫草素进行准确的定性定量分析。     

4种虫草无性型真菌中核苷类成分比较分析

以已知核苷为标准品,并与冬虫夏草生药作对比,采用反相高效液相色谱法对蝉拟青霉RCEF1081、蛹草拟青霉RCEF0845、戴氏绿僵菌RCEF0772、长座被毛孢RCEF0717菌丝体中主要核苷类化学成分进行了比较分析。结果表明,蝉拟青霉中虫草素和鸟苷含量较高,分别为0.5752mg/g、0.2225mg/g;长座被毛孢中尿苷和肌苷含量较高,分别为3.8024mg/g、4.5146mg/g;戴氏绿僵菌中胸苷和腺苷含量较高,分别为4.9514mg/ g、3.9360mg/g,且均远远高于对照品冬虫夏草生药中的同种核苷含量。     

人工培养北虫草子座和培养基中多糖和核苷类成分的含量分析

目的建立分析北虫草中多糖和核苷类成分含量的方法,并对比分析北虫草子座和培养基中的成分.方法用硫酸-苯酚法测定北虫草中多糖含量;用RP-HPLC法同时测定北虫草中尿苷、腺苷和虫草素含量.结果北虫草子座中多糖含量分别为4.67%和4.34%,培养基中为3.42%.北虫草2006年样品与2007年样品比较,尿苷(0.267%vs 0.063%)、腺苷(0.247%vs0.082%)和虫草素(0.054%vs0.166%)含量均有显著差异,2007年样品子座与培养基相比,尿苷(0.063%vs0.052%)和腺营(0.082%vs0.117%)含量无显著差异,培养基中虫草素含量(0.318%)显著高于子座(0.166%).结论建立了北虫草多糖和核苷类成分定量分析方法.该方法简便,可靠,可准确测定北虫草中多糖和3种核苷类成分的含量.     

响应面法优化蛹虫草固态发酵产物虫草素与腺苷综合提取工艺

以大米、啤酒糟共培养的蛹虫草固态发酵产物为原料,采用浸提法综合提取虫草素与腺苷,并利用响应面法优化提取条件。通过单因素试验考察提取时间、乙醇溶液体积分数、液料比和提取温度对综合提取虫草素与腺苷得率的影响。在单因素试验基础上,利用Box-Behnken试验设计,对浸提工艺中各影响因素进行优化。结果表明,浸提法综合提取虫草素与腺苷的最适工艺条件为纯水提取、提取温度45?℃、液料比22∶1（mL/g）、提取时间87?min,在该条件下虫草素与腺苷的综合得率为2.491‰,与模型理论预测值相近,说明该模型回归性良好,试验的拟合程度高。蛹虫草固态发酵产物中富含虫草素、腺苷,具有一定开发价值。     

细脚拟青霉深层发酵菌丝体核苷类成分分析

以已知核苷为标样,并以冬虫夏草生药作对比,利用反相高效液相色谱法对细脚拟青霉RCEF0441 深层发酵菌丝体中核苷类化学成分进行分析。结果表明,细脚拟青霉RCEF0441 菌丝体中主要含有胞苷、尿苷、鸟苷、肌苷、胸苷和腺苷6 种核苷,其中胞苷的含量为冬虫夏草生药的3 倍左右,肌苷和鸟苷的含量则分别是冬虫夏草生药的7 和9 倍左右,尿苷和腺苷的含量也显著高于对照品冬虫夏草生药(p<0.05)。     

古尼拟青霉小孢变种核苷类成分分析

以已知核苷为标样,并以冬虫夏草生药作对比,利用反相高效液相色谱法对古尼拟青霉小孢变种RCEF0864菌丝体和发酵液中核苷类化学成分进行分析,结果表明古尼拟青霉小孢变种RCEF0864菌丝体中主要含有胞苷、尿苷、鸟苷、肌苷、环磷腺苷和腺苷等6种,其中腺苷和尿苷的含量均为冬虫夏草生药的3倍左右,肌苷和鸟苷的含量则分别是冬虫夏草生药的7倍和10倍左右,尿苷的含量也高于对照品冬虫夏草生药。古尼拟青霉小孢变种RCEF0864发酵液中主要含有尿苷、胞苷、胸苷、肌苷、环磷腺苷和腺苷等6种核苷类物质,其中,腺苷和胞苷的含量均高于对照品冬虫夏草生药。     

超高效液相色谱-紫外检测法测定婴幼儿配方乳粉中的核苷酸含量

采用磺酸甜菜碱型两性离子亲水相互作用色谱法,建立婴幼儿配方乳粉中5 种核苷酸（5’-胞嘧啶核苷酸、5’-尿嘧啶核苷酸、5’-腺嘌呤核苷酸、5’-次黄嘌呤核苷酸、5’-鸟嘌呤核苷酸）的测定方法。使用二维固相萃取模式,弱阴离子交换和强阳离子交换,对样品中的核苷酸进行提取,紫外检测器采集数据;用0.001%甲酸-乙腈溶液和pH 5的10 mmol/L磷酸二氢钠溶液作为流动相,等度洗脱。5 种核苷酸在其线性范围内线性关系良好,定量限在0.10～0.15 mg/100 g范围内,方法回收率均在95%以上,精密度在10%以内。该方法快速、灵敏、准确,适合各类婴幼儿配方乳粉中核苷酸的测定。     

蜂头虫草无性型——蜂头层束梗孢活性成分分析

测定了蜂头虫草无性型——蜂头层束梗孢(Hymenostilbe sphecophila Kob)HS01胞外多糖含量、5种核替代谢量和氨基酸含量。结果表明,胞外多糖含量最高可达1.75 g/L,胞内多糖含量最高可达2.423%;发酵液与菌丝体中均含有尿苷、鸟苷、肌苷、胸腺嘧啶核苷和腺苷5种核苷,其含量均高于对照品冬虫夏草生药;HS01发酵菌丝体与天然虫草生药在氨基酸种类上一致,但氨基酸总量和人体所必须氨基酸总量明显高于冬虫夏草生药,氨基酸总量为8.330 mg/g。