红曲霉菌胞外多糖的分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性测定

目的:分离纯化红曲霉菌胞外多糖（Exopolysaccharide,EPS）,测定各组分的抗氧化活性并对其结构进行初步表征。方法:红曲霉菌发酵液经乙醇沉淀获得胞外多糖,经精制除杂和DEAE-纤维素柱层析法分离纯化获得多糖组分,再分别用高效凝胶过滤色谱法（HPGFC）、柱前衍生PMP-HPLC法测定相对分子质量（Mw）和单糖组成,测定多糖组分清除DPPH和羟自由基的能力,评价其体外抗氧化活性。结果:EPS经分离得到三个组分EPS-1、EPS-2和EPS-3,相对分子质量分别为8673、143537、238742 Da。EPS-1、EPS-2均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.301∶2.052∶3.614和1∶2.475∶1.950∶1.532,EPS-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1∶0.401∶0.066∶0.307∶2.974。三个多糖组分对DPPH·和羟自由基均有清除能力,并与多糖浓度呈现正相关。当多糖浓度为1 mg/m L时,三个组分对DPPH清除率分别为16.4%、15.9%和14.8%;对清除羟自由基的清除率分别为40.4%、39.6%、63.8%。结论:红曲霉菌胞外多糖各组分的相对分子质量和单糖组成比例均有差异;对羟自由基、DPPH·的清除作用也存在差异,这种活性差异可能与各组分Mw及结构差异相关。      

蛹虫草子实体中抗氧化活性化合物的分离纯化

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除活性为指导对蛹虫草子实体中的抗氧化活性化合物进行了分离纯化。对蛹虫草子实体经甲醇浸提后获得的甲醇提取物,再进行硅胶柱色谱分离得到一个具有较强抗氧化活性的组分CM9,组分CM9利用反相高效液相色谱法进行活性指导下的分离得到抗氧化活性化合物CM9-1。该化合物采用薄层色谱和高效液相色谱法进行纯度检测发现此为纯品化合物,液相色谱-质谱分析结果表明该化合物相对分子质量为430,分子式为C22H22O9。该物质在质量浓度为1.0 mg/m L时对0.4 mg/m L的DPPH自由基试剂的清除率为(73.67±0.29)%。     

长白山区核桃青皮多糖分离纯化、鉴定及抗氧化活性分析

对核桃青皮多糖（polysaccharide of walnut green husks,JPs）进行分离纯化,并对得到的多糖进行单糖组成及体外抗氧化活性分析。利用超声波辅助提取JPs,经醇沉、除蛋白、透析等一系列处理后,先后利用DEAE-Sepharose和Sephadex?G-100柱色谱分离纯化JPs得到了两种均一多糖（JPs-1-1和JPs-2-1）;利用高效凝胶渗透色谱法测定两种均一多糖的分子质量分别为5.45×104、5.22×104?u;利用PMP-柱前衍生高效液相色谱法测定了两种均一多糖的单糖组成,均是由鼠李糖（Rha）、葡萄糖醛酸（GlcA）、半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glc）、半乳糖醛酸（GalA）、木糖（Xyl）及阿拉伯糖（Ara）以不同的物质的量比组成。总抗氧化能力实验、1,1-二苯基-2-苦味基肼自由基和羟自由基清除实验结果表明JPs及分离纯化得到的两种均一多糖均具有较好的抗氧化活性,而且抗氧化活性的能力与样品的质量浓度呈正相关。     

冬枣多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的：分离纯化冬枣多糖,并研究其组分、结构特征和抗氧化活性。方法：采用水提醇沉、脱蛋白脱色、DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化冬枣多糖;利用Sephadex G-100凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子质量的测定;通过紫外光谱、红外光谱、气相色谱法进行了初步结构分析;采用邻二氮菲法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）体系对纯化多糖进行抗氧化活性的研究。结果：冬枣多糖经DEAE-52分离和Sephadex G-100纯化得到2 个组分DPA和DPB,经Sephadex G-100鉴定均为均一组分,DPA和DPB分子质量分别为1.04×104、3.02×105 D,不含蛋白质和核酸,为吡喃型糖苷环骨架,DPA的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为6.66∶1.00∶6.75∶2.09;DPB的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为4.33∶10.90∶1.00∶3.25∶4.78;DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性,随着多糖质量浓度的增加,其抗氧化活性增强,在质量浓度为8 mg/mL时对羟自由基清除率分别为28.52%、78.79%,在质量浓度为0.4 mg/mL时对DPPH自由基清除率分别为9.97%、24.54%。结论：DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性。     

