纤维素酶对黑大豆和葛根异黄酮糖苷不同组分的水解活性

异黄酮主要以糖苷的分子形式存在于黑大豆和葛根中,但是其具有生物活性的部分主要是苷元.为了建立一种体外生物转化异黄酮糖苷为异黄酮苷元的新方法,采用70%乙醇提取黑大豆和葛根异黄酮,用高效液相色谱分析了纤维素酶水解前后两粗提物的异黄酮组成.结果表明:纤维素酶对于不同种类的异黄酮糖苷具有不同的水解专一性、基团专一性和键专一性,能完全水解大豆苷和染料木苷为大豆素和染料木素,而不能水解丙二酰基染料木苷、丙二酰基大豆苷和葛根素.     

HPLC-ESI-MSn法鉴定大豆中12种大豆异黄酮的结构

为了鉴定大豆异黄酮的结构,采用高效液相色谱-电喷雾离子源-离子阱多级质谱联用仪(HPLC-ESI-MSn)法分离鉴定大豆粉乙醇提取物,通过多级质谱提供的准分子离子峰和多级碎片离子信息,分析得到了12种大豆异黄酮的相对分子质量、保留时间并推断了它们异黄酮糖苷的组成结构、异黄酮糖苷中糖的类型等,这12种大豆异黄酮分别是大豆苷元、大豆黄素、染料木素、大豆苷、大豆黄苷、染料木苷、乙酰基大豆苷、乙酰基大豆黄苷、乙酰基染料木苷、丙二酰基大豆苷、丙二酰基大豆黄苷、丙二酰基染料木苷。     

大豆胚芽异黄酮的提取分离与结构鉴定

利用柱层析法从大豆胚芽中分离到 8个异黄酮化合物 ,分别是黄豆素糖苷、大豆苷元糖苷、染料木素糖苷、丙二酰黄豆素糖苷、黄豆素苷元、大豆苷元、染料木素、染料木素葡萄糖苷 - 6″ -阿拉伯糖 ,其中化合物染料木素葡萄糖苷 - 6″ -阿拉伯糖在大豆中为新发现     

丹贝异黄酮生物活性增强的机理研究

以少孢根霉RT-3孢子接种在含高浓度的大豆异黄酮提取物制成的发酵基质中，发酵36h后大豆异黄酮被部分水解成相应的苷元．用从丹贝中分离的β-葡萄糖苷酶与标准品染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷作用10min，染料木素糖苷和大豆苷元的糖苷被水解成相应的苷元．结果表明：丹贝异黄酮生物活性增强是发酵剂RT-3孢子分泌的β-葡萄糖苷酶将异黄酮由糖苷水解成苷元，而苷元比糖苷有更强的活性．     

酶水解对大豆异黄酮粗提物中苷元含量的影响

采用β-葡萄糖苷酶水解的方法将大豆异黄酮糖苷转化为苷元,以染料木素和大豆苷元含量为指标,通过单因素试验对水解过程中的不同影响因素进行了考察。以染料木素含量为指标,运用正交试验优化了β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮的工艺条件为反应温度40℃、水解时间1.5h、水解介质pH4.5、水解底物浓度10mg/mL,在此条件下,水解得到的大豆异黄酮苷元中染料木素的含量可达到22.91%。     

两步水解酶法制备大豆异黄酮苷元初探

利用二步水解法制备大豆异黄酮苷元。经弱碱水解丙二酰基大豆异黄酮为糖苷型大豆异黄酮,再经果胶酶进一步水解获得富含苷元的大豆异黄酮。采用单因素试验和正交试验,得到果胶酶制备大豆异黄酮苷元的较优工艺条件:果胶酶水解时间20 min,水解温度47.5℃,水解pH值4.2,酶-底物质量比为0.80%。苷元水解得率为87.37%。     

保健食品中大豆异黄酮含量的高效液相色谱法测定

采用高效液相色谱法,对市场上销售的5种国产和进口大豆异黄酮保健食品中12种大豆异黄酮的含量进行测定.对3种苷元大豆素、黄豆素和染料木素,3种糖苷大豆苷、黄豆苷、染料木苷采用各自的标准品绘制标准曲线用内标法进行定量,对乙酰化或丙二酰化糖苷用对应糖苷的内标响应因子和转换因子来计算含量.结果表明,大豆异黄酮保健食品的质量参差不齐,存在着含量标示不准确的问题,甚至部分完全不含有大豆异黄酮,亟待加强对大豆异黄酮保健食品的市场监管.     

高效液相色谱电喷雾质谱联机检测黑豆异黄酮

采用C18色谱柱,以甲醇:水:甲酸30min内,0.8ml/min梯度洗脱(从20:80:0.1到80:20:0.1)黑豆70%乙醇提取液。紫外光谱和电喷雾质谱的数据表明:大豆苷、乙酰基染料木苷、染料木苷、丙二酰基大豆苷、丙二酰基黄豆苷和丙二酰基染料木苷是黑豆种子中最主要的异黄酮,总含量为0.373%,为普通大豆种子异黄酮含量的2～6倍;黑豆是异黄酮的丰富来源。     

高效液相色谱法快速测定大豆异黄酮制品中有效成分的研究

采用高效液相色谱法测定大豆异黄酮制品中染料木苷、黄豆苷、染料木黄酮和黄豆苷元含量.固定相为Agilent-1100 C18柱(3.9 x 150mm);以甲醇:水=35%～45%为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0～2.0mL/min;柱温为室温;检测波长为260nm.实验结果表明,市售30%大豆异黄酮制品中,含大豆异黄酮糖苷近28%,其中染料木苷为4%、黄豆苷为8%,苷元形式异黄酮未检出;采用酶水解法制备的大豆异黄酮水解物中含染料木黄酮14.3%、黄豆苷元9.8%,其大豆异黄酮苷元占大豆异黄酮总含量的96%.     

β-葡萄糖苷酶对豆奶及豆奶粉中大豆异黄酮糖苷化合物的转化作用研究

对利用β-葡萄糖苷酶将豆奶及豆奶粉中生物有效性较低的异黄酮糖苷化合物转化为高活性的异黄酮糖苷配基化合物进行了试验研究。研究了不同浓度β-葡萄糖苷酶对豆奶及豆奶粉中大豆苷、乙酰大豆苷和丙二酰大豆苷的降解转化作用。结果表明,在β-葡萄糖苷酶浓度1.5U/mL、pH5.5、45℃保温1h的条件下,豆奶及豆奶粉中大豆苷、乙酰大豆苷和丙二酰大豆苷的总量分别降低了89.1%和89.5%,大豆黄素的含量分别增加了57.2和78.7倍;黄豆苷、乙酰黄豆苷和丙二酰黄豆苷的总量分别降低了93.2%和87.7%,黄豆黄素的含量分别增加了4.2和11.7倍;染料木苷、乙酰染料木苷和丙二酰染料木苷的总量分别降低了93.8%和82.4%,染料木黄酮的含量分别增加了5.2和23.0倍。试验结论:利用β-葡萄糖苷酶能够将豆奶及豆奶粉中生物有效性较低的异黄酮糖苷化合物高效转化为高活性的异黄酮糖苷配基化合物。