灵芝孢子酶法破壁的研究

选择复合酶在１０％酒精浓度下水解６天，孢子破壁率达４９％；７５％酒精浸泡３天后用复合酶水解４天，孢子在破壁率达５２％。     

破壁对灵芝孢子粉品质的影响

以灵芝孢子粉为原料,利用微波、超声对其进行破壁,以微波和超声的时间、功率、料液比为因素,灵芝孢子粉的多糖和三萜的含量为指标,得到最佳破壁工艺为料液比20∶1 (mL/g),微波功率280 W,微波时间90 s。以微波破壁所得到的灵芝孢子粉为原料,对比破壁前后的孢子粉粒度、松紧密度、比表面积、色度、休止角并用电镜观测形态;测定破壁前后孢子粉的总脂肪、总多糖、总三萜、灰分、蛋白质、多酚等营养成分含量,比较破壁前后孢子粉的品质。结果表明,破壁后灵芝孢子粉的感官状态与未破壁孢子粉差异明显:孢子粉的比表面积、松紧密度、色度均明显增加;粒度、流动性有所减小。经过破壁后的孢子粉中脂肪、多糖、三萜、灰分、蛋白质等营养物质的含量均不同程度地提高。实验证明,微波破壁处理有助于灵芝孢子粉中三萜、粗多糖、粗脂肪等功能性成分的溶出,大大增加了灵芝孢子粉有效成分的溶出。     

灵芝孢子破壁技术的研究

通过对灵芝孢子破壁技术的研究,确定了适合灵芝孢子油提取的前处理方法.分别采用萌发、超微粉碎、酶解进行灵芝孢子的破壁,效果不理想;将三种方法综合进行灵芝孢子破壁,取得了较好的效果,破壁率达到85.38%.因此,采用综合破壁法作为灵芝孢子油提取的前处理手段较为合适.     

灵芝孢子破壁技术的研究

通过对灵芝孢子破壁技术的研究,确定了适合灵芝孢子油提取的前处理方法。分别采用萌发、超微粉碎、酶解进行灵芝孢子的破壁,效果不理想;将三种方法综合进行灵芝孢子破壁,取得了较好的效果,破壁率达到85.38%。因此,采用综合破壁法作为灵芝孢子油提取的前处理手段较为合适。      

破壁灵芝孢子的体外模拟消化特性研究

为探究破壁灵芝孢子在口腔和胃肠道中的消化吸收情况以及对肠道环境的影响。以机械碾压法、微波法和超声法破壁的灵芝孢子（Ganoderma lucidum spore,GLS）为研究对象,经体外模拟人体口腔、胃、小肠消化系统及透析模型,随后将消化后的底物进行体外发酵。测定消化各个阶段的灵芝孢子失质量率、多糖和三萜化合物释放量、生物可接受率和透析率以及小肠消化底物在0、6、12、24、48 h体外发酵过程中pH变化。结果显示,胃和小肠是灵芝孢子的主要消化场所,破壁组平均失质量率达到23.84%,其中机械碾压组更易被消化,其失质量率为29.46%。97%的多糖在胃肠液中溶出,机械碾压组多糖的生物可接受率具有最高水平,为87.33%。三萜只在破壁组小肠模拟消化中有微量溶出,平均约1.50±0.04 mg/g,95.2%的三萜随沉淀进入结肠。体外发酵结果显示,发酵液pH在0~12 h持续下降,并在12 h基本到达发酵终点。对比三种破壁灵芝孢子的消化特性,机械碾压法破壁的品质可观,不失为企业规模化破壁生产的优选。综上所述,破壁有利于提高灵芝孢子的有效成分在人体消化环境内释放量和生物可接受率,促进结肠发酵产酸,有助于调节人体肠道环境。     

