壳聚糖修饰脂质体的环境压力和体外消化稳定性

以壳聚糖修饰的粗脂质体和纳米脂质体为研究对象,通过加速氧化（加热）、紫外照射-自由基诱导和模拟体外消化等处理后的脂质体平均粒径、表面电荷、丙二醛含量等的变化,表征壳聚糖修饰的粗脂质体的稳定性。结果表明,经过加热、紫外照射和消化处理后,壳聚糖修饰脂质体的稳定性明显比未修饰的脂质体高,并且壳聚糖的质量浓度越高,脂质体抵抗环境压力和体外消化稳定性越强。     

壳聚糖修饰植物甾醇脂质体的制备及稳定性研究

采用乙醇注入法制备植物甾醇脂质体(Phytosterol Liposome,PLs),并以不同浓度壳聚糖进行修饰优化制备工艺;通过粒径、Pd I、电位和稳定性指数,分析评价了壳聚糖修饰植物甾醇脂质体(Chitosan modified Phytosterol Liposome,CS-PLs)在不同环境下的稳定性;并对壳聚糖修饰前后PLs进行了体外胃肠消化环境稳定性实验。结果表明:当壳聚糖浓度为0.3 mg/mL时可获得粒径小、分布均一的CS-PLs;且pH、温度和离子强度及种类均对CS-PLs稳定性有显著影响;PLs经壳聚糖修饰前后,胃消化稳定性均良好,但在模拟肠消化环境中,经壳聚糖修饰后的PLs表现出更好的稳定性。     

海藻酸钠-壳聚糖表面修饰维生素C/β-胡萝卜素复合脂质体的制备

为了增强脂质体的稳定性,本研究将壳聚糖、海藻酸钠逐层修饰在维生素C（Vc）/β胡萝卜素（βC）复合脂质体（L）的表面,制备出了壳聚糖单层修饰脂质体（C-L）和海藻酸钠-壳聚糖双层修饰脂质体（S-C-L）,并对三种脂质体的包埋率、粒度分布、微观形态、形成机理和贮藏稳定性进行了研究。结果表明,表面修饰前后,脂质体中活性成分的包埋率无显著变化,其中Vc的包埋率高于75%,βC的包埋率高于95%;动态光散射（DLS）和透射电子显微镜（TEM）结果表明,经表面修饰后,脂质体的z-平均粒径从250.1 nm增大到541.9 nm;Zeta-电位和傅里叶红外光谱（FT-IR）分析表明壳聚糖和海藻酸钠通过静电相互作用成功修饰在脂质体表面,不改变脂质体的内部结构;贮藏稳定性结果表明,C-L和S-C-L中Vc和βC的保留率在同一条件下要比L中Vc和βC的保留率约高2%~10%,说明脂质体经表面修饰后,其贮藏稳定性增强。     

天门冬酰胺酶基因在黑曲霉中的同源表达

根据NCBI中的黑曲霉天门冬酰胺酶基因asp序列(GI:145231287)设计特异性引物,从黑曲霉CICC2462基因组中扩增asp基因编码区,构建其黑曲霉表达载体p SZHG-Asp。通过农杆菌介导法转化黑曲霉,筛选以asp基因置换糖化酶基因gla A的同源重组转化子。对转化子的表达产物进行SDS-PAGE分析和酶活检测。获得8株在gla A位点发生基因置换的同源重组转化子,并对其中4株的上清液进行检测。SDS-PAGE结果显示,在42 000处有目的蛋白质条带,重组菌株的目的蛋白质表达量为185~417μg/m L,发酵液最高酶活为21 111 U/m L。     

羧甲基壳聚糖包覆薏苡仁油前体脂质体的稳定性研究

为评价羧甲基壳聚糖包覆薏苡仁油前体脂质体（CM-PL）的贮藏稳定性及复水稳定性,本研究以贮藏过程中薏苡仁油（CSO）渗漏率、丙二醛（MDA）生成量为主要指标系统考察了CM-PL在不同贮藏条件下的贮藏稳定性;以CSO渗漏率为指标考察了氯化钠溶液、葡萄糖溶液对CM-PL复水稳定性的影响。结果表明:光照、高温以及空气接触均影响CM-PL的稳定性,其影响顺序为温度>空气>光照;其中温度升高可提高芯材渗漏量,加速脂质氧化;贮藏初期,光照组及空气接触组与对照组相差不大,可能与羧甲基壳聚糖能在一定程度上延缓体系的光致氧化及自氧化进程有关,但其保护作用有限,因此CM-PL应真空、避光、低温贮藏;复水稳定性结果显示CM-PL对氯化钠的耐受性高于葡萄糖,与二者共存贮藏14 d后CSO渗漏率分别为14.3%,21.1%。      

