破壁对灵芝孢子粉品质的影响

以灵芝孢子粉为原料,利用微波、超声对其进行破壁,以微波和超声的时间、功率、料液比为因素,灵芝孢子粉的多糖和三萜的含量为指标,得到最佳破壁工艺为料液比20∶1 (mL/g),微波功率280 W,微波时间90 s。以微波破壁所得到的灵芝孢子粉为原料,对比破壁前后的孢子粉粒度、松紧密度、比表面积、色度、休止角并用电镜观测形态;测定破壁前后孢子粉的总脂肪、总多糖、总三萜、灰分、蛋白质、多酚等营养成分含量,比较破壁前后孢子粉的品质。结果表明,破壁后灵芝孢子粉的感官状态与未破壁孢子粉差异明显:孢子粉的比表面积、松紧密度、色度均明显增加;粒度、流动性有所减小。经过破壁后的孢子粉中脂肪、多糖、三萜、灰分、蛋白质等营养物质的含量均不同程度地提高。实验证明,微波破壁处理有助于灵芝孢子粉中三萜、粗多糖、粗脂肪等功能性成分的溶出,大大增加了灵芝孢子粉有效成分的溶出。     

灵芝孢子粉生物活性成分及药理作用

灵芝孢子粉是灵芝子实体在成熟期释放出的卵型生殖细胞,含有多糖、三萜和核苷等多种活性成分,药用价值高于灵芝子实体和菌丝体,具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等药理作用。本文对灵芝孢子粉的结构、功能性成分、药理作用及产品开发现状方面的研究进行了综述,为其进一步开发与利用提供重要的理论参考。     

大孔树脂纯化灵芝子实体和孢子粉中总三萜

研究比较大孔树脂对灵芝子实体和孢子粉两个不同部位中总三萜的吸附特性,优选其对灵芝总三萜的分离纯化工艺条件。采用紫外分光光度法测定灵芝子实体和孢子粉两个不同部位中总三萜的含量,选择8种大孔树脂,以总三萜吸附率和解吸率为指标,筛选最佳树脂型号,并考察最佳树脂纯化灵芝子实体和孢子粉中总三萜的工艺参数。结果表明：8种大孔树脂中,HPD-500型大孔树脂对灵芝子实体总三萜的吸附解吸效果最好,最佳纯化工艺条件为上样液浓度1.0 g干样/mL,最大上样量2 BV,用8.5 BV的75%乙醇进行洗脱,该工艺下灵芝子实体总三萜纯度达60.59%;而AB-8型大孔树脂对灵芝孢子粉总三萜的吸附解吸效果最好,且最佳纯化工艺条件为上样液浓度0.4 g干样/mL,最大上样量3 BV,用8.5 BV的95%乙醇进行洗脱,该工艺下灵芝孢子粉总三萜纯度达65.48%。综上,HPD-500型和AB-8型大孔树脂分别富集纯化灵芝子实体和灵芝孢子粉中总三萜的工艺效果显著,简单可行,为灵芝三萜的深入探究和工业化纯化灵芝子实体和孢子粉总三萜提供理论依据。     

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。     

不同品种灵芝子实体及孢子粉元素成分分析及重金属安全性评价

针对我国鲁西地区主栽灵芝品种,利用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定不同品种灵芝子实体、孢子粉及破壁孢子粉中元素及重金属含量,开展元素成分分析及重金属安全性评价。元素成分分析结果表明,藏芝和香血芝子实体中大部分元素含量明显高于赤芝、美芝和新大片子实体中元素含量,特别是Fe、Cu、Zn、Mn、Se、B、V、Co、Sr 9种人体必需微量元素,其中藏芝子实体中Fe元素含量达到234 mg/kg、Zn元素含量达到57.9 mg/kg、Se含量达到0.309 mg/kg,香血芝子实体样品Sr元素含量最高,达到3.60 mg/kg。赤芝粉和赤芝椴木粉元素营养质量高于美芝粉和新大片孢子粉元素营养质量,赤芝粉和赤芝椴木粉中硒含量分别是美芝粉中硒含量的3倍和2倍。重金属安全性分析结果表明5种灵芝子实体与4种孢子粉样品Pb、Hg 2种重金属含量远低于相关标准,安全性较高,藏芝及香血芝子实体、新大片孢子粉样品As元素含量较高,具有一定的安全性风险。破壁技术会造成孢子粉中As、Pb、Cd、Cr、Cu、Ni金属元素含量不同程度的提高,孢子粉破壁过程中重金属存在一定的安全风险。     

