低浓度茉莉酸甲酯对烟草长柄腺毛发生发育的影响

茉莉酸甲酯（MeJA）对烟草长柄腺毛的发生具有强烈的诱导作用,但浓度过高时会抑制烟苗发育。本文以云烟87幼苗为材料,研究低浓度MeJA对腺毛发育和腺毛分泌物的影响,并利用qRT-PCR技术研究腺毛发生发育调控基因对MeJA的应答模式。结果表明,随着MeJA喷施浓度的升高,长柄腺毛的密度和腺头直径逐渐增加;喷施300μmol/L MeJA对长柄腺毛发生和发育有显著的诱导作用,且对叶片发育无明显影响;当MeJA喷施浓度达到600μmol/L时,叶片发育受到抑制。叶面化学成分分析发现,与未喷施MeJA的对照相比,喷施300μmol/L MeJA后西柏烷二萜、烷烃和蔗糖酯含量增加约一倍。基因应答模式研究发现,西柏烷二萜合成基因CBTS和CYP71D16,以及酯转运蛋白基因Nt LTP1受MeJA诱导表达;烟草腺毛发生调控基因ARF3、GIS、CD2、Wo和Cyc B2对MeJA处理均具有应答反应,其中ARF3和GIS的表达受到MeJA诱导,而CD2、Wo和Cyc B2的表达受到MeJA抑制。综上,300μmol/L MeJA可以调控腺毛发育相关基因的表达,安全、有效地促进长柄腺毛发生发育以及腺...     

分泌型烟草腺毛形态和叶面化学成分的比较

西柏烷二萜和蔗糖酯是腺毛分泌物的主要成分.为了明确不同类型腺毛的分泌物差异,以不同腺毛类型的烟草品系TI1068和TI35为材料,分析了表皮毛的形态结构、叶面化学成分、西柏烷二萜合成基因的表达水平以及蚜虫的嗜好性.表皮毛形态学观察发现,TI1068和TI35同时具有长柄腺毛、短柄腺毛和保护毛3种表皮毛类型;TI1068...     

晒晾烟烟花腺毛分泌物蔗糖酯的鉴定与评价

烟草蔗糖酯是烟叶香味成分的重要前体物,对卷烟的增香保润具有重要作用。为解析烟草晒晾烟腺毛分泌物蔗糖酯的组分构成及含量,以80份晒晾烟资源（X1-X80）为试验材料,利用气质联用仪（GC-MS）测定了烟花腺毛分泌物中5种不同分子量的蔗糖酯SEI-SEⅥ含量,并通过相关、聚类及主成分分析等方法对80份晒晾烟资源进行了综合评价。结果表明,80份晒晾烟资源鲜烟花中总蔗糖酯含量范围是198.19~4410.45μg/g,符合正态分布,其中SEIV含量最高,SEI含量最低;相关性分析表明,SEI与SEII呈极显著正相关关系,二者与其他类型的蔗糖酯均呈负相关关系。聚类分析可将80份种质分为5个类群,各类群间蔗糖酯含量差异显著。基于主成分分析的综合评价表明,Havana1号（X2）、六峰毛把烟（X47）、Ha19（X75）、Criollo（X73）、卷叶晒烟（X78）、S-2（X5）、尼加拉瓜长芯（X70）、E18（X14）、塘蓬（X41）、Beinhart1000-1（X3）等10份资源蔗糖酯含量高,可为高香气烟草品质育种和烟草本香的开发提供物质基础和技术支持。     

高分泌型无赖百当烟草8306突变材料的创制与分析

8306是具有晾晒烟风格的烤烟育种材料.在前期试验中创制了NtCPS2基因突变株系8306-1,抑制了晾晒烟风格代表性物质赖百当二萜的合成.为进一步提高8306-1株系中西柏烷二萜和蔗糖酯含量(质量分数),采用基因编辑技术对8306-1株系的NtCycB2基因进行敲除,获得了纯合突变株系8306-2.与8306、830...     

