防治蔬菜灰霉病解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及抑菌特性

[目的]为研制防治蔬菜灰霉病的新型生物农药,进行高效生防菌的分离筛选及抑菌特性研究。[方法]通过形态学、生理生化和16S rDNA序列分析,对拮抗菌进行鉴定;采用平板扩散法测定发酵液的抑菌特性。[结果]分离筛选出1株对黄瓜灰霉病具有高效拮抗作用解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);该菌株在生长对数期产生抗菌物质,并在30-38 h达到最大值;产生的抗菌物质有很好的热、酸碱稳定性,紫外线照射不敏感,常温储存6个月活性保持在80%以上;抗菌谱测定表明其对黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、番茄叶霉病菌(Fulvia fulva)、黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)等多种病原菌具有显著抑菌效果。[结论]该菌株所产抗菌物质性能稳定,抗菌谱宽,抑菌力强,具有开发成新型广谱生物农药的潜力。     

生防菌株NJ13对人参灰霉病室内毒力及田间防治效果

[目的]明确生防菌株NJ13对人参灰霉病的室内毒力及田间防治效果。[方法]采用菌丝生长速率法测定生防菌株NJ13对人参灰霉病菌的抑制效果,茎叶喷雾法进行了人参灰霉病的田间药效试验。[结果]室内毒力测定结果表明,NJ13菌株发酵液抑菌效果最好,其抑菌率最高达到91.95%,EC50值为0.0054cfu/mL。显微观察发现NJ13菌株能够抑制灰霉病菌菌丝生长,导致菌丝溶解和生长畸形。田间试验结果表明含有1.0×10~8～2.0×10~8cfu/mL的NJ13菌株发酵液防治效果达69%以上,最高达73.86%。[结论]生防菌株NJ13具有防治人参灰霉病的应用前景。     

一株海洋专性放线菌的分类鉴定及其抑菌活性

[目的]对一株海洋专性放线菌进行菌种鉴定,并考察其抑菌物质的性质。[方法]通过形态特征、生理生化特性以及16S rRNA基因序列分析,对专性海洋放线菌CMZ023进行鉴定;采用管碟法测定抑菌谱;测定菌株CMZ023抑菌物质的性质。[结果]鉴定菌株CMZ023为Salinispora arenicola,该菌对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、啤酒酵母以及多种植物病原真菌均有拮抗作用。其抑菌物质粗提液耐酸碱、耐高温,紫外照射不影响抑菌活性。[结论]该菌株具有开发成新型广谱生物农药的潜力。     

黄瓜枯萎病拮抗内生菌BPT-18的鉴定及抗菌物质性质

[目的]为有效防治黄瓜枯萎病,进行了菌种鉴定及其抗菌物质性质的试验。[方法]通过形态特征、生理生化特性以及16S rDNA序列的进化树分析,对拮抗内生细菌BPT-18进行鉴定;采用平板对峙法测定抑菌谱;采用平板扩散法测定经60%硫酸铵沉淀所得粗提液的性质。[结果]鉴定菌株BPT-18为短小芽孢杆菌,该菌对多种植物病原真菌均有拮抗作用。其抗菌物质粗提液耐高温,对酸碱稳定,对胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K均不敏感,对氯仿敏感,并能有效抑制枯萎病菌孢子萌发。[结论]该抗菌物质可能是一种抗菌多肽,为黄瓜枯萎病的防治提供新的生防资源。     

Bacillus methylotrophicus菌株产抗菌蛋白性质及对人参锈腐病菌抑菌作用

[目的]菌株Bacillus methylotrophicus是一株对人参锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)有较强拮抗作用的细菌,为了有效防治人参锈腐病,进行了其产生抗菌蛋白的性质研究和抑菌效果试验。[方法]通过混菌法研究抗菌蛋白对紫外、热、酸碱、有机溶剂和蛋白酶的稳定性;采用生长速率法测定抗菌蛋白对锈腐病菌菌丝生长的抑制作用;平板对峙法测定其对锈腐病菌菌丝形态的影响;液培法测定其对锈腐病菌孢子萌发的抑制影响。[结果]抗菌蛋白具有很好的抗紫外线、耐热、耐酸碱和耐蛋白酶的稳定性,当质量浓度大于62.5 mg/L时,对人参锈腐病菌菌丝生长抑制率超过63.8%;显微镜观察其对菌丝生长有强烈的抑制作用,可以导致菌丝生长过程中分支增多、断裂和菌丝空洞,500 mg/L的抗菌蛋白对锈腐病菌孢子萌发的抑制率可达到100%。[结论]为人参锈腐病的防治提供新的生物防治资源。     