灵芝水溶性蛋白提取工艺优化

目的优化破壁灵芝孢子粉及灵芝子实体中水溶性蛋白的提取工艺。方法采用中心组合设计方法,以提取温度、提取时间、固液比为考察因素,研究各因素及其交互作用对水溶性蛋白提取率的影响。应用SAS软件和响应面分析相结合的方法,模拟得到回归方程的预测模型和可信度,并通过岭脊分析得到最佳提取条件。结果破壁灵芝孢子粉中水溶性蛋白最佳的提取条件为:提取温度92℃、提取时间196 min、固液比1:173。而灵芝子实体的最佳提取工艺为:提取温度94℃、提取时间157 min、固液比1:166。结论最佳条件下孢子粉中水溶性蛋白的提取率为1.57%,而子实体中水溶性蛋白的提取率为0.96%。     

酸浸高压法破壁对灵芝孢子中三种主要成分变化影响的研究

研究酸浸高压法对未破壁灵芝孢子中灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇含量的影响,与未经酸浸高压的未破壁及已破壁的灵芝孢子进行含量比较。以无水葡萄糖为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝多糖含量进行测定;以齐墩果酸为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝总三萜含量进行测定;以麦角固醇为对照品,用反相高效液相色谱法,对灵芝孢子的麦角固醇含量进行测定,根据结果对三种成分含量进行比较。结果表明,经酸浸高压的未破壁灵芝孢子,其灵芝多糖的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁及已破壁灵芝孢子,其灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁灵芝孢子。酸浸高压法可作为一种新的灵芝孢子破壁方法,该法获得的灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于对照组。     

两种辐照方式对灵芝孢子粉灭菌效果及品质影响的比较

作者以破壁灵芝孢子粉为材料,研究了电子束和γ射线两种射线的不同辐照剂量对灵芝孢子粉微生物和品质的影响。结果表明:两种射线辐照对产品微生物和多糖质量分数变化基本一致。电子束和γ射线辐照灵芝孢子粉菌落总数的D_(10)值分别为2.167 k Gy和2.172 k Gy,霉菌与酵母菌的D_(10)值分别为2.646 k Gy和2.452 k Gy;当辐照低于8 k Gy时,电子束和γ射线辐照对灵芝孢子粉的多糖质量分数均无明显影响,而高于8 k Gy时,其多糖质量分数有显著变化。因此,低于8 k Gy的辐照剂量可视为破壁灵芝孢子粉安全辐照剂量。     

6个破壁灵芝孢子粉的理化性质

为更好地了解山东省破壁灵芝孢子粉的品质,收集6个灵芝孢子粉样品,对其理化性质进行分析。结果表明, 6个样品的灵芝破壁孢子粉含水率在2.013%～8.922%之间,粗脂肪含量在27.12%～34.05%之间;总糖含量在4.359%～5.769%之间,多糖含量在0.879%～1.182%之间,还原糖含量在0.196%～0.247%之间,段木栽培的破壁灵芝孢子粉多糖含量并不比代栽多糖含量高;破壁灵芝孢子粉的D[4, 3]在6.042～7.91μm之间, D50在5.723～6.284μm之间;经扫描电镜观察,发现代栽灵芝孢子粉粒径为(8.6～8.8)μm×5.6μm,而段木栽培的孢子粉粒径为8.8μm×6.6μm,碾压式孢子粉破壁率达100%。山东省破壁灵芝孢子粉多糖、重金属等含量符合中华供销总社灵芝孢子粉理化性质的行业标准。扫描电镜发现段木栽培比代栽孢子粉更饱满,但个别样品破壁率未达标。     

对破壁处理灵芝孢子粉功能特性的测定与分析

采用球磨法对灵芝孢子粉进行破壁处理,测定对比灵芝孢子粉破壁前后的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分的溶出量,粗多糖和总三萜的生物活性物质溶出量,测定分析了水、醇提取物DPPH·、ABTS·清除能力和还原能力。结果表明:灵芝孢子粉破壁前后水分和灰分变化不显著,粗蛋白溶出量增加了33.96%,粗脂肪溶出量提高了2.94倍;灵芝孢子粉粗多糖和总三萜活性物质溶出量分别增加了40.90%和55.21%;破壁后灵芝孢子粉抗氧化能力显著提高。     