灵芝发酵麸皮粗多糖的组成及抗氧化活性分析

为研究灵芝发酵麸皮粗多糖组成及抗氧化活性,对比分析了灵芝发酵前后麸皮粗多糖的体外抗氧化活性和组分,并通过高效液相色谱、傅里叶红外光谱初探灵芝发酵麸皮粗多糖的结构。结果表明:灵芝发酵麸皮粗多糖（GWBP）在4.0 g/L浓度下的DPPH、羟基自由基清除率和还原力分别为91.37%、95.74%和0.92,显著高于未发酵麸皮粗多糖（WBP）（P<0.05）。GWBP组分中黄酮、多酚、蛋白含量分别为5.41、12.74和206.41 mg/g,显著高于WBP（P<0.05）。GWBP是一种吡喃糖,主要由葡萄糖、木糖和核糖等组成,分子量为4.172×103 Da。灵芝液态发酵可以提高麸皮粗多糖的抗氧化活性,改变粗多糖的组成成分。本研究为灵芝发酵麸皮粗多糖天然抗氧化的开发提供参考。     

基于膜技术的灵芝粗多糖分级分离及抗氧化活性比较

本文主要研究膜分离技术对灵芝粗多糖分级分离效果及其抗氧化活性的影响.以灵芝子实体为原料,通过热水浸提后用100、10和1 kDa超滤膜多级组合对灵芝粗多糖进行分级分离,分别记为GLP100、GLP10和GLP1.比较3种不同孔径膜对灵芝粗多糖的分级效果、理化性质和抗氧化活性的差异.傅里叶红外变换光谱分析结果证明3种多糖...     

灵芝孢子多糖的提取工艺优化及单糖组成、抗氧化活性分析

为确定灵芝孢子多糖(GLSP)的最佳提取工艺,以料液比、提取时间、提取温度为因素,多糖提取得率为指标,在单因素试验的基础上,通过响应面法确定灵芝孢子多糖提取的最佳工艺为:提取温度81℃,料液比19:1,提取时间2 h,在该条件下灵芝孢子多糖提取得率为(1.507±0.028)％.以7种来源的灵芝孢子(GLS)为原料,通...     

3种不同产地灵芝子实体粗多糖体外抗氧化活性比较研究

采用2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基清除法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除法、羟基自由基清除法和铁氰化钾法4种方法,分别对3种不同产地（安徽金寨、吉林通化、吉林蛟河）灵芝子实体粗多糖的体外抗氧化活性进行评价。结果表明,3种灵芝子实体粗多糖均具有抗氧化能力。安徽金寨灵芝子实体粗多糖对ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力最强,其对应EC50值分别为1.50 mg/m L和2.09 mg/m L,同时也具有最强的总还原力;吉林通化灵芝子实体粗多糖对羟基自由基的清除能力最强,其EC50值是2.13 mg/m L;吉林蛟河灵芝子实体粗多糖的体外抗氧化活性均最低。因此,不同产地灵芝子实体粗多糖的抗氧化活性不同。      

一种新的灵芝孢子破壁工艺--过冷液氮淬冷破壁

本文利用一种新的灵芝孢子破壁方法-过冷液氮淬冷破壁法进行了灵芝孢子破壁实验，证明了该方法具有破壁效果较好、效率高、操作简便等特点；冻结解冻循环次数对灵芝孢子破壁率有显著影响，破壁率随冻结解冻循环次数增加呈先快后慢的上升趋势。     

灵芝孢子粉破壁工艺优化及其抗肿瘤作用

以灵芝孢子粉为原料,采用高压均质法破壁灵芝孢子,研究灵芝孢子粉破壁优化工艺及破壁孢子粉抗肿瘤作用。选取水为破壁溶剂,以均质压力、均质次数、料液比为试验因素,以灵芝孢子破壁率为试验指标,通过单因素试验及正交试验对灵芝孢子破壁工艺进行优化。通过建立S180荷瘤小鼠模型,对破壁灵芝孢子粉的抗肿瘤作用进行研究。结果表明,最佳破壁工艺条件为均质压力150 MPa、均质次数3、料液比1∶100（g/mL）,破壁率为94.35%。抗肿瘤实验表明,破壁灵芝孢子对小鼠S180肉瘤的抑制率为43.37%～57.59%,且肝体比和肺体比变化稳定,并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。因此,破壁灵芝孢子粉具有良好的抗肿瘤作用。     