准噶尔山楂叶抗氧化及抑制α-葡萄糖苷酶活性

采用超声提取不同月份准噶尔山楂叶,系统溶剂萃取其醇提物得到环己烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位,分别测定其总黄酮含量,通过清除DPPH自由基、铁离子还原能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性评价准噶尔山楂叶不同提取物的体外抗氧化活性及降血糖活性。结果表明,准噶尔山楂叶各提取物均有不同程度的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中以总黄酮含量最高的乙酸乙酯部位(28.87 mg/g)效果最佳,其对DPPH清除活性(IC_(50)=0.026 mg/m L)远强于阳性对照BHA(IC_(50)=0.996 mg/m L),α-葡萄糖苷酶抑制活性(IC_(50)=191.71 g/m L)高于阳性对照阿卡波糖(IC_(50)=1 044.32 g/m L)。各提取物体外抗氧化和降血糖活性与其总黄酮含量呈正相关性,说明黄酮类化合物为影响其活性的主要因素。     

紫芝胞外多糖分离纯化及抗氧化性的研究

目的:探讨紫芝(Ganoderma Sinense)胞外多糖的分离纯化及抗氧化活性.方法:采用乙醇沉淀法、聚酰胺脱蛋白法,DEAE-52阴离子交换色谱柱法分离纯化紫芝胞外多糖;通过对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力的测定确定抗氧化活性.结果:粗多糖经DEAE-52柱层析纯化得到三种多糖组分GSP1、GSP2和GSP3,均具有抗氧化活性.其中GSP2的抗氧化活性尤为明显,在1.6mg/mL时DPPH自由基清除率达到76.3％;在5mg/mL时羟自由基的清除率达到81.5％.结论:三种紫芝胞外多糖组分具有较强的抗氧化活性,其中GSP2最为明显.     

紫芝胞外多糖分离纯化及抗氧化性的研究

目的:探讨紫芝（Ganoderma Sinense）胞外多糖的分离纯化及抗氧化活性。方法:采用乙醇沉淀法、聚酰胺脱蛋白法,DEAE-52阴离子交换色谱柱法分离纯化紫芝胞外多糖;通过对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力的测定确定抗氧化活性。结果:粗多糖经DEAE-52柱层析纯化得到三种多糖组分GSP1、GSP2和GSP3,均具有抗氧化活性。其中GSP2的抗氧化活性尤为明显,在1.6mg/mL时DPPH自由基清除率达到76.3%;在5mg/mL时羟自由基的清除率达到81.5%。结论:三种紫芝胞外多糖组分具有较强的抗氧化活性,其中GSP2最为明显。      

余甘子多糖体外降血糖及抗氧化活性研究

为测定余甘子多糖降血糖及抗氧化活性,采用体外化学模型研究余甘子多糖对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶抑制活性及对羟自由基(·OH)、超氧自由基(O_2~-·)、1,1-二苯-2-苦肼自由基(DPPH·)的清除作用。结果表明,余甘子多糖对两种酶具有剂量依赖性抑制活性,其最大抑制率均高于阿卡波糖;自由基清除测定表明余甘子多糖清除率总体上弱于维生素C,但高浓度时对DPPH·的清除作用与维生素C相当。余甘子多糖具有一定的降血糖和抗氧化活性,有很好的开发价值。     

香菜多糖的抗氧化及降血糖活性研究

本研究以香菜为原料,探究其多糖的抗氧化活性和降血糖活性。通过测定香菜多糖对DPPH、ABTS+自由基清除能力和总还原能力评价其抗氧化活性,并通过检测香菜多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果研究其降血糖能力。结果表明：随着香菜多糖提取物浓度的增加,其总还原能力以及对自由基清除率提高,当质量浓度为2 mg/mL时,其对DPPH和ABTS+自由基清除率分别为61.32%和70.76%,表明其具有较好的抗氧化活性;此外,对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制率亦随其浓度增加而增大,当香菜多糖浓度为6 mg/mL时,其对这两种酶抑制率分别可达49.01%和64.76%,表明其具有一定的降血糖活性。因此,香菜多糖可作为一种新的天然抗氧化剂和降糖物质,这将为香菜在食品、药品和保健品等方面的开发利用提供理论依据。     

分心木酸性多糖SJP-2的理化性质及其抗氧化活性研究

以分心木为原料进行热水浸提,经过醇沉、脱色素、脱蛋白以及DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱色谱和Sephadex-G50凝胶柱色谱分离纯化得到一种酸性多糖组分(SJP-2),再对该组分进行理化性质及抗氧化活性分析。结果表明:SJP-2不含蛋白,是一个低分散度,分子量较为均一的多糖,分子量为3.239×10~3g/mol;HPLC分析得知SJP-2为一种酸性多糖,其单糖组成及摩尔比例为阿拉伯糖∶半乳糖∶葡萄糖∶半乳糖醛酸=1∶2.62∶4.45∶18.53;抗氧化活性测得SJP-2清除DPPH自由基、羟自由基以及ABTS自由基的IC_(50)分别为0.094、0.945、0.591 mg/m L,还原能力在1.0 mg/m L时达到1.158,ORAC值为(1217.99±31.22)μmol TE/g,说明SJP-2具有较高的体外抗氧化能力。     

