肺炎克雷伯菌耐药机制的研究进展

肺炎克雷伯菌是临床分离和医院获得性感染最常见的致病菌之一,其主要耐药机制包括产生抗菌药物灭活酶、抗菌药物渗透障碍(生物被膜和外膜孔蛋白缺失)、药物作用靶位的改变、主动外排泵系统的亢进作用、整合子等。肺炎克雷伯菌耐药机制的研究对于控制耐药菌的播散和合理使用抗生素都具有重要的意义。本文就上述耐药机制的研究进展进行综述。     

肺炎克雷伯菌铁载体对喹诺酮类抗生素耐药性的影响

为载体与喹诺酮类抗生素耐药性之间的关系,采用K-B纸片法及微孔稀释法确定细菌对抗生素的药物敏感性,使用CAS琼脂法和紫外可见分光光度法分别对肺炎克雷伯菌铁载体进行定性和定量检测,使用统计学软件SPSS分析细菌铁载体与其耐药性的关系。CAS琼脂法分析表明,临床分离的70株肺炎克雷伯菌均产铁载体(100%),紫外分光光度法分析表明肺炎克雷伯菌中铁载体产量不同。根据统计学取中位数的方法能够将细菌分为铁载体高产组和低产组两组,喹诺酮类耐药株中铁载体产量高于敏感株(P<0.01);铁载体高产组对环丙沙星(CIP)和左氧氟沙星(LEV)的耐药率高于低产组(P<0.01);肺炎克雷伯菌铁载体与细菌对喹诺酮类抗生素的耐药性呈正相关性(P<0.01)。研究表明细菌铁载体参与了细菌耐药,干预了抗生素的杀菌过程。     

克雷伯菌肺炎患儿外周血中Th17细胞及白细胞介素的变化

目的观察Th17细胞及白细胞介素-17(IL-17)、IL-21和IL-22在克雷伯菌肺炎(KP)患儿外周血中的变化,探讨其在克雷伯菌肺炎临床诊治中的意义。方法采用流式细胞术(FACS)检测36例KP患儿与32例健康儿童外周血Th17淋巴细胞亚群的表达情况。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-17、IL-21和IL-22的水平。结果 KP组外周血Th17细胞占CD4+T细胞8.15%±3.46%,显著高于健康组5.37%±4.12%(P<0.01)。KP组血清IL-17水平高于健康组(23.13±6.27 pg/mL比12.53±6.64 pg/mL,P<0.05);IL-21和IL-22表达水平与健康组相比差异无显著性(P>0.05)。结论儿童KP感染者外周血Th17细胞比例明显升高,并伴有IL-17水平的升高,提示Th17细胞及其产生的细胞因子IL-17在克雷伯菌肺炎免疫失调过程中起着重要作用。     

耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌的替加环素MIC药敏试验和临床特点分析

目的:应用微量肉汤稀释法(MIC)药敏试验测定耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对替加环素的耐药率,并分析耐药菌的临床特点。方法:搜集2014年11月-2016年4月本院微生物室从不同病区各种临床标本分离的耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌38株(CRKP),应用微量肉汤稀释法进行替加环素药敏试验,从患者年龄、性别、标本类型、原发病、抗生素使用情况等方面对比,分析临床特点与替加环素耐药的相关性。结果:在38株CRKP中筛选到6耐替加环素耐药菌,耐药率为15.8%。耐药性与患者年龄有关(P<0.05),与性别、标本类型、原发病、抗生素使用情况无关(P>0.05)。结论:耐替加环素的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌已经出现,耐药株多见于老年患者。     

环丙沙星体外诱导肺炎克雷伯菌耐药机制的研究

目的：探讨环丙沙星体外诱导敏感肺炎克雷伯菌（KPn）耐药的分子机制。方法对临床分离的敏感肺炎克雷伯菌体外使用环丙沙星,采用多步法诱导耐药,并随机选择10对临床分离敏感菌和诱导后高度耐药菌进行GyrA 基因 QRDR（喹诺酮抗性区,quinolone resistant-determining region）的聚合酶链式反应（PCR）扩增、SDS-PAGE 电泳鉴定外膜外排泵蛋白 TolC 及膜孔蛋白 porin 蛋白的表达。结果诱导后的 KPn 均成为耐药菌,其中高度耐药菌占73．81％。10株诱导的耐药菌中 Ser83突变率为30％;膜孔蛋白 porin 表达均减少,外排泵蛋白 TolC表达均增多。结论环丙沙星的使用与 KPn 耐药密切相关,并可引起 KPn 多种耐药分子产生。     

