一株产低温脂肪酶酵母菌的鉴定及酶学性质

低温脂肪酶已成为工业低温工艺良好候选物,在生物质能源、食品、皮制品、废水处理等领域发挥重要作用。本文从实验室保藏的55株产低温脂肪酶酵母菌株中筛选出一株高产菌株NYNU 19160,通过形态学、生理生化以及ITS和26S rDNA序列分析,将该菌株鉴定为Papiliotrema fonsecae。经过硫酸铵分级沉淀、透析、浓缩将该脂肪酶纯化后,对酶学性质进行了研究。结果表明,该脂肪酶最适反应温度为20℃,最适作用pH为7.5,属于低温碱性脂肪酶;Cu²⁺显著促进该酶的水解活性,而Li⁺表现为显著抑制作用;有机溶剂乙腈、甲醇、乙酸对酶活性有较强的促进作用,而苯和正己烷则抑制了该酶的活性;该酶对对硝基苯酚丁酸脂(pNPC₄)底物表现出较强特异性。     

产脂肪酶菌株的筛选、鉴定及其发酵条件优化

通过维多利亚蓝显色培养基筛选从平顶山当地土样和食堂油污中筛选获得一株产脂肪酶菌株BA-4,经形态学观察及16S rDNA分子鉴定,初步确定该菌株属于不动杆菌属。对其产酶条件的研究显示,该菌株最适发酵培养基初始pH为7.5,发酵温度35℃,转速200 r/min,培养时间48 h。     

一株耐热脂肪酶产生菌的筛选、产酶及催化条件研究

通过平板划线分离法,从15份土样中筛选到18株产耐热脂肪酶菌株。经复筛选取K2菌进行产酶条件研究,并通过盐析沉淀法分离脂肪酶,研究该酶最佳催化条件。实验结果表明,该菌株产脂肪酶的适宜发酵条件为培养温度55℃,初始pH5,摇床转速200 r/min,发酵时间48 h。采用硫酸铵分30%与75%两步盐析分离脂肪酶,经真空低温冷冻干燥浓缩酶液,用pH 6.0磷酸缓冲液溶解后,在50℃,pH=7条件下,对乳化橄榄油具有最高催化活性。     

用于环保的耐热脂肪酶产生菌Wi-3的诱变及其酶学特性研究

从福州温泉澡堂排水道中分离筛选到一株可用于环保的耐热脂肪酶产生菌株Wi-3,经UV NTG复合诱变,选育出突变株Wi-3-3和Wi-3-5,其酶活比出发菌株分别提高了32.3%和11.8%.对Wi-3-3的产酶条件进行研究,结果表明在35℃、起始pH值7.0、250 mL摇瓶装量为35 mL、接种量为4 mL(菌浓1.5×108个·mL-1)、发酵周期为35 h的培养条件下产酶最高.用硫酸铵提取Wi-3-3发酵液中脂肪酶进行酶学特性的初步研究,结果表明其最适反应pH值为8.6、最适反应温度为55℃.     

纳豆菌的分离筛选与鉴定

采用酪蛋白平板初筛,从日本北海道生产的纳豆食品中筛选出5株产纳豆激酶的菌株,分别编号XD1~5;再采用纤维蛋白平板复筛,通过比较透明圈大小筛选得到高产纳豆激酶菌株XD2,并通过16SrDNA基因序列对其进行鉴定。结果表明,5株菌株均能产纳豆激酶并能分解纤维蛋白,其中,菌株XD2所产纳豆激酶的酶活最高,为989.3U·mL~(-1);16SrDNA基因序列鉴定菌株XD2为枯草芽胞杆菌。     

普鲁兰酶产生菌的筛选鉴定及其发酵条件优化与酶学性质研究

从淀粉厂附近土壤中筛选得到5株产普鲁兰酶的菌株,与实验室已有保藏菌株做活性对比,结果筛选得到的S1117产酶活性较高,根据其形态特征及16S rRNA序列分析,初步鉴定为芽孢杆菌。对其产酶条件进行了优化,确定了该菌株的最适发酵培养条件,其发酵54 h时酶活达到最大2.5 U/mL。初步研究了其酶学性质,其所产普鲁兰酶反应最适温度与pH分别为40℃,5.2;在60℃仍保持有80%以上酶活。     

高酒精耐受性产酒酵母菌的选育

从某高粱酿酒厂的酒糟中分离到．1株耐受19％酒精的具有产酒精能力的酵母菌,标记为S17,初步鉴定其属于酒香酵母属（Brettanomyces）。对菌株S17进行紫外诱变以提升其耐酒精的能力。结果表明,菌株S17经紫外线照射120s,筛选得到一株可以耐受20％酒精的正突变株,相比原始菌株的酒精耐受力提高了1％。     

脂肪酶产生菌的筛选及其酶性质

从５６个土样中分离获得２５３株脂肪酶产生菌,其中ＮＱ２３菌株产酶活性最高,从其形态特征确定为根霉属（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）。对该菌株进行紫外线和硫酸二乙酯诱变,酶活力提高５２％。对该菌株的产酶条件及部分酶性质进行了研究后发现该菌株所产脂肪酶具有良好的热稳定性,最适作用温度较高,为５０℃左右。     