河南省番茄灰霉病菌对嘧霉胺的抗药性检测

[目的]明确河南省番茄灰霉病菌对苯胺基嘧啶类杀菌剂嘧霉胺的抗药性状况。[方法]采用菌丝生长速率法测定从河南省不同保护地中采集、分离的101株番茄灰霉病菌对嘧霉胺的敏感性。[结果]高抗菌株8株(7.92%),中抗菌株52株(51.49%),低抗菌株22株(21.78%),敏感菌株19株(18.81%)。[结论]河南省番茄灰霉病菌已对嘧霉胺产生不同水平的抗药性,各地应合理更换或轮换使用与嘧霉胺无交互抗性的药剂,以确保番茄灰霉病的有效控制。     

稻曲病生防菌的筛选与鉴定

[目的]为获得优良、高效的稻曲病生防菌株。[方法]通过对峙培养法、菌丝生长速率法和孢子萌发法,综合筛选对稻曲病菌具有拮抗作用的生防菌株,根据形态特征、生理生化特性和16S r DNA序列进行种类鉴定。[结果]筛选出2株抑菌活性较高的生防菌QYQN-3和ZHQN-6,抑菌圈直径分别为33.33、31.67 mm,30%发酵液的菌丝生长抑制率分别为56.06%和50.76%,孢子萌发抑制率分别为47.85%和74.85%。菌株QYQN-3具有广谱抑菌效果。QYQN-3为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),ZHQN-6为短小芽孢杆菌(B. pumilus)。[结论]2株生防菌对稻曲病菌均有较高的抑制效果,拓宽了稻曲病生防菌的种类。     

白鲜皮水提物对植物病原真菌的抑菌活性

[目的]研究白鲜皮水提物抑制植物病原菌活性成分并进行鉴定,为开发植物源农药提供依据。[方法]采用生长速率法测定抑菌效果。采用大孔树脂、高速逆流、柱层析法等对活性成分分离。[结果]白鲜皮水提物对辣椒立枯病菌、番茄灰霉病菌、人参枯萎病菌、人参根腐病菌等具有良好的抑菌活性。且对番茄灰霉病菌抑菌活性显著,40%乙醇洗脱部位及单体的EC50值分别为1 203、393.36 mg/L,单体经鉴定为梣酮。[结论]白鲜皮水提物具有良好的抑菌活性,分离所得单体为白鲜皮中抑制番茄灰霉病菌的主要活性成分。     

22种杀菌剂及其不同配比对人参灰霉病菌的毒力测定

[目的]生产上防治人参灰霉病可选择的药剂种类较少,很多药剂对灰霉菌的毒力作用不明确,为此采用生长速率法测定了22种杀菌剂对人参灰霉病菌的毒力。[结果]50%嘧菌环胺WG、50%乙烯菌核利WG、50%菌核净WP、50%腐霉利WP、50%异菌脲WP毒力较高,其EC50值小于0.1 mg/L,其次为400 g/L氟硅唑EC等6种药剂,其EC50值在0.1~1.0 mg/L之间。7种杀菌剂的不同配比中,50%乙烯菌核利WG+30%氟菌唑WP 2∶2,300亿/g芽孢杆菌+50%嘧菌环胺WP 3∶1,增效作用较为明显,其共毒系数分别为601.02,535.94;另有31种配比表现不同程度增效作用。[结论]筛选出了对人参灰霉病菌室内抑菌效果较好的药剂,为进一步田间药效试验奠定了基础。     

乙蒜素对几种植物病原真菌的毒力测定及田间药效试验

[目的]乙蒜素是一种广谱杀菌剂,测定其对植物病原菌的毒力作用和田间药效,为在生产上推广应用提供依据。[方法]采用菌丝生长速率抑制法测定乙蒜素对9种植物病原真菌的毒力作用,同时测定乙蒜素对5种病害的田间药效。[结果]乙蒜素对供试的植物病原菌均有一定的抑制作用,在相同质量浓度0.08 mg/L条件下,对重楼灰霉病菌、水稻稻曲病菌、水稻纹枯病菌和油菜菌核病菌的抑制作用达50%以上,其EC_(50)值分别为0.0128、0.0139、0.0484、0.0585 mg/L。田间试验结果表明,乙蒜素对重楼灰霉病有较好的防治效果,株防效为72%。[结论]在田间,乙蒜素对重楼灰霉病防治效果较好。     