破壁灵芝孢子粉对环磷酰胺致小鼠免疫抑制的调节作用

目的观察破壁与非破壁处理灵芝孢子粉的化学成分释放及免疫调节作用的差异。方法应用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)测定两种方法处理的灵芝孢子粉中灵芝酸A、C2、D的含量,采用环磷酰胺制备免疫功能低下动物模型,通过检测小鼠存活率和体重、免疫器官指数、股骨有核细胞数、淋巴细胞增殖转化率、免疫球蛋白水平,及外周血中CD3+、CD4+和CD8+数量,全面评价两种方式处理的灵芝孢子粉的免疫调节作用。结果经破壁处理的灵芝孢子粉能提高小鼠存活率,显著升高股骨有核细胞数,且能抑制环磷酰胺导致的T淋巴细胞及B淋巴细胞增殖转化率的降低,提高小鼠血清中免疫球蛋白水平,增加免疫低下小鼠的淋巴细胞数量。结论经破壁处理的灵芝孢子粉对环磷酰胺免疫低下小鼠的免疫功能有较明显的促进作用。     

灵芝孢子粉破壁工艺优化及其抗肿瘤作用

以灵芝孢子粉为原料,采用高压均质法破壁灵芝孢子,研究灵芝孢子粉破壁优化工艺及破壁孢子粉抗肿瘤作用。选取水为破壁溶剂,以均质压力、均质次数、料液比为试验因素,以灵芝孢子破壁率为试验指标,通过单因素试验及正交试验对灵芝孢子破壁工艺进行优化。通过建立S180荷瘤小鼠模型,对破壁灵芝孢子粉的抗肿瘤作用进行研究。结果表明,最佳破壁工艺条件为均质压力150 MPa、均质次数3、料液比1∶100（g/mL）,破壁率为94.35%。抗肿瘤实验表明,破壁灵芝孢子对小鼠S180肉瘤的抑制率为43.37%～57.59%,且肝体比和肺体比变化稳定,并可显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数。因此,破壁灵芝孢子粉具有良好的抗肿瘤作用。     

不同品种灵芝固态发酵菌丝体多糖和三萜含量的比较

以多糖和三萜含量为指标,探讨了8种灵芝菌株固态发酵菌丝生物活性物质含量的差异。结果表明,不同菌株间固态发酵菌丝得率、多糖和三萜含量的差异较大,紫芝菌丝得率最高,达到了21.66%;云芝单位菌丝体多糖含量最高,为8.16%;赤芝和树舌灵芝单位菌丝体三萜含量最高,分别为1.13%和1.08%。8种灵芝菌株中紫芝单位培养基的多糖产量最高,达到了0.996%,赤芝单位培养基的三萜产量最高,为0.173%,因此紫芝适合于固态发酵生产灵芝多糖,而赤芝适合于固态发酵生产灵芝三萜。     

灵芝多糖的结构及构效关系

灵芝是一种重要的药食两用真菌,灵芝多糖是灵芝的关键药效成分之一,存在于灵芝子实体、菌丝体、孢子粉以及灵芝发酵液中。灵芝多糖的种类较多、结构复杂,了解灵芝多糖的结构和灵芝多糖与生物活性之间的构效关系对于深入研究灵芝多糖的理化特征和高效开发利用具有重要意义。综述了国内外有关灵芝多糖的结构及构效关系领域的最新研究进展,并对其研究前景进行了分析和展望。     

灵芝孢子粉微胶囊的制备及其氧化稳定性研究

灵芝孢子粉具有多种生理活性,但其存在易氧化等缺点。该文采用复凝聚法制备银耳原胶-明胶复配壁材的灵芝孢子粉微胶囊,并分析了其氧化稳定性。通过响应面实验优化后的最佳制备工艺为：破壁灵芝孢子粉质量分数33.1%、银耳原胶质量分数36.5%、明胶质量分数30.4%、包埋pH 4.1时的包埋率为94.0%。灵芝孢子粉微胶囊的微观结构呈现不规则皱缩的球形,囊壁完整性好。在加速氧化实验中,以油脂过氧化值、酸价作为评价指标,灵芝孢子粉微胶囊相比于未包埋的灵芝破壁孢子粉具有更好的氧化稳定性。微胶囊化有助于提高破壁灵芝孢子粉功能性物质的氧化稳定性,扩大其在食品工业中的应用范围。     

破壁灵芝孢子粉综合品质评价模型的构建

为构建不同产地破壁灵芝孢子粉综合品质评价模型,该研究收集了我国四大灵芝主产区的破壁灵芝孢子粉,对其水分、灰分、破壁率、L*值、a*值、b*值、脂肪、三萜类、多糖和脂肪酸等15个感官理化指标进行综合分析。首先采用SPSS统计软件对所得数据进行相关性分析(CA)和主成分分析(PCA),筛选出6个评价核心指标为水分、灰分、破壁率、L*值、多糖和亚油酸。然后运用层次分析法(AHP)确定各指标权重,计算各产地破壁灵芝孢子粉综合得分并排名。结果表明,吉林长白山地区破壁灵芝孢子粉品质相对最佳,而来自于同一产区的破壁灵芝孢子粉综合品质亦存在较大的差异。该方法不仅对破壁灵芝孢子粉综合品质评价提供了依据,同时可辅助市场上破壁灵芝孢子粉的溯源鉴别,促进破壁灵芝孢子粉产业的高品质发展。     