天门冬酰胺酶纳米囊的药动学及生物等效性研究

作者研究了载天门冬酰胺酶(Asparaginase,AN)自组装透明质酸-聚乙二醇(Hyaluronic acid-graft-poly(ethylene glycol),HA-g-PEG)/γ-环糊精(γ-cyclodextrin,γ-CD)纳米囊(HA-gPEG/γ-CD nanocapsules loaded with AN,AHRPs)在雄性SD大鼠体内的药代动力学和生物等效性。考察了AHRPs的透射电镜、粒径、Zeta电位、包封率,并分别测定大鼠静脉给予AHRPs和游离AN后,不同时间点大鼠血浆样品中AN的活性。采用DAS 2.1.1软件计算药动学参数,对AHRPs和游离AN进行生物等效性评价。经计算,AHRPs的平均粒径为(410.30±3.20)nm,Zeta电位为(-31.40±1.65)m V,平均包封率为(42.80±4.37)%。AHRPs和游离AN的主要药动学参数AUC(0~48 h)分别为(104.01±1.68)U/(m L·h)和(46.38±1.98)U/(m L·h),AUC(0~∞)分别为(131.03±19.67)U/(m L·h)和(51.44±3.01)U/(m L·h),t1/2分别为(4.31±1.53)h和(1.86±0.38)h。与游离AN比较,AHRPs的AUC(0~48 h)、AUC(0~∞)和t1/2分别提高了2.24、2.55和2.32倍。AUC(0~48 h)、AUC(0~∞)和Cmax的90%可置信区间分别为77.1%~78.7%、76.7%~78.3%、98.9%~100.5%。AHRPs延长了AN在大鼠体内的生物半衰期,提高了AN在大鼠体内的生物利用度,且AHRPs与游离AN不具有生物等效性。     

层层自组装法制备双重修饰脂质体及其体外消化稳定性

以粒径、电位、包覆率、沉淀量为指标,采用层层自组装法制备海藻酸钠（sodium alginate,AL）、壳聚糖（chitosan,CH）双重修饰脂质体海藻酸钠-壳聚糖-脂质体（AL-CH-L）,研究AL-CH-L的物化性质、微观形貌及其体外消化稳定性。结果表明：0.6%壳聚糖和0.5%海藻酸钠制备的AL-CH-L平均粒径为（330.6±37.3）nm,分布集中,Zeta电位为（－15.8±0.7）mV,透射电镜观察双重修饰脂质体的外层成功包裹了海藻酸钠和壳聚糖聚合物,呈现典型的核-壳结构。以钙黄绿素为荧光标记物对未修饰和双重修饰脂质体进行体外消化实验,结果表明双重修饰脂质体表现出更高的体外消化稳定性。     

果胶-壳聚糖多层修饰脂质体的制备及配方优化

本研究利用壳聚糖、果胶对常规脂质体进行先后修饰构建果胶-壳聚糖多层修饰脂质体（pectin-chitosan coated liposomes,Pe-Ch-Liposomes）,以番茄红素为模型药物,系统研究了主要因素对多层修饰脂质体包封率和浊度的影响,并以包封率为指标优化配方。结果表明果胶溶液与壳聚糖溶液的体积及浓度配比均对多层修饰脂质的包封率及浊度有一定的影响,且多层修饰过程可降低由卵磷脂与胆固醇质量比引起的包封率及浊度的差异。正交实验结合单因素分析确定最佳配方为果胶壳聚糖体积比为2∶1,果胶-壳聚糖总浓度为0.2%∶0.2%,卵磷脂与胆固醇质量比为5∶1,番茄红素添加量为2.5 mg。在此条件下制备的多层修饰脂质体的包封率（97.8%）显著高于常规脂质体的包封率（85.4%）;粒度分布较为集中,平均粒径为1870.4 nm,多分散系数为0.231。      

