响应面法优化樟芝固态发酵产安卓奎诺尔

以樟芝菌固态发酵生产活性代谢产物安卓奎诺尔为目标物,采用Box-Behnken原理进行响应面分析,对樟芝固态发酵产安卓奎诺尔条件进行优化,结果表明：接种量为296.80 mL/kg、Triton X-100添加量为1.10 mL/kg、辅酶Q0的添加量为0.23 g/kg时,理论上樟芝固态发酵培养基安卓奎诺尔产量的最大值为865.85 mg/kg。经验证,安卓奎诺尔实际产量为865.32 mg/kg,表明实验建立的模型能较好地预测实际发酵产安卓奎诺尔的情况。通过优化,樟芝固态发酵安卓奎诺尔产量比优化前（260.57 mg/kg）提高了232.09%。     

樟芝发酵产物中安卓奎诺尔的提取纯化

对樟芝发酵产物中的生理活性物质安卓奎诺尔的提取纯化工艺技术进行了研究。结果表明,安卓奎诺尔的最佳的提取条件为:提取溶剂为95%乙醇,料液比1∶25(g/m L),提取温度为35℃,提取时间为85 min。提取液再经过二次柱层析进一步纯化。第一次硅胶柱层析最佳条件为:上样量1∶40(w样品∶w硅胶),径高比1∶30,洗脱流速2.0 BV/h,产物中安卓奎诺尔的纯度为70.2%;第二次硅胶柱层析最佳条件为:洗脱剂v苯∶v丙酮=7∶3,上样量w样品∶w硅胶=1∶30,径高比1∶10,洗脱流速1.0 BV/h,最终产品中安卓奎诺尔的纯度达到91.0%。     

樟芝发酵产品的研究进展

樟芝是我国台湾地区特有的食药两用真菌,具有极高的研究和商业价值。然而目前对樟芝发酵产品特征代谢产物的研究不够,且缺乏规范的检测和质量评价标准,这对樟芝产品的开发及应用都极为不利。分析了樟芝人工培养方式的研究现状及产品开发存在的问题,提出了进一步的解决方法,并介绍了本课题组在相关方面取得的研究进展。     

樟芝真菌发酵培养基优化研究

以麸皮、蛋白胨、MgSO4·7H2O、VB1、葡萄糖、酵母膏、KH2PO4。7种为影响樟芝真菌液体培养的影响因素,分别以菌丝体和胞外多糖为目的产物进行L18（3^7）正交试验,综合以胞外多糖和菌丝体为目的产物进行樟芝真菌液体培养的正交试验分析后得出,樟芝真菌液体培养时的适宜培养基为：麸皮40g／L、葡萄糖25g／L、蛋白胨4g／L、MgSO4·7H2O 0．4g／L、酵母膏2．0g／L、KH2PO4 0．6g／L、VB10．01g／L。     

樟芝固态发酵生产Antroquinonol及萃取Antroquinonl的研究

安卓奎诺尔(Antroquinonol)具有很好的抗癌效果.为了提高樟芝固态发酵中Antroquinonol的产量及其萃取效率,为其工业化生产提供理论参考,本文考察了谷物种类、装料量、初始含水量、外加碳源、氮源含量对樟芝固态发酵产Antroquinonl的影响,并进行了多级逆流浸提方法萃取樟芝固态发酵产品中Antroquinonol的实验.结果表明:优化后的条件为:在1L三角瓶中,大米装料量为110g,初始含水量为50％,外加碳源为2.0g葡萄糖,氮源添加量为0.3g大豆粉.固态发酵中Antroquinonol产量提高了14.44％;用体积分数为95％的乙醇作萃取剂(乙醇与萃取物料比例为10∶1,v/w),以50℃水浴振荡萃取lh为浸提条件进行三级逆流浸提,浸提萃取后残渣中的Antroquinonol残留率小于1％.该法具有溶剂使用量少,萃取效率高的优点.     