高烟碱K326定向改良材料的创制与分析

为了明确NtJAZ1基因对烟碱含量（质量分数）和烟株生长发育及品质的影响,以烤烟品种K326为材料,利用CRISPR/Cas9技术对NtJAZ1基因进行敲除,获得了纯合突变株系NK-9。测序结果表明,NtJAZ1-1在1 587~1 641 bp之间大片段缺失,NtJAZ1-2在1 547~1 548 bp之间缺失了2个碱基,导致翻译提前终止。RT-PCR检测结果表明,NK-9烟碱生物合成关键基因NtMYC2a、NtMYC2b、NtPMT和NtQPT的表达水平显著提高。田间调查发现,NK-9株系生长发育正常,株高、叶数和叶宽显著高于对照K326,但叶长显著低于K326。显微观察表明,NK-9叶面腺毛密度较对照有所降低。对现蕾期、打顶期和成熟期烟碱含量检测发现,NK-9株系中部叶的烟碱含量分别比对照提高33.26%、36.41%和39.28%。烤后烟叶化学成分分析表明,NK-9常规化学成分比例协调,烟碱含量较对照提高44.91%;中性香气成分中新植二烯、类胡萝卜素类降解产物含量明显增加,但棕色化反应产物、苯丙氨酸类降解产物和茄酮含量有所降低。说明敲除NtJAZ1基因能够有效提高烟叶烟碱含量,对腺毛发育和叶面化学成分的积累也有一定影响。      

茉莉酸甲酯对烟草分泌型和非分泌型腺毛形态发生的影响

为解析茉莉酸对烟草腺毛发生的影响,本文以高分泌型普通烟草T.I.1068和非分泌型普通烟草T.I.1112为材料,喷施不同浓度茉莉酸甲酯（MeJA）,并对处理前后的叶片和茎表面腺毛进行形态学比较观察。结果发现:（1）T.I.1068腺毛包括长柄分泌型和短柄分泌型两类,腺毛密度随着MeJA浓度的增加而增加,但腺毛类型保持不变。（2）T.I.1112腺毛包括非分泌型和短柄分泌型两类,长柄分泌型腺毛在MeJA处理后出现,其密度随MeJA浓度的增加而增加,而非分泌型腺毛和短柄分泌型腺毛的密度并无明显变化。该结果表明,MeJA对烟草长柄分泌型腺毛发生具有强烈的诱导作用,而对非分泌型腺毛的发生并无明显影响,反映出不同类型的烟草腺毛具有不同的发生调控机制。      

发育时期和植烟海拔对红花大金元烟花腺毛分泌成分的影响

烟草花序富含西柏三烯二醇（CBT-diols）、蔗糖酯（SE）等腺毛分泌成分。为明确发育时期和植烟海拔对烟花腺毛分泌成分的影响,本研究以云南大理红花大金元花序为研究材料,应用液相色谱仪、气质联用仪分别测定其烟花中的CBT-diols、SE,研究了CBT-diols、SE积累量随发育时期及植烟海拔的变化。结果表明：（1）随烟花发育时期推进,烟花花朵及烟草花序中CBT-diols、SE积累量均呈持续增加趋势,盛花期烟草花序CBT-diols、SE积累量最高。（2）随植烟海拔升高,烟草花序生物产量呈显著降低趋势,而烟花花朵CBT-diols、SE的积累量则均有显著升高的趋势;高海拔（2227 m）产地烟草花序SE积累量最高,而CBT-diols积累量却显著低于中高海拔产地（1938 m、1740 m）。（3）烟花发育时期及植烟海拔对CBT-diols、SE积累量的比值均有显著影响,烟花发育初期和高海拔条件下,二者比值较低。本研究为高附加值利用红花大金元烟花腺毛分泌成分提供了研究基础。     

叶面分泌物和中性香气物质在不同烤烟品种（系）和地区间的变化及其与常规化学成分的关系

采用大田试验的方法,2006～2007年连续2年研究了8306等8个烤烟品种(系)叶面分泌物、中性香气物质组成和常规化学成分的变化.结果显示:(1)烟草叶面分泌物在不同品种(系)间差异极显著,其变化范尉在0.28～0.85 mg/cm2之间,平均0.47 mg/cm2.8个烤烟品种(系)的平均叶面分泌物在地区间存在极显著差异,平顶山地区比郑州地区高28%;(2)高香气烤烟新品系"8306"中性香气物质总量和重要致香物质含量(如茄酮,β-大马酮和新植二烯等)均明显高于对照品种,并且在地区间年份间保持稳定,不同地区中性香气物质组成相同,但是存在量的差异;(3)烟草水溶性总糖和总氮在不同地区间和不同品种(系)间均存在显著差异,与对照相比,"8306"在化学成分含晕上具有高糖低氮的特点.     

