不同蛋白酶酶解罗非鱼肉制备蛋白水解液的过程变化规律研究

本文选择五种蛋白酶(木瓜蛋白酶、Alcalase2.4 L、Protamex、Neutrase 1.5MG和Flavourzyme 500MG)对酶解罗非鱼肉制备蛋白水解液的过程变化规律研究.以Cn、Cp值和蛋白质利用率为指标对酶解过程进行分析,说明不同的酶解工艺参数对酶解过程及产物影响较大,其中Flavourzyme 500MG生成游离氨基酸态氮含量最高(12 h后达到4.25 mg/mL);木瓜蛋白酶生成短肽含量最高(5 h后达到39.82 mg/mL);Protamex的蛋白质利用率最高(12 h后达到44.74%).以高含量游离氨基酸的水解液为目的可选用Flavourzyme 500MG、Protamex;以高含量功能性短肽的水解液为目的可选用木瓜蛋白酶、Alcalase 2.4 L.     

采用控制酶解法从罗非鱼肉中制备血管紧张素转化酶抑制肽

实验以罗非鱼肉为材料,利用Trypsin、Alcalase2.4L、Protamex、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、Flavourzyme和Kojizyme酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽(ACEIP)。以ACE抑制率(Ⅰ值)、氨基酸态氮含量(Cn值)和TCA可溶性蛋白(短肽)含量(Cp值)为指标对酶解过程进行分析,说明了酶法水解以及不同酶水解生成产物的特点,指出控制酶解的方法,其中Trypsin、Alcalase2.4L、Protamex对罗非肉控制酶解制备ACEIP的效果较好,酶解产物(稀释20倍)的最大Ⅰ值分别为酶解1hⅠ值91.2%、酶解3hⅠ值90.9%,酶解产物对ACE的抑制率比较高。     

外源酶分步水解鲫鱼工艺条件优化

以鲫鱼整鱼为原料,以蛋白质的水解度为主要指标,在单一酶酶解效果的基础上,采用复合蛋白酶(Protamex)和风味蛋白酶(Flavourzyme)进行分步酶解,并对酶解的工艺条件进行正交优化。结果表明:采用Protamex和Flavourzyme对鲫鱼整鱼进行酶解,最佳酶解条件为:在50℃,pH 7.0下,Protamex加酶量5‰,酶解240 min后,再加入6‰的Flavourzyme,酶解300 min,此时水解度为24.3%,呈味核苷酸二钠(I+G)含量为0.1326%。     

组合酶对复合骨素酶解液呈味物质的影响

为探究组合酶对牛骨素和鸡骨素的复合骨素酶解液呈味物质的影响,选取四种组合酶(木瓜蛋白酶+风味蛋白酶、菠萝蛋白酶+风味蛋白酶、碱性蛋白酶+风味蛋白酶、复合蛋白酶+风味蛋白酶)制备复合骨素酶解液,测定四种复合骨素酶解液的水解度、游离氨基酸、呈味核苷酸、味精当量(Equivalent umami concentration,EUC)、肽分子量分布等呈味物质指标,并进行对比分析。结果表明:碱性蛋白酶+风味蛋白酶(Alkaline proteinase+Flavourzyme,A+F)和复合蛋白酶+风味蛋白酶(Protamex+Flavourzyme,P+F)酶解液的水解度最大,分别为10.67%和11.27%;对呈味游离氨基酸组成分析发现,A+F酶解液鲜味氨基酸、苦味氨基酸、无味氨基酸含量最高,A+F和P+F酶解液总游离氨基酸含量最高;四种酶解液中肌苷酸较另两种核苷酸含量高,A+F酶解液总核苷酸含量最高;比较四种酶解液味精当量,A+F酶解液EUC值最大;A+F和P+F酶解液中分子量<1000 Da肽段含量最高,制备复合骨素酶解液的呈味效果更好;主成分分析表明A+F组合酶综合得分最高,A+F组合酶为美拉德反应提供丰富反应底物。     