壳聚糖-核桃多肽脂质体的制备及表征

为了提高核桃多肽的消化稳定性和贮藏稳定性,构建壳聚糖-脂质体载体进行包载,通过单因素试验探究工艺参数对壳聚糖-核桃多肽脂质体包封效果的影响。结果显示,当m(多肽)∶m(胆固醇)∶m(吐温-80)∶m(卵磷脂)=4∶1∶2∶9,壳聚糖质量分数为0.4%,超声波处理6 min时,壳聚糖-核桃多肽脂质体的包封效果最佳,此时壳聚糖-核桃多肽脂质体的包封率为(76.13±0.84)%,粒径为(80.30±0.35)nm,多分散系数为(0.25±0.01),电位为(+6.33±0.23)mV。采用透射电镜观察样品的微观形态,壳聚糖-核桃多肽脂质体呈明显的囊泡状结构,具有脂质体的形态特性。     

高效液相色谱法测定门冬酰胺酶效价

建立高效液相色谱法测定门冬酰胺酶含量的方法。采用TSKgel G3000SW色谱柱(7.5 mm×300mm,10μm,TOSOH),以0.lmol/L磷酸盐缓冲液(p H 6.7)(取磷酸二氢钠6.0g、磷酸氢二钠20.2g,加水900ml,用磷酸或氢氧化钠溶液调节p H值至6.7,加水至1000ml),检测波长为280 nm,流速0.6 m L/min,柱温为室温,进样量为20μL。结果显示,门冬酰胺酶效价在100~300IU/m L范围内线性关系良好,线性回归方程:Y=1.7834C-1.8667(R2=0.999),平均回收率为102.36%(RSD=0.4045%)。可见,高效液相色谱法简便、灵敏、重复性好,可作为门冬酰胺酶效价测定方法。     

胆固醇对红景天苷脂质体的制备及物化稳定性的影响

本实验研究了胆固醇对红景天苷脂质体的作用,重点考查了包封率、Zeta电位、粒径大小、渗漏率和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量等指标。结果表明,红景天苷脂质体的包封率随着胆固醇嵌入量的增加呈现先增加后减小的趋势,但胆固醇的嵌入量对载量影响不大。4℃和30℃下贮藏一个月,没有任何胆固醇嵌入的脂质体渗漏率达到10%和15%,随着胆固醇嵌入量增加至1：5和1：2,脂质体的渗漏率分别下降为6%、5%和12%、10%。进一步增大胆固醇的嵌入量至1：1,其渗漏率又会明显增加。胆固醇和卵磷脂脂质量比1：2时,脂质体在4℃、30℃下贮藏一个月的物理稳定性最好。     

葵花籽油脂质体的制备及其稳定性研究

采用薄膜超声法制备葵花籽油脂质体。以包封率为指标优化脂质体的制备工艺和配方,并用傅里叶红外光谱对脂质体进行结构表征。结果表明,脂质体的最佳制备条件为卵磷脂:胆固醇(质量比)为4:1,超声功率90 W,超声时间30 min,该条件下脂质体的包封率为90.32%。红外光谱显示葵花籽油脂质体具有其特殊结构,说明制备工艺可行。     

不同组分对PST脂质体化学稳定性的影响

通过逆相蒸发法制备PST脂质体 ,重点探讨了不同组分原料对PST脂质体化学稳定性的影响。经过实验论证 ,加入抗氧化剂后 ,包封率明显提高 ,而且加BHT的效果比加VE 的效果要好。通过对大豆卵磷脂和蛋黄卵磷脂的对比实验 ,证明了蛋黄卵磷脂所制脂质体效果较好 ,通过测定酸值 ,丙二醛含量的变化也证明了这一点     

Characterization,Stability, and In Vitro Release Evaluation of Carboxymethyl Chitosan Coated Liposomes Containing Fish Oil

Fish oil was extracted and refined from Nile tilapia viscera. Uncoated liposomes (un‐L) and carboxymethylchitosan (CMCS)‐coated liposomes (CM‐L) containing fish oil were prepared, and their characteristics, stability, and release in vitro were studied. The CMCS coating increased the mean diameter of liposomes but there was no effect on entrapment efficiency. The surface structure and characteristics of liposomes were determined. The Fourier transform infrared spectroscopy showed that the hydrogen bonding formed between the CMCS and the carbonyl region of the liposomes’ bilayer. The transition temperature of CM‐L was higher than un‐L. The stabilities of un‐L and CM‐L stored at 4 °C were better than 25 °C. Moreover, the CM‐L was significantly more stable than un‐L when stored at 25 °C. The release behaviors of un‐L and CM‐L were governed by 2 distinct stages and the first‐order model was the most suitable model for the whole release procedure. The diffusion and erosion may be the main release mechanisms for the full controlled release of fish oil from the liposomes. This study can provide theories and practice information for further applications of fish oil from tilapia viscera.     