几种栽培技术和烤房类型对K326香型和香气品质特征的影响

采用香型指数和香气指数的评价方法,研究了几种栽培技术和烤房类型对K326香型风格和香气品质特征的影响。结果表明,在与烤烟香型指数和香气指数相关的香气成分中,栽培技术对棕榈酸甲酯、二氢猕猴桃内酯、异戊酸和苯甲醇含量影响较大,变异系数均大于20%;对大马酮、茄酮和法尼基丙酮含量影响中等,变异系数均在10%～20%之间;对糠醛、二氢-β紫罗兰醇、苯乙醛和巨豆三烯酮含量影响较小,变异系数均低于10%。不同烤房类型对棕榈酸甲酯、二氢猕猴桃内酯和苯甲醇含量影响较大,变异系数均大于20%;对糠醛、茄酮和异戊酸含量影响中等,变异系数均在10%～20%之间;对大马酮、二氢-β紫罗兰醇、法尼基丙酮、巨豆三烯酮和苯乙醛含量影响较小,变异系数均低于10%。但不同栽培技术和烤房类型对烤烟香型指数、香气指数(包括AI、A值和B值)的影响均较小,变异系数均低于10%,因此,在黔南烟区生态条件下,烤烟香型风格和香气底韵是相对稳定的,并不会因栽培和烘烤技术的差异发生明显改变。     

烤烟品种K326和云烟87对镉胁迫的生理响应及抗性差异

水培条件下,研究镉(Cd)胁迫后2个常用烤烟品种(K326和云烟87)对Cd的吸收及Cd在细胞中的分布,比较Cd处理前后烟株的生物质积累、叶绿素含量、根系活力、叶表及根尖微结构的变化.结果表明,外源Cd处理使K326的生物量比对照降低37.7%,云烟87生物量降低76.2%;K326的总叶绿素含量比对照降低64%,云烟87的降低53%;K326根的活跃吸收面积比对照降低33.3%,云烟87的降低13.9%.不加Cd时,2种烟草气孔大小均一,密度相近,Cd处理后,两者的气孔均减小,密度增大.在Cd的影响下,K326品种的细胞直径下降了35%,云烟87的下降不显著.Cd处理使完整饱满的根尖变得皱缩平秃.Cd处理使K326叶表腺毛腺头变小、腺毛变细,尤其腺基部变细更明显;Cd处理使云烟87叶表腺毛发育相对延迟.Cd主要存在于K326和云烟87的根部,分别占总量的82%和89.4%,在叶细胞的5个组分中,以可溶性组分中最高,且K326中Cd的含量高于云烟87.从生物质积累量来看,Cd处理对K326的影响小于对云烟87的影响,两个烟草品种耐受Cd的能力差异较大.     

巴西烤烟品种K326LF的引种鉴定及其应用评价

1998-2003年,对从巴西引进的烤烟品种K326LF按照烟草引种程序在贵州烟区进行了引种鉴定、区域试验和生产试验.结果表明,K326LF对烟草主要病害的抗性与对照品种K326相当,产量比对照品种K326增加182.10 kg/hm2,产值增加1 252.95元/ hm2.烟叶主要化学成分和吸食品质符合中式卷烟对烟叶原料的要求,是一个适宜目前烟草生产选用的多叶型品种.     

贵州烟区烤烟K326株型特征研究

为了解贵州烟区烤烟K326株型特征,设置植烟密度和留叶数2个试验因素,研究了不同栽培技术对K326株型的影响。结果表明,留叶数14片的烟株栽后75～90 d表现为筒型-筒型,叶面积最大叶片出现在顶部,生育期165 d左右,烟叶产值量、均价较低,下等烟比例偏高,上部叶烟碱含量较高,糖含量较低,糖碱比偏低,化学成分欠协调,烟叶感官质量最差;留叶数20片的烟株栽后75～90 d表现为高台型-筒型,生育期155 d左右,烟叶产值量、均价及橘色烟比例均较高,等级结构合理,上部叶烟碱含量适中,糖含量较高,糖碱比较高,化学成分较协调,烟叶感官质量较好;留叶数24片的烟株栽后75～90 d表现为高台型-高台型,生育期155 d左右,烟叶产值量、均价及橘色烟比例均较高,上部叶烟碱含量较低,化学成分较协调,烟叶感官质量最好。3个移栽密度中55 cm×100 cm的处理烟株叶绿素相对含量高,光合指标较优,叶面积指数较大,冠层下可见空隙比例较小,平均叶片倾斜角较小,光能利用率高,且产值量、均价及上中等烟比例高,烤后烟叶等级结构合理,烟叶感官质量较好。贵州烟区K326品种打顶后的理想株型为高台型-筒型,植烟密度18 195株/公顷、留叶20片能得到较好的烤烟产质量。     