虾头酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽的研究

实验以虾头为材料,利用Trypsin、Alcalase 2.4L、Protamex、Flavourzyme、Kojizyme、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、与虾头蛋白酶复合酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽.以ACE抑制率(I值)、氨基酸态氮含量(Cn值)、和TCA可溶性蛋白(短肽)含量(Cp值)为指标对酶解过程进行分析,说明了酶法水解以及不同酶水解生成产物的特点;在此基础上选择控制酶解的方法以达到较高的产量,其中Protamex与虾头蛋白酶复合后效果最好,酶解3h,最大I值达到83.6%(稀释20倍),Cp值于酶解2h达到最大值为6.35mg/mL.     

酶法水解罗非鱼肉条件优化的研究

选择木瓜蛋白酶、Alcalase2．4L、Protamex、Neutrase1．5MG和Flavourzyme酶解罗非鱼肉,分析了不同酶、酶解时间、固液比、加酶量E／S和pH值对酶解的影响,以游离氨基酸态氮含量（Cn）、蛋白质利用率和氨基酸生成率为指标对酶解过程进行分析,综合实验结果和生产成本,确定了最佳的工艺条件为：选用Flavourzyme酶在温度为50℃、pH值为7．0、固液比1：1、加酶量为500U／g、水解时间7h,此时Cn值为0．277g／100mL、蛋白质利用率为30．12％、氨基酸生成率为31．45％。     

高底物浓度玉米蛋白的双酶复合水解效果研究

利用碱性蛋白酶(Alcalase)、风味蛋白酶(Flavourzyme)和复合蛋白酶(Protamex)对高底物浓度(135g/L)玉米蛋白进行双酶复合水解,研究复合水解对水解物的水解度、可溶性蛋白质含量和抗氧化活性的影响,并对双酶酶解效果较好的酶解液进行了分子量分布测定。结果表明,Flavourzyme和Alcalase、Flavourzyme和Protamex、Protamex和Alcalase顺次水解玉米黄粉,总水解度分别为27.11%、26.95%和19.76%,可溶性蛋白质含量分别为50.33、40.32、48.85mg/ml,抗氧化活性分别为634.35、576.79和593.21 U/ml。多肽分子量主要分布在5 801.170～238.962u,与单酶水解相比均有显著提高。     

鲤鱼蛋白控制酶解及其酶解产物抗氧化研究

以鲤鱼为原料,利用枯草杆菌蛋白酶对鲤鱼蛋白进行控制酶解,制取富含多肽的酶解液,并对其抗氧化性进行研究。以水解度、多肽含量、氨基酸含量、抗氧化性为指标,对自由基清除率评价其抗氧化性。通过单因素试验,研究酶解温度、pH值、酶用量、酶解时间、料液比等因素对酶解过程的影响,并进行三元二次回归设计,对最佳的酶解工艺条件进行优化。结果表明：以枯草杆菌蛋白酶对鲤鱼蛋白进行酶解,最佳工艺参数为酶解温度62℃、酶用量100U/g、料液比1:2(g/mL)、pH7.0、酶解4h。此条件下,酶解液多肽含量为0.704mg/mL,对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率分别为73.41%和59.78%,酶解液有很好的抗氧化性。     

双酶水解鸡骨泥的工艺优化

对鸡骨泥进行酶水解,经筛选确定中性蛋白酶和Flavourzyme复合风味酶的组合能有效酶解鸡骨泥。经正交试验分析,确定酶解的最佳工艺为:酶解温度50℃、pH值8.5、中性蛋白酶和Flavourzyme复合风味酶的添加量分别为0.75%和1.50%、底物浓度5%、水解时间2.5h。在该条件下酶解效率最高,水解度和氮收率分别为37.11%和92.50%,酶解产物澄清无苦味及腥味,且游离氨基酸含量显著增加。     

