乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究

乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖的O-乙酰基,消除木聚糖酶水解木聚糖时该基团产生的空间阻碍作用。以宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增了乙酰木聚糖酯酶成熟肽的编码基因(Auaxe),并构建了重组表达质粒p PIC9KM-Auaxe,SalⅠ线性化后电转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,经G418抗性筛选及甲醇诱导表达72 h,获得了重组乙酰木聚糖酯酶(re Au Axe),其酶活性为35.6 U/m L。发酵液经纯化获得电泳纯re Au Axe,其表观相对分子质量约为3.4×104,比酶活性为390.5 U/mg。纯化后re Au Axe的最适反应温度为50℃,在45℃及以下稳定;其最适反应p H为6.0,在p H 4.5~7.0范围内稳定;所测的多数金属离子及EDTA对其酶活性影响不大。     

木聚糖提取优化及对木聚糖酶活性的影响

以小米糠为试验原料,研究小米糠中木聚糖的提取工艺及对肠道木聚糖酶活力的影响。在单因素的基础上,采用正交试验优化小米糠木聚糖提取工艺,研究料液比、碱提温度、碱液浓度、碱提时间4个因素对提取木聚糖提取率的影响。并采用着色木聚糖标记法测定木聚糖酶活力,研究小米糠木聚糖对大鼠肠道粪便及消化道木聚糖酶活力的影响。结果表明,小米糠木聚糖的最佳提取工艺:料液比为1∶25(g/mL),碱处理温度为100℃,碱液浓度为10%,碱处理时间为2 h,在此条件下木聚糖提取率为21.71%。     

大豆秸秆木聚糖碱法提取及酶解工艺研究

大豆秸秆是木聚糖含量较高的一种农业纤维废弃物,采用碱法考察了不同前处理条件(包括预煮温度,氢氧化钠浓度,料液比和浸提时间等)对大豆秸秆中不溶性木聚糖的提取率的影响。正交实验结果表明:当预煮温度80℃,碱液浓度15%,料液比1∶20,浸提时间4 h时,大豆秸杆中不溶性木聚糖的提取率最高,为34.3%。低聚木糖是一种重要的功能性低聚糖,嗜热踝节菌木聚糖酶为低聚木糖水解用酶,通过单因素实验探究了在嗜热踝节菌木聚糖酶的催化作用下,大豆秸秆木聚糖水解的最佳条件,大豆秸秆在此方面研究尚属空白。实验结果显示:底物浓度为1.0%,酶添加量为30 U/m L,温度设定为60℃,水解时间为240 min的条件下低聚木糖的得率最高,为24.2%,在工业上具有较高的应用价值。     

木聚糖酶Shearzyme 500 L对蔗渣木聚糖的特性研究

以木聚糖酶Shearzyme 500L水解蔗渣木聚糖制备低聚木糖,用DNS法测定酶解液中的总糖和还原糖,HPLC法测定酶解产物组成,其适宜的水解条件为底物质量浓度3g/100mL、pH5.0、60℃、木聚糖中酶用量50U/g、水解时间24h。在此条件下底物水解率约为63.1%,水解产物的81.5% 为低聚木糖,其中木二糖占54.8%,木三糖占26.7%。Shearzyme 500L 不能将一分子木二糖水解为两个木糖单糖,但能水解木三糖并相应生成木二糖与木糖。副产物木糖能显著抑制Shearzyme 500L 活性,降低木聚糖的水解率。     

响应面法优化木聚糖酶和α-葡萄糖醛酸酶联合水解桦木木聚糖工艺

在单因素试验基础上应用响应面试验,优化重组耐热性木聚糖酶（XynB）和α-葡萄糖醛酸酶（AguA）联合水解桦木木聚糖的条件。响应面法分析结果显示,4个影响因素的最佳组合为底物质量浓度4.2g/100mL、酶解温度80.66℃、pH7.65、XynB/AguA加酶量60/9U/g,此时还原糖释放量为17.82mg/mL。利用木聚糖酶和葡萄糖醛酸酶共同作用木聚糖4h所得低聚木糖中还原糖质量浓度为17.91mg/mL,木二糖质量浓度为13.66mg/mL。     