嘧霉胺对韭菜灰霉病菌的室内毒力及田间防效

[目的]明确嘧霉胺防治韭菜灰霉病的科学剂量。[方法]采用菌丝生长速率法、叶面喷雾法分别测定嘧霉胺对韭菜灰霉病的室内毒力以及田间防效,同时采用盆栽喷雾法测定了嘧霉胺对韭菜的安全性。[结果]嘧霉胺对韭菜灰霉病菌的EC50值为30.23 mg/L。40%嘧霉胺悬浮剂,按制剂用量1125、2250、4500 g/hm~2喷雾处理后,对韭菜植株生长安全。田间试验表明:40%嘧霉胺悬浮剂有效成分用量450 g a.i./hm~2对韭菜灰霉病的防治效果最高,平均防效在72.65%以上。[结论]嘧霉胺对韭菜灰霉病菌防治效果较好,十分适合用于防治韭菜灰霉病。     

8种杀菌剂对番茄灰霉病菌多重抗药性菌株生物活性测定

[方法]采用菌丝生长抑制法,测定8种杀菌剂对3个不同多重抗药性番茄灰霉病菌株的生物活性,筛选防治番茄灰霉病高效低毒的杀菌剂,缓解和治理其多重抗药性。[结果]8种药剂中氟啶胺、咯菌腈与啶酰菌胺的抑菌效果最好,其次是氟吡菌酰胺、多氧霉素与丙烷脒抑菌效果较好,生防制剂丁子香酚与武夷菌素对多重抗药性番茄灰霉病菌也有抑菌作用。[结论]在农业生产中可以组合或轮换应用上述8种杀菌剂对多重抗药性番茄灰霉病进行防治。     

小麦纹枯病生防海洋放线菌的筛选与鉴定

[目的]筛选对小麦纹枯病菌有抑制作用的生防菌。[方法]采用平板对峙法、生长速率法和盆栽法筛选海洋放线菌对小麦纹枯病菌的抑制作用和防治效果;采用显微观察和分子鉴定对生防菌进行分类鉴定。[结果]2个菌株对小麦纹枯病菌具有较好的抑制作用。菌株YC_3发酵上清液对小麦纹枯病菌菌丝生长的抑制率为69.13%,盆栽防效为63.84%,菌株YC_1和YC_3分别为孢淡灰链霉菌(Streptomyces spororaveus)和肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)。[结论]菌株YC_3发酵液对小麦纹枯病具有显著的防效。     

一株车前子内生细菌的抑菌和促生活性初步研究

为了筛选到具有农用生物活性新的微生物资源,本研究以一株车前子内生细菌R6为试验材料,对其抑菌活性和促生作用进行了研究。抑菌测定结果表明,R6菌株对棉花枯萎病菌、甜瓜枯萎病菌、小麦赤霉病菌、草莓灰霉病菌、苹果腐烂病菌、番茄早疫病菌均有较强的抑菌活性,并能产生挥发性的抑菌活性物质。促生作用结果表明,R6菌株发酵液对黄瓜种子萌发、生长期的鲜重、根冠比、叶绿素含量等指标均有一定促进作用。     

地衣芽孢杆菌SDYT-79抗病物质分离纯化及理化性质分析

[目的]从1株生防细菌地衣芽孢杆菌SDYT-79中分离纯化出抑菌蛋白,并分析其理化性质。[方法]以地衣芽孢杆菌为材料,以不同硫酸铵饱和度确定最佳饱和度,然后通过Sephadex G-75凝胶层析柱分离出抗菌蛋白,经SDS-PAGE测定抗菌蛋白的分子质量,最后通过不同温度、酸碱度、保存时间、蛋白酶分析其稳定性。[结果]确定最佳饱和度为50%,经SephadexG-75层析柱洗脱出2个洗脱峰,峰Ⅰ具有抗菌活性,分子质量为107.931 KD。抗菌蛋白对温度、保存时间蛋白酶均不敏感,同时抗菌蛋白在中性和弱碱性条件下稳定性良好。[结论]抑菌蛋白具有较高的稳定性。     