638株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析

目的:了解本院鲍曼不动杆菌的临床分布情况及耐药特点,为临床合理使用抗菌药物和有效控制感染提供参考依据。方法:收集2015年1月-2016年9月本院各科室的各类临床送检标本,分离鲍曼不动杆菌,进行细菌鉴定和药敏试验,分析其感染分布和耐药情况。结果:共检出鲍曼不动杆菌638株,其中以痰液检出最多,共560株(87.8%),其次为伤口分泌液35株(5.5%);鲍曼不动杆菌在ICU、急诊内科、呼吸内科检出率较高,分别占比30.9%、30.4%和11.1%。鲍曼不动杆菌对阿米卡星的耐药率最低(45.0%),其次为复方新诺明(69.2%),其余16种抗菌药物的耐药率均超过70%,多重耐药较为严重。结论:鲍曼不动杆菌主要引起呼吸道感染,对多种抗菌药物的耐药严重,临床医生要重视该菌,加强对该菌的监测,合理使用抗菌药物,以减少耐药菌株的产生。     

肺部感染肺泡灌洗液中非发酵菌分布及耐药性分析

目的：对肺部感染患者支气管肺泡灌洗液（BALF）培养,分析检出非发酵菌感染及其耐药情况,以指导临床合理使用抗菌药物。方法对2008年5月至2013年6月中国人民武装警察部队陕西省总队医院检验科从BALF中分离的非发酵菌的分布及耐药性进行回顾性分析。结果共检出93株非发酵菌,检出率居前4位的依次为铜绿假单胞菌（48/93,51．61％）、鲍曼不动杆菌（31/93,33．33％）、嗜麦芽寡养单胞菌（10/93,10．75％）、醋酸钙不动杆菌（2/93,2．15％）;非发酵菌对不同抗菌药物呈多重耐药性,碳青霉烯类、头孢哌酮/舒巴坦、多黏菌素对非发酵菌的作用较好。结论肺部感染支气管肺泡灌洗液中非发酵菌具有较高的检出率和耐药性,应加强临床肺泡灌洗液的细菌学检测,按照药敏试验结果合理用药。     

219株铜绿假单胞菌感染分布与耐药性分析

目的:了解铜绿假单胞菌的感染情况及其耐药性,为临床合理应用抗生素提供科学依据。方法:收集本院临床分离铜绿假单胞菌,分析其科室分布、标本来源及耐药情况。结果:铜绿假单胞菌主要分布于干诊三病房(53.9%),主要以痰液分离最多(91.3%);其耐药率分别为:复方新诺明(100%)、头孢噻肟(83.94%)、庆大霉素(53.42%)、头孢他啶(51.83%)、氨曲南(50.55%)、头孢西林(50.27%)、环丙沙星(48.62%)、左氧氟沙星(44.95%)、妥布霉素(43.38%)、头孢吡肟(42.66%)、阿米卡星(26.30%)、哌拉西林/他唑巴坦(22.57%)、美罗培南(16.90%)、亚胺培南(14.39%)。结论:铜绿假单胞菌的耐药机制复杂,应加强医院耐药菌株的监测,指导临床合理使用抗生素,采取有效的防范措施最大限度减少铜绿假单胞菌感染。     

867株血培养病原菌的分布及耐药性分析

目的:探讨该院2016年6月-2017年5月引起血液感染的常见病原菌的分布及对常见抗生素的耐药情况,为临床抗菌治疗提供科学依据。方法:用Bact/Alert 3D全自动血液培养仪对19 245份血液标本进行培养检测,阳性菌株转种后用VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定仪进行分离鉴定及药敏情况分析。结果:在19 245份血液培养标本中分离出病原菌867株,阳性检出率为4.51%,其中革兰阴性杆菌342株,占39.45%,革兰阳性球菌499株,占57.55%,真菌12株,占1.38%,厌氧菌14株,占1.62%;病原菌中,革兰阴性杆菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和甲型副伤寒沙门菌为主,革兰阳性球菌以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶株分别占55.98%、23.00%,且发现耐亚胺培南和美罗培南的肺炎克雷伯菌。葡萄球菌对呋喃妥因、利福平、利奈唑胺和万古霉素均高度敏感。结论:血液培养主要病原菌为革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌,分离的病原菌耐药情况严重,加强细菌耐药性的监测有助于合理使用抗菌药物。     