Investigation of Ice‐Assisted Sonication on the Microstructure and Chemical Quality of Ganoderma lucidum Spores

Ganoderma lucidum spores (GLS) are well known for disease treatment and vitality enhancement, and have been shown to contain a variety of bioactive components, such as polysaccharides and triterpenes. However, the resilient bilayer sporoderm structure of GLS restricts the release of bioactive components and limits its complete pharmacological effects. The current study was aimed to improve the quality of GLS by means of a customized sonication technique, particularly, the effect of sonication processing parameters on GLS‐breaking efficiencies was investigated. Significant morphological changes, such as cracked, fractured, and disintegrated GLS were observed using scanning electron microscopy (SEM) after sonication treatment. The performance for breaking GLS sporoderm was obtained at ultrasonic power density of 23.7 W/cm², duty cycle 100%, and 90‐min processing time. Through the combination of sonication in an ice bath, sporoderm breaking efficiency can be further increased from 45% to almost 75%. FTIR analysis revealed an increase in bioactive components of polysaccharide, protein, and fatty acid from the sonication processed GLS when compared to ground spores available commercially. The current results indicated that the ice bath combined sonication method is more effective in delivering GLS ingredients and could be an economic technique for the production of high‐quality broken sporoderm GLS.     

灵芝孢子粉多糖的PMP-HPLC指纹分析

采用部分酸水解耦合PMP柱前衍生反相高效液相色谱法对15个不同灵芝(赤芝)孢子粉样品中多糖进行检测和指纹表征,研究建立灵芝孢子粉多糖的HPLC指纹图谱。标定了19个共有特征指纹峰,同一产地不同批次产品间的相似度均大于0.97,不同产地产品间的相似度大于0.8;赤芝孢子粉与其他不同部位及不同品种的灵芝类产品的多糖指纹图谱显示出较大的差异。这些相似性和差异可作为灵芝孢子粉产品质量监控、与其他不同部位和不同品种的灵芝类产品的区别鉴定以及灵芝孢子粉的真伪与掺假检测的主要依据之一。     

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。     

黑灵芝不同部位多糖成分分析及抗氧化活性

分别采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)和气相色谱法(GC)分析黑灵芝菌盖、菌柄和孢子粉多糖的分子质量分布和单糖组成,结果表明三者存在显著性差异。对三者的抗氧化活性进行考察,结果表明：菌盖多糖在清除羟自由基和总还原能力(FRAP)方面效果最佳;菌柄多糖在清除DPPH 自由基、羟自由基和抑制β- 胡萝卜素与亚油酸体系氧化方面效果显著;孢子粉多糖的体外抗氧化效果较差,但在金属离子螯合能力方面明显优于菌盖和菌柄多糖。     

挤压处理灵芝孢子粉提取灵芝多糖

以挤压喷爆为处理方法,孢子破壁率和灵芝多糖得率为研究对象,分析水分含量、螺杆转速、温度、进料速度对灵芝孢子的破壁率和灵芝多糖得率的影响。采用正交试验优化挤压工艺条件得出：水分含量15%、螺杆转速223r/min、温度125℃、进料速度155g/min,在此条件下灵芝孢子破壁率为78.6%,多糖得率为2.219%,通过在最佳条件下进行二次挤压,灵芝孢子破壁率提高为83.48%,多糖得率为2.37%。     