酶解鸡骨架制备热反应底物的研究

鸡骨中含有丰富的营养物质,对鸡骨进行深加工,能有效提高蛋白质的综合利用率。作者通过比较采用Flavourzyme与Protamex以2∶1复配对鸡骨进行水解。以水解度(DH)为特征指标,对酶解鸡骨架的工艺进行优化,结果表明,最佳的工艺参数为:温度55℃,pH 6.5,时间5 h,酶用量为质量分数0.8%,料液质量比为1 g∶2 mL,在此条件下水解度为23.69%。所得酶解液用于对不同水解度的蛋白质酶解液对美拉德反应的影响进行分析。     

美拉德反应基液——鳊鱼蛋白酶解液的制备

研究以鳊鱼蛋白为原料,经过酶解反应,以期获得风味良好的美拉德反应基液。通过风味蛋白酶与其它蛋白酶复配筛选组合,综合考察影响酶解反应的4个因素:温度、时间、pH和酶添加量,以水解度(DH)为响应值,采用Box-Benhnken响应面分析法确定最佳反应条件。研究结果表明,以风味蛋白酶和复合蛋白酶(3:1)复配的组合水解度最高,酶解反应条件为:温度51.5℃,时间5.7h,pH7.7,酶添加量0.80%,水解度可达79.46%。在该条件下制得的酶解液腥味弱,苦味值低,有淡淡的鱼香味,可以作为美拉德反应的基液。     

Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味酶酶解大豆分离蛋白及脱苦工艺优化

以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解及脱苦工艺研究。以水解度和苦味分值为考察值,对酶解工艺进行优化,确定最佳条件。结果表明:Alcalase2.4L碱性内切酶最佳酶解条件为加酶量14 000 U/g、酶解温度60℃、酶解pH8.5、底物质量分数5%,酶解时间2h,最终水解度为45.34%,此时水解液苦味值为4。Flavourzyme风味蛋白酶对水解液进行二次水解的最优酶解条件为加酶量300 U/g、酶解温度55℃、酶解pH 7.0、酶解时间3 h,此条件下大豆分离蛋白水解液苦味值最低为1.2。Alcalase2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶水解大豆分离蛋白使水解度得到较大提高的同时也解决了水解液的苦味问题。     

罗非鱼肉的酶法水解控制和复合研究

利用Flavourzyme、Protamex、Alcalase2 4L、Trypsin、Kojizyme、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和虾头蛋白酶对罗非鱼肉进行水解 ,以游离氨基酸态氮含量、TCA可溶性蛋白 (短肽 )含量和水解度为指标对酶解过程进行分析 ,研究了酶法水解的控制条件以及不同酶水解生成产物的特点 ,在此基础上选择控制酶解的方法以得到较高的TCA可溶性蛋白 (短肽 )含量 ,并进行了复合酶解的比较研究。     

Characterization of hydrolysates produced by mild-acid treatment and enzymatic hydrolysis of defatted soybean flour

Acid (0.05–0.2 N HCl) pre-treatments and subsequent enzymatic hydrolysis (Alcalase™ and Flavourzyme™) of defatted soybean flour (DSF) were performed under aseptic conditions. The acid pre-treatment facilitated enzymatic hydrolysis of the protein in DSF by increasing the nitrogen solubility index. Protein was hydrolyzed primarily during the first 5 h of enzymatic hydrolysis. The degree of hydrolysis and α-amino nitrogen contents of the hydrolysates increased after acid pretreatment. The average peptide chain lengths were estimated at 7∼8 amino acid units after 3 h hydrolyzation by Alcalase, and 3–5 amino acid units after 21 h by Flavourzyme/Alcalase mixture. Gel permeation chromatography provided molecular size distribution to determine the molecular weights of the corresponding hydrolysates. At the end of 24 h enzymatic hydrolysis, the amounts of free amino acid, dipeptide and tripeptide accounted for almost half of the proteins in the hydrolysate, while the oligopeptides constituted 40%.     

