产壳聚糖酶菌株的筛选及其发酵产酶条件的研究

从采集的土样中分离得到一株产壳聚糖酶的菌株,对该菌株发酵产酶条件进行了初步研究.确定其最适的产酶培养基为(%):壳聚糖1.0,葡萄糖0.1,酵母提取物0.5,(NH4)2SO4 1.0,K2HPO4 0.07,KH2PO4 0.03,NaCl 0.5,MgSO4·7H2O 0.05,起始pH值6.0;最适产酶培养条件为:装液量为70 mL/250 mL,接种量3%,30℃、150 r·min-1培养72 h.在最适产酶条件下,该菌株发酵液中壳聚糖酶活力最高达到1.96 U·mL-1.     

土壤中产壳聚糖酶霉菌的筛选及产酶条件优化

为筛选壳聚糖酶的高产菌株,利用壳聚糖水解圈作为筛选模型,从沈阳化工学院附近农田土壤中筛选得到了产壳聚糖酶能力较高的霉菌M19。对其产酶条件进行优化,最终得到培养基中最佳碳源为1．0％壳聚糖胶体,最佳氮源为1．0％（NH4）2SO4加1．0％蛋白胨,最适初始pH为6．0,最适溶氧量为50mL摇瓶装20mL培养基,最适接种量为7．5％,且发酵72h时该菌产酶能力最强。该方法简便、直观,很适合大量、快速筛选。     

响应面法优化壳聚糖酶产生菌Mitsuaria sp.K1的产酶发酵条件

壳聚糖（chitosan）及其降解产物因具有优良的物理特性和生物活性而被广泛关注。通过平板透明圈初筛、摇瓶复筛方法,从青岛海岸土壤中分离筛选到1株产壳聚糖酶活性较高的细菌Mitsuaria sp.K1,并对其产酶发酵条件进行了单因素试验和响应面优化分析试验。结果表明：在最适培养基组成（1%粉末壳聚糖、0.5%硝酸钾、0.22%KH2PO4、0.1%Na2HPO4、0.15%KCl、0.05%MgSO4?7H2O）和最佳培养条件（培养温度25.2 ℃,培养时间25.4 h,起始pH值6.5,接种量3%,装液量100 mL/500 mL摇瓶,160 r/min）下,Mitsuaria sp.K1的发酵粗酶液最高酶活平均达11.56 U/mL,比优化前的2.17 U/mL提高了4.32倍。与前人研究结果相比,该菌发酵产酶温度降低了5～10 ℃,产酶周期缩短了23～47 h,因此具有工业发酵应用价值。     

壳聚糖酶解的随机进攻动力学模型

在假设里氏林霉ATCC56764产生的壳聚糖酶水解壳聚糖是以唯一内切方式随机进攻β-1,4糖苷键的基础上,结合终产物非竞争性抑制的M-M动力学,建立了壳聚糖降解的数学模型,并用四阶Runge-Kutta方法结合Powell优化方法对模型中各个动力学参数进行了优化。模型计算结果与实验数据的比较表明,建立的数学模型能够合理地描述和解释壳聚糖降解的动力学过程,有助于加深对壳聚糖酶法降解机理的认识,对生产特定聚合度的壳聚糖具有指导意义。     

12壳聚糖酶的研究进展

壳聚糖酶是最近发现催化壳聚寡糖降解的专一性酶,壳聚糖经其降解后生成低分子量壳聚寡糖,并且在医药领域中有着广泛的应用前景。本文概述了壳聚糖酶的研究概况,主要是壳聚糖酶的发现、分类、分布、理化性质及其应用进行了综述。     

蜡样芽胞杆菌壳聚糖酶活力优化研究

为了提高蜡样芽胞杆菌壳聚糖酶活性,对菌株的培养条件进行优化。实验证明在最适温度48℃,最适p H 5. 8,底物浓度1%的条件下,该菌株产酶活力可达6. 034 U/m L。同时证实Mn~(2+)对壳聚糖酶活力具有明显的促进作用,Al~(3+)和Cu~(2+)两种离子对酶活具有抑制作用,利用SDS-PAGE电泳测得该酶相对分子量约44 k Da。结果表明壳聚糖酶具有良好的生物活性,具有进一步工业化的潜力。     

卷枝毛霉发酵产壳聚糖酶的条件优化

以壳聚糖为诱导物,诱导卷枝毛霉产生壳聚1糖酶,并对产酶备件进行了优化。通过单因素实验确定最佳产酶条件为：壳聚糖浓度0．8g·L-1、培养温度40℃、培养基pH值5．5、培养时间84h、摇床转速180r·min-1。     

