以酚红为底物的伏安酶联免疫分析体系测定HRP

提出酚红 H2 O2 辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系。酚红具有醌式结构 ,在滴汞电极上于 - 0 62V(vs .SCE)左右产生伏安还原峰。HRP催化H2 O2 氧化酚红生成非电活性产物 ,使酚红的峰高降低。利用酚红的伏安还原峰的峰高降低 ,可以测定HRP及其标记物 ,并进而可用于酶联免疫分析。以线性扫描二阶导数伏安技术测定HRP的活性 ,其线性范围为 1 .0× 1 0 - 6 ～ 1 .0× 1 0 - 4 g·L- 1 HRP ,检测限为 7.3× 1 0 - 7g·L- 1 HRP。并将该体系应用于烟草花叶病毒的测定。     

利用H_2O_2和邻氨基酚伏安法测定HRP及HRP标记物(英文)

提出了邻氨基酚（OAP）－H2O2-辣根过氧化物酶（HRP）伏安酶联免疫分析新体系并用于测定HRP及HRP标注物。HRP催化H2O2氧化OAP生成的中间产物邻苯醌亚胺在BR缓冲液中,在-0．87V（vs．SCE）处产生灵敏的极谱波。应用此极谱波测定HRP的检出限达到3．5×10-12g／mL,线性范围为6．0×10-12～4．0×10-9g／mL。对此酶催化反应产物的电极还原过程也进行了详细的探讨。     

以ODA为底物固体电极伏安法测定辣根过氧化物酶及其标记物的研究

以玻碳电极为工作电极研究了邻联茴香胺 ( ODA)为底物微分脉冲伏安法测定辣根过氧化物酶 ( HRP)及其标记物的方法。 HRP能够催化 H2 O2 氧化 ODA,其反应产物在玻碳电极上 - 0 .31 V ( vs.Ag/Ag Cl)左右被还原产生一个灵敏的还原峰 ,还原峰电流随着酶浓度的增大而增大 ,借助此还原电流可以测定 HRP,并可用于以 HRP为标记物的酶免疫分析。对酶催化反应条件和酶催化反应产物的测定条件进行了详细的研究 ,在最佳实验条件下测定游离 HRP的线性范围是 4.0× 1 0 - 10 ～ 6.0× 1 0 - 8g· m L- 1,检测限为3.3× 1 0 - 10 g· m L- 1;测定游离的酶标记物 ( Ig G- HRP) ,稀释范围为 1∶ 2 0 0 0～1∶ 1 0 0 0 0 0 0 ,最大稀释比为 1∶ 1 0 0 0 0 0 0。     

OAP-H2O2-HRP伏安酶联免疫分析测定烟草花叶病毒

本文提出了邻氨基酚 (OAP) -H2 O2 -辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系并用于烟草花叶病毒 (TMV)的测定。本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化H2 O2 氧化OAP的产物 ,用于HRP测定的检出限为 1 5× 1 0 - 1 mU·L- 1 ,线性范围为 2 5× 1 0 - 1 ～ 1 .0× 1 0 3mU·L- 1 。本法对TMV测定的检测限为 2 .0ng·mL- 1 。用所建立的方法测定病毒感染病叶澄清液的最高稀释比为 1∶3.9× 1 0 6     

高香草酸-H_2O_2-HRP荧光酶联免疫分析测定HRP的研究

提出了高香草酸－H2O2－HRP荧光酶联免疫分析测定HRP的新方法。该法基于HRP催化H2O2氧化高香草酸生成能产生荧光的物质，该物质在Ex＝317nm激发光作用下产生荧光，通过测定在Em＝421nm处的荧光强度，间接测定HRP的含量。在所选定的实验条件下，对HRP测定线性范围为1．0×10（-10）～1．0×10（-8）g／mL，检测限为1．0×10（-10）g／mL。     

OAP-HO-HRP伏安酶联免疫分析测定烟草花叶病毒

本文提出了邻氨基酚(OAP)-HO-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系并用于烟草莅叶病毒(TMV)的测定。本方法以线性扫描二阶导数伏安法检测HRP催化HO氧化OAP的产物,用于HRP测定的检出限为1.5×10mU     

以铍试剂Ⅱ为底物电化学法测定辣根过氧化物酶

提出了以铍试剂 作为辣根过氧化物酶 ( HRP)底物伏安法测定辣根过氧化物酶活性的新方法。铍试剂 本身为偶氮结构 ,具有电化学活性 ,能够在汞电极上发生还原反应而产生一个灵敏的二阶导数还原峰 ;以 H2 O2 为氧化剂 ,加入 HRP催化 H2 O2 氧化铍试剂 反应的进行 ,使底物被氧化分解 ,其平衡浓度降低 ,对应的还原峰电流降低 ,峰电流的降低值同 HRP的加入量在 8.0× 1 0 - 7～ 8.0× 1 0 - 6 g·m L- 1之间呈线性关系 ;对酶催化反应和测定条件进行了详细的研究     