樟芝In-situ萃取发酵高产Antrodin C和Antroquinonol

樟芝含有丰富的活性成分,但是其液态发酵产物种类及含量较少。该文通过添加前体物诱导活性成分合成,结合In-situ萃取发酵技术有效提高Antrodin C (Ac)及Antroquinonol (Aq)类化合物产量。通过发酵工艺条件优化以及7 L发酵罐实验,结果显示植物油作为萃取发酵溶剂,能够有效促进前体物辅酶Q_0的转化,从而提高泛醌类组分的产量。植物油能够高效富集Ac以及Aq类化合物,于7 L发酵罐发酵结束后产量分别为486.01 mg/L和110.06mg/L,与诱导发酵相比,分别提高了272.1%和293.5%。同时,植物油在发酵过程中的萃取作用非常明显,活性成分释放率达到80%左右。通过连续发酵实验表明,发酵结束后,采用简单的回收工艺,即可将植物油重复利用。     

樟芝菌液态发酵多糖富硒条件优化及其抗炎活性研究

为提高樟芝菌液态发酵硒多糖产量,探究樟芝菌多糖富硒后活性方面的变化。以生物量、多糖含量、硒含量和富硒率为评价指标,利用单因素试验和正交试验对发酵条件进行优化,综合得出最佳发酵条件。同时在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)建立炎症模型的基础上,评价樟芝菌硒多糖与无硒多糖的抗炎活性。通过发酵优化得到最佳发酵条件为Na₂SeO₃添加量2 mg/L、麦芽糖24 g/L、可溶性淀粉16 g/L、玉米浆干粉9 g/L,硫酸铵9 g/L,装液量75 mL/250 mL、初始pH值7,24℃、150 r/min发酵9 d。体外细胞实验结果表明,二者均能够显著降低促炎介质NO、TNF-α、IL-6和IL-1β的释放量,提高细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性,起到有效抑制炎症反应的作用。而且,硒多糖在提高SOD活性、抑制IL-1β释放方面效果要优于无硒多糖。综上,樟芝菌硒多糖在富硒的同时,能够具有高于无硒多糖的抗炎活性,具备一定的开发前景。     

樟芝固态发酵生产Antroquinonol及萃取Antroquinonl的研究

安卓奎诺尔(Antroquinonol)具有很好的抗癌效果。为了提高樟芝固态发酵中Antroquinonol的产量及其萃取效率,为其工业化生产提供理论参考,本文考察了谷物种类、装料量、初始含水量、外加碳源、氮源含量对樟芝固态发酵产Antroquinonl的影响,并进行了多级逆流浸提方法萃取樟芝固态发酵产品中Antroquinonol的实验。结果表明:优化后的条件为:在1L三角瓶中,大米装料量为110g,初始含水量为50%,外加碳源为2.0g葡萄糖,氮源添加量为0.3g大豆粉。固态发酵中Antroquinonol产量提高了14.44%;用体积分数为95%的乙醇作萃取剂(乙醇与萃取物料比例为10∶1,v/w),以50℃水浴振荡萃取1h为浸提条件进行三级逆流浸提,浸提萃取后残渣中的Antroquinonol残留率小于1%。该法具有溶剂使用量少,萃取效率高的优点。      

低频交变磁场对樟芝液态发酵的影响

使用实验室自主研制的磁场设备,以樟芝为研究对象,以菌丝体生物量提高率为指标,通过单因素和正交优化试验,研究低频交变磁场对樟芝液态发酵的影响,确定最优磁场参数,并借助扫描电镜,对比常规液态发酵和磁场辅助液态发酵所得菌丝体的微观形态的差异。结果显示,当磁感应强度为80 Gs,磁处理初次介入时间为接种3 d后,每天磁处理时长为4 h时,磁场对樟芝菌丝体的生长促进作用最强。在此条件下,菌丝体生物量提高率为15.87%,多糖增长率为24.26%,总三萜增长率为26.85%。扫描电镜结果显示,磁场辅助樟芝液态发酵所得菌丝体比常规液态发酵菌丝体表面更加粗糙,结构更加松散,褶皱更为明显。实验结果表明,低频交变磁场辅助樟芝液态发酵可以提高其菌丝体生物量、多糖和三萜产量。     

樟芝深层液体发酵条件的试验研究

目的 研究提高樟芝菌丝体干重和胞内外多糖产量的方法 .方法 用二次通用旋转组合设计法,研究樟芝液体发酵条件中的温度、转速和接种量对菌丝体干重和胞内外多糖产量的影响.结果 与结论 胞内多糖总产量的最优参数组合为温度27℃、转速113 r/min、接种量21%;胞外多糖产量的最优参数组合为温度27℃、转速120 r/min,接种量22%,并通过试验验证了最优组合.     