烟嘧磺隆高效降解复合菌系的构建及降解特性

[目的]构建烟嘧磺隆高效降解复合菌系并明确其降解特性，为高效修复烟嘧磺隆污染土壤提供理论支撑。[方法]通过富集驯化培养，从山西省不同生态区烟嘧磺隆污染土壤中筛选出5株烟嘧磺隆降解菌，通过16S rDNA和ITS序列分析鉴定降解菌的分类地位。通过全组合构建高效降解复合菌修复体系，并通过单因素试验明确其降解特性。[结果]筛选获得10株具有烟嘧磺隆降解能力的菌株，其中5株菌株降解能力较强。经16S rDNA和ITS序列鉴定和系统发育分析，5株烟嘧磺隆降解菌株分别为A枯草芽孢杆菌、B黑曲霉、C草酸青霉、D土曲霉和E绿木霉。全组合复配结果表明，由3种菌株组成的复合菌系对烟嘧磺隆降解率最好，其中ABD组合对烟嘧磺隆降解能力最高，较单株菌降解率最高的菌株D降解率提高23.74%；将筛选的A、B、D进行不同比例复配，菌株最佳复配比A∶B∶D为2∶3∶1时，烟嘧磺隆降解率最高达98.31%，各菌株对烟嘧磺隆降解的影响效果A>B>D。复合菌系较单一菌株增加了适宜的温度、pH值和烟嘧磺隆初始浓度范围，最适培养降解条件为接种量2%～5%，温度30～40℃，pH 7.0，烟嘧磺隆初始质量浓度50～2...     

生防芽孢杆菌的分离筛选与初步鉴定

从不同环境中采集7份土壤样品用于芽孢杆菌的分离纯化,通过多次平板划线分离纯化得到30个菌落形态不同的菌株。以黄瓜枯萎病菌为指示菌对得到的菌株进行抑菌活性筛选,其中的4个菌株具有明显的抑菌作用。采用对峙生长法,测定4株芽孢杆菌对其它植物病原真菌的活性,结果显示4个芽孢杆菌均具有广谱抑菌性。进一步试验表明,4株芽孢杆菌的发酵液也具有明显的抑菌作用,说明对病原真菌有抑制作用的物质水溶性较大,大部分释放到发酵液中,并且发酵液可使黄瓜枯萎等植物病原真菌菌丝膨大、褐变、末端钝圆,促进镰刀菌产生小孢子。通过菌落形态特征、系列生化测定对其进行初步鉴定,结果表明其中一株为枯草芽孢杆菌。     

侧柏内生真菌G21抑菌活性及其鉴定

[目的]研究侧柏内生真菌菌株G21在不同培养基中发酵产物抑菌活性,并进行鉴定。[方法]利用生长速率法测定抑菌活性,结合形态分类及ITS-18S rDNA序列分析鉴定菌株。[结果]G21在所有不同培养基中的发酵产物对苹果腐烂病菌、白菜黑斑病菌、小麦纹枯病菌及番茄灰霉病菌均有不同程度的抑制作用;G21鉴定为异茎点霉属(Paraphoma),与菊异茎点霉菌(Paraphoma chrysanthemicola)处于同一分支。[结论]G21马丁培养基和淀粉铵盐培养基发酵产物活性值得进一步研究。     

海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03菌株的抑菌作用

[目的]研究海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03的抑菌应用潜力。[方法]通过gyr B序列同源性等分析鉴定菌株,96孔板和抑菌率法测试MIC值和抑菌谱,PCR扩增菌株2个重要生防基因,盆栽实验测定菌株对番茄叶霉病和油菜菌核病的防治效果。[结果]HTTAZ10-03菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株具有与抑菌活性有关的fen D,itu C基因簇,茄链格孢病菌抑菌MIC值为2 m L/L,对番茄灰霉等8种植物病原菌抑制率74.1%~85.4%,番茄叶霉病和油菜菌核病菌的防效为62.1%~63.6%。[结论]芽孢杆菌HTTAZ10-03具有较好的杀菌剂开发潜力。     

7种药剂对蓝莓灰霉病的田间药效试验

[目的]明确腐霉利、异菌脲、啶酰菌胺、嘧霉胺、百菌清、多抗霉素、啶菌唑等杀菌剂对蓝莓灰霉病的防治效果。[方法]采用菌丝生长速率法测定了7种杀菌剂对蓝莓Vaccinium spp灰霉病菌的抑制作用,通过田间喷雾测定了这7种杀菌剂对蓝莓灰霉病的田间药效。[结果] 50%啶酰菌胺WG、25%啶菌唑EC、50%腐霉利WP对蓝莓灰霉病病菌抑制作用较强,其中50%啶酰菌胺WG的抑制作用最强,EC50值为0.8633 mg/L。田间药效试验结果表明,50%啶酰菌胺WG、25%啶菌唑EC、50%腐霉利WP其对蓝莓叶灰霉病的防治效果在61.09%上,对果灰霉病的防治效果在66.63%以上。[结论] 50%啶酰菌胺WG、25%啶菌唑EC、50%腐霉利WP对蓝莓灰霉病有较好的防治效果,且对蓝莓安全,生产上建议选用以上药剂进行推广应用。