间苯二胺-H_2O_2-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析新体系测定HRP的研究

提出了间苯二胺 Ｈ２Ｏ２ ＨＲＰ伏安酶联免疫分析新体系测定ＨＲＰ的方法。通过测定ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化间苯二胺的产物从而间接地测定ＨＲＰ的浓度。偶合反应产物在ｐＨ９０的ＢＲ缓冲溶液中,在－０４８Ｖ（ＳＣＥ）左右产生一灵敏的极谱波,在选定的最佳条件下,测定ＨＲＰ的线性范围是６０×１０－１０～８０×１０－８ｇ·ｍＬ－１,检出限可达１０×１０－１０ｇ·ｍＬ－１。用于测定游离的ＨＲＰ及ＨＲＰ标记物,灵敏度较经典的ＥＬＩＳＡ法高。     

3，4－二羟基苯甲醛－H_2O_2－HRP伏安酶联免疫分析新体系的研究

首次提出了３，４－二羟基苯甲醛－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ伏安酶联免疫分析新体系，并用于ＨＲＰ的测定。该方法是将ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化３，４－二羟基苯甲醛的酶催化反应与３，４－二羟基苯甲醛的氧化产物的电极还原反应相偶合，在－１．０３Ｖ（ＳＣＥ）附近产生一灵敏的示波极谱波，测定ＨＲＰ的检测限为１．０×１０－１０ｇ／ｍＬ，线性范围为１．０×１０－１０～９．０×１０－９ｇ／ｍＬ。     

3,3'''',5,5''''-四甲基联苯胺-H2O2-HRP分光光度法测定HRP的研究

研究了3,3',5,5'-四甲基联苯胺(3,3',5,5'-tetramethyl benzidine,TMB)-H2O2-辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)分光光度法测定HRP的方法和酶催化反应机理.在辣根过氧化物酶的催化作用下,H2O2氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺生成有色偶氮化合物,以分光光度计在λmax=380 nm处测其吸光度值可以间接测定HRP的含量.此法用于测定游离的HRP,线性范围为4×10-12～4 × 10-9g/mL,检出限为4×10-12g/mL,与同类方法相比灵敏度提高了2个数量级.     

DPDAP－H_2O_2－HRP显色光度法测定HRP的研究

首次提出了Ｎ，Ｎ－二氯二甲基对苯二胺一Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ光度法测定ＨＲＰ的方法。ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化Ｎ，Ｎ－二氯二甲基对苯二胺生成有色化合物，通过测定有色化合物在λｍａｘ＝５５３．６ｎｍ处的吸光光度值，间接测定ＨＲＰ的含量。在所选定的实验条件下，ＨＲＰ的线性范围为１．０×１０－１０～１．０×１０－８ｇ／ｍＬ，本法用于游离ＨＲＰ的测定，与经典的ＥＬＩＳＡ显色光度法相比，灵敏度提高了一个数量级。ＨＲＰ的检测限为５．１×１０－１１ｇ／ｍＬ。     

硫酸对氨基二乙基苯胺－H_2O_2－HRP分光光度法测定HRP的研究

提出了硫酸对氨基二乙基苯胺－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ催化动力学光度法测定ＨＲＰ的新方法。ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化硫酸对氨基二乙基苯胺生成有色化合物，通过测定此有色化合物在λｍａｘ＝５５２．８ｎｍ处的吸光度值间接测定催化剂ＨＲＰ的含量。在所选定的实验条件下，对ＨＲＰ测定的线性范围为１．０×１０－１０～４．０×１０－９ｇ／ｍＬ，检测限为５．７×１０－１１ｇ／ｍＬ。     

伏安酶联免疫分析中一类新的HRP底物体系的初步研究

提出了以酚红、１,２,５,８－四羟基蒽醌、１,８－二羟基蒽醌三种染料类物质作为电化学酶免疫分析中辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）催化氧化反应的底物,这三种具有电化学活性物质,在ＨＲＰ的催化作用下,被Ｈ２Ｏ２氧化生成非电活性的产物,导致测定的电流下降,其减少程度和ＨＲＰ的浓度有一定的关系,从而建立了三种底物测定ＨＲＰ的新体系,比较了它们测定ＨＲＰ的灵敏度,对酶催化反应机理进行了初步的探讨。