一株脂肪酶产生菌及其脂肪酶催化性质的初步研究

从各种含油脂的土壤中筛选分离到一株高选择性拆分(R,S)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯[(R,S)-HPBE]的产脂肪酶菌株CF-12,经形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析,鉴定该菌为沙雷氏菌属（Serratia sp.）。对菌株CF-12产脂肪酶的发酵条件进行了初步优化,确定最适产酶条件为：蔗糖5 g/L,酵母粉10 g/L,金属离子Mg²⁺ 0.75 mmol/L,发酵培养24 h,脂肪酶活性可达20.1 U/mL。该脂肪酶最适反应温度和pH值分别为40 ℃和7.0。利用冻干酶粉拆分 (R,S)-HPBE 15 h,(R)-HPBE产率达39.6%,ee=90.8%。     

南极低温降解卡拉胶菌株的筛选、鉴定、产酶条件及酶学性质的初步研究

采用卢戈氏碘液染色法从6种海藻中筛选出高产卡拉胶降解酶菌株S942,对其种属进行了鉴定,对菌株产酶条件进行了优化,并对酶学性质进行了初步研究。16S r DNA序列鉴定结果表明,S942菌株为假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.);菌株S942产卡拉胶降解酶的最适条件为:培养时间24 h、初始pH值7.0、培养温度37℃、碳源为0.2%卡拉胶、氮源为硫酸铵、添加Ca2+、接种量5%、摇床转速150 r·min-1;酶催化反应的最适反应温度为37℃、最适反应pH值为7.0。     

两种极端环境微生物产卡拉胶酶的研究

以实验室保存的印尼热泉水样和北极海水水样中的微生物为对象,通过平板划线、卢戈氏碘液染色和发酵上清液酶活测定等一系列定性定量相结合的方法,从两种极端环境水样中各筛选出4株具有高产卡拉胶酶能力的菌株,采用DNS法测上清液酶活来确定这8株菌所产卡拉胶酶的最适反应温度。结果发现,印尼热泉菌和北极海水菌所产的卡拉胶酶的最适反应温度分别为70℃、20℃。这两种酶分别对于高温和低温环境的工业生产具有非常大的应用价值。     

一株高产低温纤维素酶南极细菌的筛选、鉴定及酶学性质初步研究

从82株南极细菌中筛选出1株高产低温纤维素酶菌株NJ64,通过16SrDNA序列分析对其进行鉴定,并对其产酶条件及酶学性质进行了初步研究。结果表明,NJ64菌株为假交替单胞菌属（Pseudoalteromonassp．）;最适产酶条件为：培养时间72h、初始pH值7．5、培养温度10℃;所产纤维素酶在pH值9．0左右、40℃条件下的酶活性最高,属于低温酶。     

湘莲中产耐酸性α-淀粉酶菌株的分离及鉴定

目的从湘莲中分离产耐酸性α-淀粉酶菌株,并对其进行鉴定。方法采用淀粉富集培养基分离湘莲中产α-淀粉酶菌株,通过形态学、生理生化分析及16S rDNA序列分析进行鉴定;在不同pH(3.20、3.38、3.56、3.85、4.15和4.45)条件下培养筛选出的菌株,测定酶活力,确定产酶的最适pH;在不同温度(25、30、35和40℃)条件下培养耐酸性α-淀粉酶产生菌,测定酶活力,确定产酶的最适温度;用不同碳源(蔗糖、淀粉和葡萄糖)和不同氮源[牛肉膏、(NH4)2SO4、柠檬酸氢二铵、柠檬酸三铵和蛋白胨]培养耐酸性α-淀粉酶产生菌,测定酶活力,确定产酶的最适碳源和氮源。结果从湘莲样品中筛选出2株酶活力较高的菌株,酶活力分别为376.21和395.62 U/ml,分别编号为LL5和LL9,2株菌株均为解淀粉芽胞杆菌。菌株LL5产α-淀粉酶的最适pH为3.56,最适温度为34℃,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为柠檬酸三铵,为耐酸性α-淀粉酶产生菌。结论成功从湘莲中分离出1株产耐酸性α-淀粉酶菌株LL5。     

产壳聚糖酶微生物的筛选及产酶条件的优化

目的 从土壤中筛选能降解壳聚糖的微生物,并优化其产酶条件。方法利用平板筛选法对采集的土壤中的微生物进行富集培养、初筛和复筛,得到能降解壳聚糖的菌株,并对降解壳聚糖能力最强的菌株进行发酵培养,优化产酶条件。结果筛选出3株产壳聚糖酶菌株,编号为C-01、C-02和C-03,其中,C-01、C-02为细菌,C-03为霉菌。C-01菌株产酶能力最强,其最适产酶条件为:以1%粉末壳聚糖+0.1%葡萄糖为碳源,0.5%(NH4)2SO4+0.5%蛋白胨为氮源,培养基初始pH值8.0,培养温度30℃,菌株接种量2.0%,培养时间48 h。在最适条件下,壳聚糖酶活力可达7.78 U/ml。结论已筛选出1株高产壳聚糖酶的菌株,并优化了其产酶条件,为壳寡糖的生产及应用奠定了基础。     