壳寡糖制备方法研究进展

水产品加工行业副产的大量虾蟹壳不能得到充分高值利用,造成资源浪费、环境污染。壳寡糖作为虾蟹壳的高值衍生物,具有高的生理活性,广阔的应用空间。壳聚糖降解是由虾蟹壳制备壳寡糖的关键环节。开发环保的、经济的、易于工业化的壳聚糖降解技术是突破壳寡糖制备瓶颈的主要方向。壳聚糖降解的基础研究是开发壳寡糖新生产方法的根本。     

降解制备壳寡糖研究进展

壳寡糖因具有多种生物活性,成为国内外研究的热点,其制备技术是壳聚糖产业研究开发的重点领域。壳寡糖的制备方法主要有化学法、酶解法和综合法。本文对壳寡糖的制备方法及其作用机理进行了综述。     

曲霉产壳聚糖酶的水解作用模式

从曲霉CJ22-326发酵培养液中分离纯化得到2种壳聚糖酶组分(ChiB, ChiA),通过测定酶解液体系粘度和对酶解产物进行TLC和HPLC分析,对其水解模式的研究结果表明,酶ChiB是一种内切壳聚糖酶,以随机进攻方式作用于壳聚糖分子链内部,从而使体系粘度快速下降. 以低聚糖为底物的水解产物分析表明,它作用于GlcN?GlcN糖苷键,不能作用于GlcNAc?GlcNAc糖苷键,不水解壳四糖及以下聚合度的甲壳低聚糖,壳五糖被水解成壳二糖和壳三糖,壳六糖主要被水解成壳三糖. 酶ChiA是一种外切氨基葡萄糖苷酶,主要从壳聚糖分子或甲壳低聚糖分子一端依次切下氨基葡萄糖残基,它只作用于GlcN?GlcN和GlcN?GlcNAc糖苷键.     

日本血吸虫核酸疫苗质粒适宜宿主菌的筛选及其发酵条件的优化

目的筛选二价日本血吸虫核酸疫苗质粒的适宜宿主菌,并对其发酵条件进行优化。方法通过综合考察细胞干重、质粒DNA产量及工程菌传代的质粒稳定性等参数,确定适宜宿主菌及其相适应的发酵培养基碳源、氮源和磷酸盐类型;进一步通过中心组合设计响应面试验,优化发酵培养基,并对优化的发酵培养基进行实验验证。结果确定适宜宿主菌为E.coliDH5α,优化的发酵培养基(m/v)为:NaCl1.0%,Yeast Extract1.0%,磷酸盐0.3%[其中m(K2HPO4)∶m(KH2PO4)=1∶4],甘油1.68%,牛肉汁2.28%,豆饼汁4.21%。在此发酵条件下,菌体干重由原来的1.57mg/ml增长至5.68mg/ml,质粒DNA产量由原来的3.94μg/ml增长至36.52μg/ml。结论已筛选出日本血吸虫核酸疫苗质粒适宜宿主菌,并优化了其发酵条件,明显提高了质粒DNA产量,具有大规模发酵生产应用价值。     

发酵法生产γ-亚麻酸培养条件的优化研究

试验考察了γ－亚麻酸发酵过程中碳源、氮源以及培养时间对生物量，油脂含量，γ－亚麻酸含量的影响，对发酵条件进行了优化，确定了发酵培养基组成为淀粉15％，（NH4）2SO4 0．5％，MgSO4.7H2O0.02%,KH2PO40.1,CaCO30.1%,α淀粉酶0．2％，PH6．8，发酵时间为96h。     

鼠李糖脂产生菌的筛选及其发酵条件的优化

采用富集培养,蓝色凝胶平板法,排油圈法分离筛选到1株产生物表面活性剂的菌株铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）LJ-3,并通过单因素试验和L9（43）正交试验对该菌株产表面活性剂的影响因素和发酵条件进行了优化,结果表明：菌株LJ-3产鼠李糖脂的条件为：餐厨废弃油脂50 g/L,硝酸钠3.0 g/L,磷酸二氢钾0.437 550 g/L,磷酸氢二钾0.562 550 g/L,硫酸镁1.550 g/L,硫酸锰0.06 g/L,硫酸亚铁0.025 0 g/L,酵母膏15 g/L,接种量75 mL/L,pH值为7,于37℃,150 r/min条件下,恒温振荡培养72 h,通过排油圈法测得的直径为6.8 cm,表面张力降低到29 mN/m。     