棉杆木聚糖碱法提取及酶解制备低聚木糖研究

通过单因素及正交试验确定了棉杆中水不溶性木聚糖最佳提取条件:预煮温度80℃,碱液浓度15%,料液比1∶20,浸提时间4h,在此条件下棉杆木聚糖的提取得率为46.79%。对实验室保存产木聚糖酶优良菌株筛选,确定真菌L10904产木聚糖酶为制备低聚木糖水解用酶。通过单因素及响应面法考察酶解最佳条件,结果显示:底物浓度0.86%,酶的添加量20.0U/mL,温度53℃,水解240min条件下低聚木糖得率可达31.04%。对酶解产物进行TLC分析结果表明其主要成分是木二糖和木三糖。     

木聚糖水解酶的研究进展

木聚糖水解酶是一种复杂的复合酶系统，广泛分布于自然界的细菌和真菌中，将木聚糖水解酶用于食品工业、家禽饲料工业及纸浆漂白，已被认为是这种酶生物工程技术应用的一个最重要方面。在工业技术中要成功的应用木聚糖酶，了解酶的合成与作用机制是必不可少的。本文全面地介绍木聚糖酶的特性、作用机制、诱导合成、高产菌株筛选等新近的研究进展。     

复合酶法提取鲜玉米皮阿拉伯木聚糖的研究

玉米皮作为清洁易得的农产品下脚料,是开发食品组分的丰富资源,其中富含功能性非淀粉多糖--阿拉伯木聚糖(arabinoxylans,AXs)。以鲜玉米麸皮为主要原料,采用复合酶法提取其中的阿拉伯木聚糖。以提取率和提取物中AXs含量为指标,研究复合酶中的木聚糖酶和纤维素酶的比例和复合酶的添加量对得率和提取物中AXs含量的影响。结果表明木聚糖酶与纤维素酶添加量之比为10∶1(酶活比),复合酶的添加量为900 U/g时提取率和提取物中AXs含量最高。     

玉米芯水不溶性木聚糖的碱法提取及酶解分析

为研究碱法提取玉米芯中水不溶性木聚糖的优化条件及产物组成,用单因素试验评价预处理温度、NaOH浓度、料液比、提取温度与时间对提取率的影响之后,通过正交试验L16(45)确定最佳提取条件是:40℃预煮,15%NaOH溶液,固液比1∶15,100℃提取4 h,过滤,调节滤液pH值至7.0,静置过夜后离心得沉淀,洗涤沉淀,烘干后即得水不溶性木聚糖。在上述条件下玉米芯水不溶性木聚糖提取率为20.86%。对碱法提取的玉米芯水不溶性木聚糖进行木聚糖酶水解及产物分析,结果几种木聚糖酶均能使水不溶性木聚糖产生木二糖、木三糖及木四糖含量较高的低聚糖。     

小麦麸皮水不溶性阿拉伯木聚糖提取及其酶解产物分析

以小麦麸皮为原料,采用碱提法对小麦麸皮中的水不溶性阿拉伯木聚糖进行提取。以水不溶性阿拉伯木聚糖得率为响应值,采用单因素试验和响应面分析法对其提取工艺进行优化,并利用不同木聚糖酶对其进行酶解,采用薄层色谱（TLC）法对酶解产物进行分析。结果表明,水不溶性阿拉伯木聚糖的最佳提取工艺为料液比1∶193（g∶mL）、提取温度61 ℃、提取时间5 h。在此最优提取工艺条件下,水不溶性阿拉伯木聚糖的得率为51.61%,较优化前提高20.71%。用不同种类木聚糖酶对提取的水不溶性阿拉伯木聚糖进行酶解,TLC分析结果表明,链霉菌10904来源的木聚糖酶A对水不溶性阿拉伯木聚糖有较好的底物特异性,酶解产物丰富且以木二糖为主,为阿拉伯低聚木糖的制备提供理论依据。     

Enzymatischer Abbau von Xylan in Rotbuchenholocellulose

Ohne Zusammenfassung Die Untersuchungen wurden durch die Deutsche Gesellschaft für Holzforschung e V. mit Mitteln der Arbeitsgemeinschaft Industrieller Forschungsvereinigungen gef?rdert.     