竹笋壳生物转化木糖醇高产菌株的筛选

竹笋壳是农业废弃物,利用竹笋壳半纤维素水解液发酵生产木糖醇,具有成本低、工艺简单、能耗小等特点。用自然筛选的方法,通过特定培养基筛选得到产木糖醇菌株。共筛选出30株产木糖醇的菌株,其中以3号菌株产木糖醇能力最高,木糖转化率为46.3%。     

高产酸乳酸菌的分离鉴定及生物学特性研究

采用改良乳酸菌选择性培养基从豆清发酵液中分离纯化出3株菌落形态各异的乳酸菌,对这3种菌发酵过程中p H及产酸量进行监测,筛选出一株产酸较多的优势菌株(编号LDS201)。结果表明:该菌落呈圆形,乳白色,边缘整齐,不透明,革兰氏染色阳性,菌体呈短杆状,单生或呈短链;经生理生化和16S rRNA基因序列分析鉴定该菌株为产酸解淀粉乳杆菌。     

湿地土壤产纤维素降解菌株的筛选及其性质研究

采用稀释涂平板法从宁夏湿地土壤样品中筛选出一株纤维素降解活力较高的菌株C6-2,经鉴定该菌株为烟曲霉菌(Aspergillus fumigates),对菌株C6-2发酵产酶条件及其所产酶的部分酶学性质进行了研究。结果表明,菌株C6-2的最适培养温度为30℃,该菌株能在以微晶纤维素或羧甲基纤维素钠或小麦秸秆为唯一碳源的培养基中生长,并可产生具有较好热稳定性的羧甲基纤维素酶、木聚糖酶和葡聚糖酶。     

产酸菌的分离及其对土壤氟浸出的影响

从土壤和活性污泥中分离得到4株具有产酸能力的细菌S2、S3、S5、S6,采用单因素实验法对菌株的产酸条件(时间、温度、接种量、转速)进行优化,研究各菌株产生的酸性发酵液对土壤氟浸出的影响。结果表明,4株菌的最适产酸条件为:培养温度30℃,接种量1. 5%,转速90～110 r/min,发酵液p H值最低降至3. 61。本实验条件下,产酸菌发酵液使土壤氟的浸出浓度下降,作用时间、发酵液添加量、土壤pH值等因素影响作用效果。     

吐曼河河水可培养功能菌株的筛选与生化初步鉴定

通过对吐曼河河水功能菌株的分离纯化，共得到30株放线菌、48株细菌、12株产淀粉酶菌。共106株菌株经革兰氏染色86株为阳性菌。在酶学特性研究中，得到产过氧化氢酶97株、产淀粉酶75株；78株菌株参与产蛋白酶的测定中得到产蛋白酶36株。在106株菌中50株菌能够充分利用脂酶Tween20为底物生长，59株能够利用Tween40为底物生长，78株菌株中共得到有48株利用Tween80生长。通过淀粉酶筛选培养基分离出5株菌能在淀粉培养基上产生透明圈较大的菌株，其中测量D3菌株的透明圈D/d值为3 cm,D5为3.25 cm,D10为2.9 cm,D11为3.12 cm,D28为3.2 cm。     

烟嘧磺隆高效降解复合菌系的构建及降解特性

[目的]构建烟嘧磺隆高效降解复合菌系并明确其降解特性，为高效修复烟嘧磺隆污染土壤提供理论支撑。[方法]通过富集驯化培养，从山西省不同生态区烟嘧磺隆污染土壤中筛选出5株烟嘧磺隆降解菌，通过16S rDNA和ITS序列分析鉴定降解菌的分类地位。通过全组合构建高效降解复合菌修复体系，并通过单因素试验明确其降解特性。[结果]筛选获得10株具有烟嘧磺隆降解能力的菌株，其中5株菌株降解能力较强。经16S rDNA和ITS序列鉴定和系统发育分析，5株烟嘧磺隆降解菌株分别为A枯草芽孢杆菌、B黑曲霉、C草酸青霉、D土曲霉和E绿木霉。全组合复配结果表明，由3种菌株组成的复合菌系对烟嘧磺隆降解率最好，其中ABD组合对烟嘧磺隆降解能力最高，较单株菌降解率最高的菌株D降解率提高23.74%；将筛选的A、B、D进行不同比例复配，菌株最佳复配比A∶B∶D为2∶3∶1时，烟嘧磺隆降解率最高达98.31%，各菌株对烟嘧磺隆降解的影响效果A>B>D。复合菌系较单一菌株增加了适宜的温度、pH值和烟嘧磺隆初始浓度范围，最适培养降解条件为接种量2%～5%，温度30～40℃，pH 7.0，烟嘧磺隆初始质量浓度50～2...