灵芝不同部位多糖含量测定

采用苯酚-硫酸法对灵芝菌盖表皮层、木栓层、菌柄、孢子粉、发酵菌丝体等部位中的灵芝多糖进行了测定,结果发现,灵芝发酵菌丝体中的多糖含量明显高于灵芝的其它部位,其含量顺序分别为：发酵菌丝体〉菌盖表皮层〉孢子粉〉菌柄〉木栓层。     

桑黄菌丝体与子实体成分的比较分析

为进一步开发和利用桑黄（Phellinus igniarius）,通过发酵获得桑黄菌丝体,并对桑黄子实体和菌丝体的一般营养成分及主要功能成分含量进行分析比较,利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率和对SW620、HepG2肿瘤细胞的抑制率进行主要成分活性的比较。结果表明,桑黄菌丝体和子实体均含有蛋白质、多糖、氨基酸、脂肪、纤维、矿物元素等多种营养成分,其组成基本一致。主要营养成分中,桑黄菌丝体中水分、灰分含量显著低于桑黄子实体（P＜0.05）,粗纤维含量极显著低于桑黄子实体（P＜0.01）,而粗蛋白、粗脂肪含量极显著高于子实体（P＜0.01）;在所测定的17 种氨基酸中,二者氨基酸种类一致,菌丝体氨基酸总量为25.11%,子实体氨基酸总量为4.69%;多糖、黄酮、三萜3 种活性成分在桑黄子实体中含量极显著高于菌丝体（P＜0.01）,其中子实体多糖、黄酮、三萜DPPH自由基最高清除率分别为77.14%、61.37%、49.97%;桑黄菌丝体、子实体多糖对结肠癌SW620细胞的抑制率最高可达21.45%和32.86%,对肝癌HepG2细胞的抑制率最高可达37.91%和51.29%。这些结果进一步说明桑黄菌丝体和子实体营养成分组成基本一致,含量丰富,液体发酵所得菌丝体可以缓解野生桑黄子实体匮乏的局面,具有同样的应用价值和开发前景。     

野生灵芝驯化前后子实体活性成分比较

以采集的25个野生灵芝子实体及其驯化栽培后的子实体为研究对象,分别采用苯酚-硫酸法、香草醛-高氯酸-冰乙酸显色法、凯氏定氮法、考马斯亮蓝法、马弗炉灼烧法、DPPH自由基清除试验和总还原力测定试验等测定灵芝多糖、三萜、粗蛋白、可溶性蛋白、灰分和体外抗氧化活性,并比较分析其含量差异。结果表明,不同灵芝菌株之间及同一菌株驯化前后子实体之间营养成分含量存在显著性差异,大部分野生灵芝的多糖和灰分含量高于其驯化后子实体,如野生灵芝多糖含量最高达57.30%,驯化后最高仅为49.40%;而大部分菌株驯化后子实体的三萜、粗蛋白和可溶性蛋白含量高于野生灵芝,如野生灵芝可溶性蛋白含量最高为6.29 mg/g,驯化后最高可达10.04 mg/g;驯化前水提液的体外抗氧化活性均高于驯化后子实体。     

3 种不同产地灵芝子实体主要化学成分比较

为探讨不同产地灵芝子实体（安徽1号、吉林1号和吉林2号）主要化学成分的差异,采用多种分析方法对其基本物质组成、微量元素、多糖、灵芝酸、氨基酸和脂肪酸进行分析。结果表明,不同产地灵芝子实体中蛋白质、氨基酸、脂肪酸、微量元素和三萜类化合物含量差异较大;3 种灵芝子实体中均有较高含量的Ca、Mg、Fe微量元素,以及较高含量的必需氨基酸和不饱和脂肪酸,氨基酸和脂肪酸总量由高到低依次均为安徽1号＞吉林2号＞吉林1号;3 种灵芝子实体水溶性粗多糖含量相近,但碱溶性粗多糖含量、纯化多糖的单糖组成差异较大;在3 种灵芝子实体样品中,安徽1号的灵芝酸A和灵芝酸B总含量（5.62 mg/g）最高。这些结论将为进一步完善灵芝子实体的质量标准提供技术支持。