银杏果多糖的物化性质及抗氧化活性研究

以银杏果为原料,采用水提醇沉法提取,Sevag法除蛋白,大孔树脂法脱色制备多糖,利用紫外光谱（UV）、高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（IR）并对多糖的结构进行了分析;通过对DPPH自由基、超氧自由基和羟基自由基的清除作用,研究银杏果多糖体外抗氧化活性;用银杏果多糖对高脂小鼠进行干预后,测定血清和肝脏中SOD、GSH-PX、MAD和CAT含量,以此评定体内抗氧化活性。结果表明,银杏果多糖中不含蛋白质和花色苷等物质,主要是由葡萄糖、半乳糖和木糖三种单糖组成,其摩尔比为2.26：19.60：4.29,是一种含有α-糖苷键的吡喃糖;银杏果多糖对DPPH自由基、超氧自由基和羟基自由基的清除效果显著,其IC50分别为0.15 mg/L、0.30 mg/L、0.47 mg/mL;体内实验显示,银杏果多糖能显著提高血清和肝脏中SOD、GSH-Px和CAT的含量、降低血清和肝脏中MDA的含量。因此可知,银杏果多糖有显著的抗氧化功能。     

骏枣多糖的分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究

本实验以骏枣为原料,对骏枣多糖的分离纯化、结构表征及抗氧化活性进行研究。通过水提醇沉得骏枣粗多糖HZPC,再经DEAE-52阴离子层析柱和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱分离纯化获得精制骏枣多糖组分HZPC-2。利用高效凝胶色谱法(HPGPC)和离子色谱法(IC)测定HZPC-2的分子量及单糖构成,紫外光谱、红外光谱和扫描电镜研究HZPC-2的结构特征,最后对HZPC-2的抗氧化活性进行评估。结果表明：HZPC-2为α-吡喃葡萄苷骨架的中性多糖(JDP-N),分子量为3.25×10⁴ Da,是由鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)和半乳糖醛酸(GalA)构成,其摩尔比为0.05:0.34:0.29:0.15:0.08:0.02:0.06。扫描电子显微镜观察结果显示,HZPC-2表面呈沟壑状且朝四面延伸,四周嵌着孔状结构。体外抗氧化试验表明,HZPC-2对三种自由基清除活性的最强的是DPPH自由基,其次是羟自由基,最弱的是ABTS自由基,这可作为潜在抗氧化剂以及为开发具有骏枣多糖功能的食品...     

脱脂羊脑蛋白水解多肽的分离纯化及抗氧化活性

为制备羊脑蛋白抗氧化肽,本实验对脱脂羊脑蛋白含量及氨基酸组成进行了分析;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）对枯草芽孢杆菌中性蛋白酶不同酶解时间的酶解液分子质量进行了分析;采用交联葡聚糖凝胶Sephadex G-25和Sephadex G-15对羊脑酶解产物进行了逐级分离纯化,以羟自由基（·OH）和亚硝酸根离子清除能力为指标对分离组分进行抗氧活性评价,并对纯化后的组分抗氧化活性进行了测定。结果表明,脱脂羊脑粉中蛋白含量为60.55%,在测定的17 种氨基酸中,谷氨酸和天冬氨酸这两种酸性氨基酸含量最高,且含有7 种必需氨基酸;羊脑蛋白经酶解后,分子质量集中在10 kD以下;经Sephadex G-25纯化后,得到了6 个组分,其中组分F4的抗氧化活性最强,组分F4经SephadexG-15纯化后,得到3 个组分,其中组分F4-2的抗氧化活性最强,组分F4-2对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、·OH、超氧阴离子自由基（O2－·）、亚硝酸根离子的半数抑制率IC50分别为1.64、2.47、7.98、5.14 mg/mL。     