羊初乳热稳定性研究初探

本文以不同泌乳期的羊初乳为原料,研究了不同泌乳期的初乳的热稳定性,以及酸度,添加物磷酸盐、柠檬酸盐、蔗糖、钙离子、卡拉胶等对初乳热稳定性的影响。结果表明:初乳的热稳定性随泌乳期和pH值的增大而增大;磷酸盐、柠檬酸盐、蔗糖均对初乳的热稳定性有改善作用;而钙离子、卡拉胶使初乳的热稳定性下降。在80℃下初乳热稳定性改善最适条件为:pH6.9,柠檬酸0.02mol/L,磷酸盐0.2mol/L,蔗糖30%。     

悬浮果粒酸乳饮料稳定性的研究

研究魔芋胶、刺槐豆胶、黄原胶及不同磷酸盐对悬浮果粒酸乳饮料稳定性的影响,结果表明:当魔芋胶、刺槐豆胶与黄原胶以质量比4:1:2比例复配,用量为0.06%,六偏磷酸钠用量为0.08%时,悬浮果粒酸乳饮料的悬浮性及稳定性最好,且黏度适中,无明显凝胶现象.     

叶酸脂质体制备工艺优化及其稳定性研究

以叶酸为载药,卵磷脂和胆固醇为膜材,采用薄膜水化- 超声法制备叶酸脂质体;通过单因素考察制备工艺对包封率的影响以及正交设计法进行制备工艺优化。得出最佳制备工艺为卵磷脂与胆固醇比5:1(m/m)、叶酸质量浓度1.4mg/mL、制备温度60℃、水相pH8.0。制备的叶酸脂质体包封率可达到30.36%,平均粒度为335.4nm。将脂质体在4℃下密闭放置15d,以脂质体的粒径变化为指标考察其稳定性。结果表明,脂质体悬液粒径无明显变化,主要集中在300～400nm,脂质体悬液稳定性良好。     

VC脂质体的制备与稳定性测定

以卵磷脂和胆固醇为膜材,采用薄膜- 超声法制备VC 脂质体。通过单因素考察生产工艺对包封率的影响以及正交设计法进行工艺优化。得出制备VC 脂质体最佳工艺：制备温度65℃、卵磷脂:胆固醇=5:1、总脂材:VC=25:1、总脂材:表面活性剂(吐温-80)=10:2,在此条件下包封率可达42.1%,平均粒度为373.9nm;将脂质体在4℃下密闭放置15d,以脂质体的粒径变化为指标考察其稳定性。结果表明,脂质体悬液粒径无明显变化,脂质体悬液稳定性良好。     

提高大豆油水乳状液氧化稳定性的研究

为满足不同特殊人群的营养需求，可以设计不同的配方奶粉。富含不饱和脂肪酸的配方奶粉由于含有较高的不饱和脂肪酸油脂，容易出现脂肪氧化的质量问题。本文着重考察了配方粉在成粉前，引起乳状液的氧化的一些影响因素。结果表明，在有铁离了共存时，含花生四烯酸的大豆油水乳状液的脂肪氧化与铁离了成正相关，鏊合剂柠檬酸钠可以通过对铁离了的鏊合作用在起始阶段降低乳状液的氧化程度，抗氧化剂抗坏血酸棕榈酸酯抑制脂肪氧化主要体现在贮存后阶段。当二者联合应用时，在液体乳状液和固体粉状时都具有显著的抗氧化效果。     

定点突变提高枯草芽孢杆菌L-天冬酰胺酶的活力及稳定性

L-天冬酰胺酶可以催化L-天冬酰胺转化为L-天冬氨酸和氨。它可以通过降解食品原料中的L-天冬酰胺而降低高温烹制食品中丙烯酰胺的含量。由于食品预处理环境的复杂性,只有具有高酶活且稳定的酶才能满足食品生产中的应用。作者通过点突变提高来源于Bacillus subtilis B11-06的L-天冬酰胺酶(Bs AII)的酶活和热稳定性。通过序列比对和同源模拟选择5个点进行突变,构建6个突变菌株。酶活测定结果表明,突变体酶S299N_(ansz)和P348A_(ansz)的酶活较Bs AII分别提高28%和32%。其中P348A_(ansz)的热稳定性和p H稳定性较Bs AII均有明显提高。本研究表明,第299和348位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响,对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础,并提高了该酶的工业应用潜力。