聚丙烯排产牌号的筛选与优化

近几年,随着神华宁煤集团等企业在煤制烯烃领域快速发展,国内聚烯烃来源也日趋多元化。同时,由于煤制烯烃企业推向市场的多为通用拉丝料,聚丙烯同质化竞争日趋激烈。神华宁煤集团通过新牌号开发丰富了产品种类,在煤制烯烃领域起到了示范引领作用。文章就以神华宁煤集团在新牌号筛选、牌号切换优化方面进行论述。     

Fuzzy Optimization of Extractive Fermentation Processes Including Cell Recycle for Lactic Acid Production

In this study, a bioprocess optimization problem was considered for a multiple‐stage extractive fermentation, including cell recycling, to produce lactic acid. The aim of the optimization problem is to obtain the maximum overall productivity, conversion and yield simultaneously, so that the optimization problem is formulated as a multi‐objective optimization procedure. The fuzzy goal attainment method was introduced to the multi‐objective optimization problem in order to obtain a trade‐off solution. The approach was also employed to determine the optimal design for two simplified continuous fermentation processes. From the computational results, the overall productivity for the fermentation processes including cell recycling, enabled a higher dilution rate so that the overall productivity was ca. thirteen‐fold higher than that of the continuous fermentation process without cell recycling.     

以葡萄糖和木糖为双底物生物合成乙偶姻的条件优化

以木糖为唯一碳源筛选了10株乙偶姻生产菌株,对乙偶姻产量最高茵株进行16SrDNA鉴定,测序结果表明该菌株为多粘芽孢杆菌。命名为LY107。经单因素实验优化培养条件为：培养温度37℃、pH值7．0、装液量15mL／250mL、接种量5％（体积比）。采用葡萄糖一木糖（2：1,质量比,下同）为碳源模拟木质纤维素水解液发酵生产乙偶姻,经Plackett-Burman（PB）实验和RSM优化培养基组分（g·L^-1）为：葡萄糖一木糖（211）60、蛋白胨5、酵母粉16．5、硫酸锰0．05、硫酸亚铁0．005、磷酸二氢钾0．1、乙酸钠2．47。在优化培养条件和培养基组分下,乙偶姻最高产量达23．9g·L^-1,葡萄糖一木糖转化率为79．9％。     

重组人aFGF工程菌发酵条件的优化

目的优化重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)工程菌的发酵条件。方法采用分批补料方式,在菌体快速生长阶段,通过变速流加碳源和氮源,控制流加比例,调节pH值和溶解氧(DO)含量,实现工程菌的高密度发酵及目的蛋白的高效表达。结果当碳源与氮源流加比例为3:1时,菌体湿重可达145g/L,干重达36g/L,目的蛋白表达量达28.9%;DO控制在20%时,全菌体和裂解液中目的蛋白的表达量均最高,分别可达29.11%和44.28%。结论已初步优化了rhaFGF工程菌的发酵条件。     

蛋白酶产生菌的筛选及发酵条件的优化

筛选了植物蛋白加工用蛋白酶产生菌,为酶的分子改造和植物蛋白加工提供材料基础。通过不同菌株筛选,获得了一株蛋白酶的高产菌株枯草芽孢杆菌X12。经过单因子实验,确立了产酶的最适培养基配方:蔗糖7.5 g/L,黄豆粉6.0 g/L,MnSO40.04 g/L,初始pH=7.0,装液量75 mL/250 mL。结论:按照所优化的产酶条件于37℃,180 r/min,经60 h培养,发酵液最终酶活达1 868.4 u/mL。     

重组人角质化细胞生长因子-2发酵条件的优化及其活性

目的优化重组人角质化细胞生长因子-2(Recombinant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)基因工程菌的发酵条件,并对rhKGF-2进行纯化及活性检测。方法优化rhKGF-2基因工程菌接种量、装液量、培养基初始pH值、IPTG浓度、诱导时机和诱导时间等发酵条件;rhKGF-2经离子交换层析和肝素亲和层析后,采用MTT法检测其对NIH-3T3细胞增殖的影响。结果 rhKGF-2基因工程菌的最佳发酵条件为:接种量2.0%,装液量50ml/250ml三角瓶,培养基初始pH值6.5～7.0,IPTG浓度0.10mmol/L,菌体处于对数生长初期时(A600=0.8～1.0)开始诱导,诱导时间4h;纯化的rhKGF-2经HPLC检测纯度达95.0%以上;在1～100μg/ml浓度范围内,rhKGF-2对NIH-3T3细胞的增殖具有促进作用。结论优化了rhKGF-2基因工程菌的发酵条件,获得了纯度较高、具有活性的rhKGF-2蛋白,为其工业化生产奠定了基础。