产色头孢菌素法检测淋病奈瑟菌β-内酰胺酶的临床应用评价

目的评价产色头孢菌素法检测淋病奈瑟菌β-内酰胺酶的临床应用效果。方法采用产色头孢菌素法常规检测淋病奈瑟菌临床分离株的β-内酰胺酶;同时采用纸片酸度定量法将保存的上述淋病奈瑟菌菌株进行β-内酰胺酶检测,与产色头孢菌素法检测结果不一致者采用PCR方法检测淋病奈瑟菌的β-内酰胺酶基因,以两种方法结果一致者为真结果,对产色头孢菌素法检测的结果进行评价。结果检测74株淋病奈瑟菌分离株,产色头孢菌素法阳性28株,阳性率37.8%;纸片酸度定量法阳性25株,阳性率33.8%;两种方法结果一致者69株,一致率93.2%,5株结果不一致菌株中,其中1株纸片酸度法阳性,产色头孢菌素法为阴性,但β-内酰胺酶基因阳性,4株产色头孢菌素法为阳性,纸片酸度法和β-内酰胺酶基因均为阴性,74株淋病奈瑟菌的β-内酰胺酶基因阳性25例,产色头孢菌素法敏感性96%,特异性91.8%。结论产色头孢菌素法操作简便,敏感性高,适合临床筛查淋病奈瑟菌的β-内酰胺酶。     

基于渗透式教育的高职学生工匠精神培育研究

我国高职院校工匠精神的培育存在培育行动力不足、缺乏教学融合度、培育方式刻板单一等诸多问题。渗透式教育作为一种方法体系,具备教育内容的广泛性和丰富性、教育形式的多样性和隐蔽性、教育过程的长期性和愉悦性等多种特点,能有效提升工匠精神培育的实效性。基于渗透式教育,对工匠精神培育提出了在课程教学中渗透、在环境氛围中渗透、在校企联合育人中渗透、在实践体悟中渗透四个路径设计,以多层次、多角度渗透高职学生的工匠精神。     

91株鲍曼不动杆菌临床分布特点及药敏结果分析

目的:了解鲍曼不动杆菌的感染情况及其耐药性,为临床合理应用抗生素提供科学依据。方法:收集本院临床分离的鲍曼不动杆菌91株,分析其科室分布、标本来源及耐药情况。结果:鲍曼不动杆菌主要分布在神经外科病房、干诊三病房和呼吸病房,均为26.4%,以痰液分离最多,为87.9%;哌来西林/他唑巴坦耐药率为32.8%、亚胺培南和美罗培南耐药率为34.0%。结论:鲍曼不动杆菌的耐药机制复杂,应加强医院耐药菌株的监测,指导临床合理使用抗生素,采取有效的防范措施最大限度减少鲍曼不动杆菌感染。     

190例脓胸患者病原菌分布及耐药性分析

目的 整理脓胸患者胸膜腔渗出液病原菌分布及药物耐药性状况的流行病学资料,以指导临床合理选用抗生素.方法 收集341例脓胸患者190份胸膜腔渗出液标本,对分离出的病原菌菌种鉴定和药物敏感试验结果进行分析.结果 190份标本中,共分离出40种、92株病原菌,多为条件致病菌,其中G-菌占45.65%、G＋菌占44.57%、真菌占9.78%、厌氧菌占5.43%,对常见抗生素敏感性低,病原菌呈多耐药性.结论 感染脓胸的主要致病菌菌种广泛,常见药物敏感性不高、呈多耐药,临床医生需根据药敏结果合理选用抗生素.     

肇庆市某院血流感染病原菌临床分布及耐药性分析

目的:了解2016-2018年肇庆市某院血培养病原菌临床分布及耐药性,为该地区血流感染的诊断和治疗提供实验室依据。方法:选取2016年1月-2018年12月血培养分离的654株病原菌及检测资料,采用生物梅里埃BacT/Alert 3D全自动血培养仪进行血培养,采用BIOFOSUN细菌鉴定药敏系统对病原菌进行菌种鉴定与药敏试验;采用WHONET 5.6对结果进行分析。结果:共分离654株病原菌,革兰阳性菌中检出率排名前三依次是表皮葡萄球菌57株(32.8%)、金黄色葡萄球菌42株(24.1%)和腐生葡萄球菌、化脓性链球菌、溶血葡萄球菌均为10株(5.7%);革兰阴性菌中检出率排名前三依次是大肠埃希菌123株(25.6%)、肺炎克雷伯菌102株(21.3%)、弗氏柠檬酸杆菌72株(15.0%);革兰阳性菌阳性率前三位的科室是新生儿科67株(38.5%)、呼吸科15株(8.6%)、心内科12株(6.9%)和内分泌科12株(6.9%);革兰阴性菌阳性率前三位科室是呼吸科62株(12.9%)、泌尿外科45株(9.4%)、内分泌科45株(9.4%)和肿瘤一区45株(9.4%);耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为52.4%,未发现耐万古霉素株;产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌检出率分别是50.4%和33.3%。结论:该院引起血流感染病原菌中,革兰阳性菌以表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主,革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、弗氏柠檬酸杆菌较为多见,产ESBLs菌株较为普遍;定期对血培养病原菌进行临床分布及耐药性分析,对血流感染的治疗和诊断十分重要。