椰壳中木聚糖含量的测定

以D-木糖为标准,DNS为显色剂,采用分光光度法间接测定椰壳中木聚糖的含量。结果表明:在490nm处有最大吸收峰,测定重现性好,相对误差小,标准回收率高,该法操作简便,效果好。     

棉籽壳木聚糖提取液的脱色工艺研究

以伊犁产棉籽壳为原料,比较3种活性炭和3种阴离子交换树脂对棉籽壳木聚糖提取液的脱色效果,确定了最佳脱色条件.结果表明:LY-T-ac型活性炭和D392型阴离子交换树脂对棉籽壳木聚糖液有较好的脱色效果.D392型阴离子交换树脂最佳脱色条件为:脱色温度50℃、pH8.0、脱色时间180 min(150 r/min),在树脂添加量为75 g/L、糖液固形物含量为6％时,脱色率为93.66％.LY-T-ac型活性炭最佳脱色条件为:脱色温度80℃、pH5.0、脱色时间70 min(150 r/min),在活性炭添加量为3g/L、固形物含量为6％时,脱色率为93.51％.     

酶法制备稻壳木聚糖的研究

采用α-淀粉酶和碱性蛋白酶分别降解稻壳中的淀粉和蛋白质,来制备稻壳木聚糖。在淀粉的酶解中,通过实验分析得出最佳酶解条件为:料液比1∶12 g/m L,水解温度100℃,加酶量1.5%稻壳淀粉,反应时间20 min。稻壳中淀粉的含量从21.52%降至0.72%。在蛋白质的酶解中,通过实验分析得出最佳酶解条件为:料液比1∶12 g/m L,反应温度50℃,加酶量3%稻壳蛋白,酶解时间120 min。酶解后稻壳中蛋白质残留量为2.97%。经过去淀粉和蛋白质的稻壳中木聚糖含量为46.68%。     

超声波辅助提取玉米芯中木聚糖条件优化研究

利用超声波辅助法提取玉米芯木聚糖,通过响应面分析得出超声波辅助法提取玉米芯木聚糖的最佳条件为:以10%NaOH溶液为提取溶剂,超声波功率为266 w,提取时间为52 min,提取温度为71.1℃,液料比为20.39(mL/g).在此条件下,通过试验验证得出,玉米芯木聚糖提取率平均值为29.772 2%,与预测值非常相近.与传统提取方法相比,超声波辅助法显著提高了玉米芯木聚糖提取率,提高了17.382%,而且超声波辅助提取法大大缩短了提取时间,降低了提取温度.     

微生物酶法生产低聚木糖条件的研究

酶解法生产低聚木糖 ,最适底物为麸皮半纤维素 ,底物浓度为 2 % ,加酶量为 10 0u/mL ,于 40℃酶解 12h。     

Xylan chitosan conjugate - A potential food preservative

Xylan, a hemicellulose extracted from corn cobs, was co-heated with chitosan to prepare a polysaccharide-based food preservative. UV absorbance, browning and fluorescence changes indicated the presence of Maillard reaction between the two reactants. Antioxidant capacities, including 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH·) radical-scavenging activity and reducing power, showed that the xylan-chitosan conjugates possessed excellent antioxidant activity depending on the heating time while chitosan or xylan alone did not possess any. The antimicrobial activity of the conjugates against Escherichia coli and Staphylococcus aureus was higher than chitosan. These results indicated that the Maillard reaction conjugate of xylan and chitosan was a promising preservative for various food formulations to enhance microbial safety and extend shelf life.     

棉籽壳中木聚糖提取工艺研究

本研究以棉籽壳为原料,通过对棉酚含量的HPLC测定,采用蒸煮加碱液浸提的复合方法,分析了棉酚含量以及不同碱溶液浓度、温度、固液比和时间对棉籽壳中木聚糖得率的影响。结果表明,该棉籽壳中棉酚含量为0.0163%;棉籽壳在蒸煮温度115℃、加水量100g/L的条件下蒸煮45min,以固液比1∶15,10%NaOH,100℃浸提0.5h,提取率可达62.8%。