牛樟芝液体发酵过程挥发性物质分析

目的:分析牛樟芝发酵液中挥发性物质在液体发酵过程中的动态变化并以此为依据进行统计分析。方法:采用顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱技术对挥发性物质进行定性定量分析,并利用主成分分析和聚类分析对牛樟芝进行综合评价。结果:牛樟芝液体发酵过程中,不同阶段呈现出不同的香味,此过程共鉴定出50种化合物,其中醇类10种,酯类16种。主成分分析结果表明,主成分1和主成分2的方差贡献率为62.786%,能够代表牛樟芝的主要挥发性物质;聚类分析结果表明,整个发酵过程随挥发性物质变化规律聚集为3类。结论:牛樟芝液体发酵过程产生的香味物质可以作为化妆品、食品等领域的重要天然资源,同时,挥发性物质的综合分析为将来对牛樟芝相关产品的质量评价、价值评估以及新产品开发提供了重要的技术指标。     

樟芝菌丝体的不同提取方法及其抗肿瘤活性的研究

采用不同的方法对樟芝菌丝体进行提取,使用高效液相(HPLC)对提取物进行了分析,选定乙醇为提取溶剂;并用不同浓度的乙醇在不同时间下提取樟芝菌丝体,确定95%乙醇超声波提取的三萜产量最高,在1g菌丝体中可以获得25.24mg的三萜;并对其进行体外抗肿瘤活性试验,结果表明,80%乙醇浸提18h,在50μg/mL时,体外对小鼠淋巴白血病细胞L1210和人肠癌细胞SW620都有很强的抑制作用。     

樟芝真菌发酵动力学研究

对樟芝真菌菌体及胞外多糖发酵过程和发酵动力学进行了研究.基于Logitic方程和Luedeking-Piret方程,得到了描述发酵过程的动力学数学模型和模型参数,同时对实验数据与模型进行了验证比较.模型计算与实验结果拟合良好,模型正确地反应了樟芝真菌菌体及胞外多糖的发酵过程及其动力学机制.     

响应面法优化牛樟芝高产总三萜发酵培养基

为提高牛樟芝(Antrodia camphorata)菌丝体产三萜类化合物的能力,采用筛选试验(Plackett-Burman,PB)试验和中心组合设计(central composite design,CCD)试验对发酵培养基进行优化。首先通过PB试验对影响菌丝体产三萜类化合物的8个组分进行筛选,确定玉米粉、牛肉膏、黄豆粉为3个主要影响因素,然后依次用最陡爬坡试验、CCD和响应面分析,确定主要因素的最佳浓度。由此得到最佳培养基配方:20 g/L葡萄糖,10 g/L大豆粉,16.07 g/L玉米粉,4.5 g/L牛肉膏,31.93 g/L黄豆粉,1 g/L MgSO4,2 g/L KH2PO4,50 mg/L VB1。采用基本发酵培养基培养牛樟芝其菌丝体中总三萜含量为(12.29±0.43)mg/g,经培养基优化处理后三萜类含量为(15.40±0.15)mg/g,相比初始其产量提高了25.3%。     

樟芝深层发酵菌丝体提取物对食源性致病菌的抑制作用

樟芝是一种珍稀食药两用大型蕈菌,具有解酒保肝、抗肿瘤、抗病毒、调节免疫等多种生物活性.本文以成本低廉且易获得的樟芝深层发酵菌丝体为原料,用甲醇、乙醇、乙酸乙酯及水提取樟芝菌丝体中的活性物质,采用牛津杯法检测上述4种樟芝菌丝体提取物对15株食源性致病菌的抑制作用,结果表明樟芝菌丝体甲醇提取物抑菌谱最广,对其中7株致病菌(...