人参果多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究

通过水提法得到人参果中的总多糖(WGBP),并通过离子交换层析对WGBP进行分离纯化,得到一个中性糖WGBP-N和三个酸性糖级分(WGBP-1、WGBP-2、WGBP-3)。利用高效液相色谱及分子筛层析法对各个级分的单糖组成、分子量等进行了分析,并对结构特点进行了概括。通过DPPH和羟自由基清除实验分析了各级分的抗氧化活性。结果表明,WGBP主要由鼠李糖(rhamnose,Rha)、半乳糖醛酸(galacturonic acid,GalA)、半乳糖(galactose,Gal)、阿拉伯糖(arabinose,Ara)和葡萄糖(glucose,Glc)组成,分子量分布广泛。WGBP-N主要由Gal、Ara和Glc组成,比例为62.7:17.0:17.1。三个酸性糖主要由不同比例的Rha、GalA、Gal和Ara构成。WGBP具有明显的DPPH·和羟自由基清除活性,且清除率随浓度的升高而逐渐增强。当WGBP浓度为2.0 mg/mL时,DPPH·清除率为62.7%;当浓度为0.2 mg/mL时,羟自由基清除率为81.2%。WGBP对DPPH·和羟自由基清除活性优于四个子级分。     

东北林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性研究

以抗坏血酸(VC)为对照,采用邻苯三酚自氧化法、邻二氮菲-Fe氧化法、DPPH法和总抗氧化能力测定林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性。结果表明:林蛙皮精制多糖对超氧阴离子自由基(O2-.)、羟基自由基(.OH)、DPPH自由基均有不同程度的清除能力,当多糖浓度为0.1mg/mL时,多糖的总抗氧化能力为1.48mmol/g。随着林蛙皮多糖浓度的增加,抗氧化能力均进一步提高,说明林蛙皮精制多糖具有良好的抗氧化活性。     

巢湖蓝藻酸性多糖的理化性质及其体外抗氧化作用

目的：以从巢湖蓝藻中分离纯化的一种多糖（acidic polysaccharide from Cyanobacteria of Chaohu,CHAP）为研究对象,对其纯度、分子质量、光谱特征、单糖组成、抗氧化作用进行研究,旨在为水华蓝藻资源进行综合开发利用提供有价值的参考。方法：采用60 ℃的热水抽提蓝藻,采用硫酸铵去除其中蛋白质,粗多糖经DEAE-52阴离子交换层析柱分离并用Sephadex G-150进行纯化得到纯化多糖CHAP。结果：CHAP中多糖和蛋白质含量分别为91.49%和0.18%,紫外-可见光谱表明CHAP不含核酸,高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）测定CHAP的分子质量为2.209×105 D,离子色谱（ion chromatography,IC）表明CHAP由6.36%的阿拉伯糖、35.47%的葡萄糖、5.03%的木糖、17.09%的半乳糖、27.36%的甘露糖及一种未知单糖构成。红外光谱表明CHAP是具有α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰的吡喃糖,CHAP的抗氧化作用表明：CHAP对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和超氧阴离子自由基（O2－·）有较强的清除能力,其IC50分别为276 μg/mL和186.05 μg/mL。CHAP对羟自由基（·OH）的清除能力较弱,清除率不到10%。     

银杏叶多糖分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性研究

目的:分离纯化银杏叶多糖(GBLP)并对其结构进行表征及抗氧化活性研究。方法:超声辅助提取制备银杏叶粗多糖,经精制除杂和阴离子交换柱分离获得多糖级分,采用高效凝胶过滤色谱(HPGFC)、气相色谱法(GC)分析相对分子质量和单糖组成;采用体外抗氧化方法评价银杏叶多糖抗氧化活性。结果:GBLP经分离后获得三个级分GBLPⅠ、GBLPⅡ、GBLPⅢ,其相对分子质量(Mw)分别为41861、361352、637533。GBLPⅠ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成;GBLPⅡ和GBLPⅢ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖组成,但其摩尔比不同。体外抗氧化实验表明GBLPⅢ对羟自由基的清除能力最强,其次为GBLPⅡ、GBLPⅠ、GBLP;而GBLPⅡ和GBLPⅢ对超氧阴离子清除能力相对较好,其次为GBLPⅠ、GBLP。结论:银杏叶多糖各级分的单糖组成比例、相对分子质量有差异;对羟自由基的清除作用强于对超氧阴离子的清除作用,对羟自由基的清除作用差异可能与Mw及结构相关。      

乌贼墨汁多糖的提取及抗氧化作用研究

研究乌贼墨汁多糖的提取工艺和抗氧化能力。采用单因素试验和正交试验对乌贼墨汁多糖提取条件进行优化,同时通过乌贼墨汁多糖对清除DPPH自由基、 ·OH和Fe3＋还原能力的测定考察多糖的抗氧化能力。结果表明,最佳提取条件为加酶量4.5%、料水比1:15(g/mL)、温度50℃、时间4h、pH8,此条件下乌贼墨汁多糖的得率为3.63%。乌贼墨汁多糖具有一定的抗氧化能力,且在一定范围内,墨汁多糖的抗氧化能力与质量浓度呈线性正相关关系,其中对DPPH自由基和 ·OH的半数清除质量浓度分别为3.61mg/mL和8.06mg/mL。