双酶法酶解猪瘦肉蛋白工艺优化研究

为制备腊味香精提供更丰富的前体物,以猪瘦肉为原料,水解度为指标,选用Alcalase和Flavourzyme为试验用酶,通正交试验优化双酶法水解猪瘦肉蛋白最佳工艺条件。结果表明:Alcalase和Flavourzyme水解瘦肉蛋白其最佳条件为,pH 9时,用1 000U/g Alcalase于60℃下水解6h,再用2 500U/g Flavourzyme于50℃、pH 4.5继续水解4h。此时,水解度达到34.82%,比Alcalase和Flavourzyme单酶水解度分别提高34.12%和27.48%,且酶解产物还含有丰富的制备腊味香精的前提物。     

花椒籽仁抗氧化肽水解用酶的筛选研究

采用Protamex、Alcalase2.4L、Flavourzyme500MG、Neutrase0.5L、木瓜蛋白酶5种酶制剂水解花椒籽仁蛋白制备抗氧化肽,以水解度(DH)、多肽含量和水解产物的总抗氧化能力(TAC)、DPPH自由基清除能力、在亚油酸体系中的抗氧化性为指标对水解过程进行了分析,结果表明,Alcalase2.4L蛋白酶是制备花椒籽仁抗氧化肽的最适水解酶,其水解物的水解度(DH)为20.42%,多肽含量为21.83mg/mL,总抗氧化能力(TAC)和DPPH自由基清除能力分别为0.44mmol/L、65.47%,此外在亚油酸体系中具有一定的抗氧化性。     

中国对虾调味料风味前体物质酶解制备工艺研究

以中国对虾下脚料为原料,利用酶解技术获得中国对虾调味料风味前体物质——酶解液,并通过响应面分析方法优化酶解工艺。研究结果表明,最佳酶解工艺条件为料水比1/9,酶解时间3h,酶用量2.4%,酶解温度68℃,初始pH6.5。在此条件下,中国对虾下脚料水解度为16.58%。水解液中氨基酸含量为23.2028mg/mL,其中必需氨基酸含量为10.5312mg/mL。所得酶解液具有诱人、浓郁的虾风味,可以作为调味基料。     

Evaluation of Functional Properties in Protein Hydrolysates from Bluewing Searobin (Prionotus punctatus) Obtained with Different Microbial Enzymes

Enzymatic hydrolysis of proteins from low commercial value fish could be produced for uses like functional ingredients in a wide and always increasing zone of application in different food products. The objective of this work was to evaluate the functional properties and the amino acid profile of enzymatic hydrolysates from Bluewing searobin (Prionotus punctatus), using two microbial enzymes, Alcalase and Flavourzyme. The enzymatic hydrolysate obtained through the addition of the enzyme Alcalase reached the maximum solubility (42%) at pH 9, water holding capacity (WHC) of 2.4 g_water  g_protein ⁻¹, 4.5 g_oil g_protein ⁻¹ of oil holding capacity (OHC) and an emulsifying activity index (EAI) of 54 m² g_solids ⁻¹ at pH 3. On the other hand, the hydrolysate obtained from Flavourzyme attained 38% of solubility at pH 9, 3.7 g_water  g_protein ⁻¹ and 5.5 g_oil g_protein ⁻¹ for the holding capacities, and an EAI of 71 m² g_solids ⁻¹ at pH 11. The hydrolysate with Flavourzyme produced best results for WHC, OHC, and EAI because it had solubility lower than the hydrolysate of Alcalase. The hydrolysate produced by Alcalase had a higher amino acid content compared with Flavourzyme’s hydrolysate. However, both showed a good essential amino acid amounts. In general, these results indicate the potential utilization of the hydrolysate from Bluewing searobin in food formulations for the direct human consumption.