灵芝在牛蒡固体培养基中发酵工艺优化及菌丝多糖的体外抗氧化活性

为提升牛蒡废弃物的利用价值,以低品质牛蒡作为营养基质,精选优良灵芝菌种作为发酵菌株,研究牛蒡固体发酵灵芝产多糖工艺及其体外抗氧化活性。采用单因素试验和响应面优化法确定了装瓶量、粉碎程度、液固比等工艺条件;利用水提醇沉法提取牛蒡固体发酵灵芝菌丝中多糖,并用苯酚-硫酸法测定其总多糖含量;多糖经脱蛋白、透析和脱色后,经红外光谱分析多糖特征,高效液相色谱测定其单糖组成;体外实验检测多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力。结果表明：最佳发酵条件为液固比0.4 mL/g 、装瓶量0.2 g/mL、粉碎程度过6 目筛,在此条件下实际获得的多糖含量为24.85 mg/g;红外光谱分析表明所获得的菌丝多糖具有糖类物质的特征吸收峰;高效液相色谱检测其单糖组成为甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖等,其中甘露糖含量最高,是葡萄糖的7.6 倍;抗氧化性检测表明随着牛蒡固体发酵灵芝菌丝多糖质量浓度的增加,其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除能力逐渐增强,且清除率均大于70%,说明多糖具有较好的体外抗氧化活性。     

灵芝三萜皂苷(GCTL1)的体外抗氧化作用

采用化学模拟体系研究灵芝三萜皂苷(GCTL1)对超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH 自由基及过氧化氢自由基的清除能力,测定其还原力和铁螯合力,并与合成的抗氧化剂进行比较。结果表明,GCTL1 具有较好的抗氧化作用。GCTL1 清除超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH 自由基、过氧化氢自由基的IC50 分别为：(0.247 ±0.05)、(0.197 ± 0.002)、(0.09 ± 0.02)、(0.279 ± 0.04)mg/mL;还原力为0.5、铁螯合力为50% 时GCTL1 质量浓度分别为(0.425 ± 0.01)、(0.180 ± 0.04)mg/mL,并且在一定质量浓度范围内具有剂量依赖效应;GCTL1 的总体抗氧化能力高于VC 和2,6 二叔丁基对甲酚(BHT)。     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝的主要活性成分,近年来以其独特的保健功能成为研究的热点。灵芝多糖结构如分子量、单糖组成和糖苷键类型等,对其活性影响很大,本文列举了灵芝多糖结构通用的检测方法。已有实验证实,灵芝多糖的生物保健功能主要体现在降血糖、降血脂、抗肿瘤、提高免疫力和抗氧化方面,由于固态栽培灵芝有诸多因素的制约,液体发酵培养成为获取灵芝多糖的主要手段,而液态发酵条件的优化研究主要集中于种子的培养、碳源氮源的选择及微量微量元素的添加。传统提取灵芝多糖的方法如热水浸提法、碱提取法,有提取时间长、提取效率不高的缺点,而利用超声波辅助提取多糖受到人们的关注,并和传统提取方法做了比较,显示了这种方法的广阔应用前景。     

不同提取方法对灵芝多糖性质的影响研究

本研究比较了超声波法(UP)、超声波结合纤维素酶法(UCP)、超声波结合胰酶法(UPP)、传统热水提取法(TP)四种方法提取灵芝多糖的性质区别。结果表明采用超声波结合胰酶法提取多糖得率最高,可达4.93%,比传统水提法的多糖得率高1.58倍。相比传统水提法所得多糖的分子量,超声处理可显著降低多糖分子量,超声结合酶法提取对多糖的降解作用更加显著,其中胰酶效果最为明显,可将多糖分子量降至5 kDa以下。此外,采用超声波结合胰酶法提取的多糖也具有较好的抗氧化活性,其还原力在浓度1.0 mg/mL时为1.408,羟自由基清除能力在浓度2.0 mg/mL时为50.08%,ABTS+清除能力在浓度1.0 mg/mL时为82.5%,氧自由基吸收能力(ORAC)值可达2484.14μmolTrolox/g。