烤烟K326成熟期五种酶动态的研究

本文定期测定烤烟K326成熟期不同处理烟叶的五种酶及主要化学成分的动态变化,以研究其对烟叶品质形成的影响。结果表明,NR活性与施N水平,叶片含N量,烟碱、叶绿体色素呈正相关,与成熟度、留叶数呈负相关;PPO活性与留叶数呈正相关,上二棚叶高于腰叶;腰叶和上二棚叶分别以11gN/株、8gN/株为高。抗坏血酸氧化酶活性初熟叶最高,而后稍有下降,过熟叶又有所回升,上二棚叶大于腰叶,施N量以8gN/株的高。淀粉酶同工酶以α-淀粉酶活性最强,出现谱带1-3条;而β-淀粉酶活性较弱,但谱带数较多,有4-8条,淀粉酶同工酶活性与留叶数,施N量呈正相关,与叶片成熟度呈负相关;酶活性消长规律与淀粉积累呈负相关。POD同工酶有谱带10-12条;酶活性随叶片的生长而增强,谱带数增多,完熟期开始回降。设计处理的最优组合是:完熟叶×施8gN/株×留17片叶。      

烤烟品种K326及其耐低温抗早花变异系基因表达谱分析

为了解烤烟早花与抗早花的形成及调控机制,本研究利用安捷伦烟草全基因组芯片分析了烤烟品种K326及其抗早花品系华烟06茎尖端花芽分化过程中基因的表达。结果表明,K326与华烟06距离各自花芽分化相同时间的茎尖端未花芽分化时的差异探针数最多,有5295个;K326分化当天各品种(品系)之间相比较差异探针数量最少,有2116个。与分子功能相关的差异基因主要与催化性能、转运性能、结合性能和转录调节性能有关;与细胞组成相关的差异基因主要是与细胞、细胞组分、细胞器相关的基因;与生物学过程相关的差异基因种类最多最复杂,涉及到植株抗逆性、生长、发育等方面,这对进一步研究与从中搜寻与烟草开花相关的基因奠定了基础。     

云南不同生态因子对烤烟品种K326致香成分的影响

为研究云南烟区不同生态因子对烤烟品种K326 致香成分的影响,选择不同生态条件下采集的128 个K326 初烤烟叶为研究对象,利用同时蒸馏萃取法提取烟草香味物质和气相色谱-质谱联用对其挥发性香味成分进行定性定量分析。结果表明:①不同因子对云南烟区烤烟品种K326 致香成分的影响程度为烟区>质地>海拔高度;②烟区对K326 致香成分的影响显著,保山、文山、红河烟区致香物质含量较高;③不同土壤质地之间K326 致香成分含量差异明显,中壤土>轻黏土>重壤土;④海拔高度对K326 的致香物质含量有一定影响,海拔1801~2300 m 最不适宜形成K326 致香物质。     

K326和云烟85不同部位烟叶挥发性成分分析

采用同时蒸馏萃取和GC/MS法分析了云烟85 和K326 上部(B2F)、中部(C2F)和下部(X2F)烟叶的挥发性成分,并对这些烟叶进行了评吸。结果表明:①除新植二烯和二十八烷外,云烟85烟叶中许多挥发性物质的含量比K326高,但其挥发性物质总量比K326 的低,K326 中部叶总挥发性物质含量比云烟85多0.8mg/g, 达4.0mg/g,下部叶多出0.5mg/g;②下部叶中含较多的新植二烯、3-呋喃甲醛、巨豆三烯酮、硬脂酸和棕榈酸,中部叶中有较多的苯甲醇,而上部叶中降茄二酮较多;③中部叶的总挥发性物质含量最高,上部叶次之,下部叶最低,与评吸结果一致;④云烟85中部叶的吸味品质好于K326,但上下部叶不及K326。     

烤烟品种K326抗PVY~N突变株SN02的筛选及其抗病生理生化特性

利用病毒汁液摩擦接种法,从烤烟品种K326中筛选出自然突变的高抗PVYN的变异株SN02,并测定了接种PVYN后,抗病植株SN02与普通K326烟株的抗病性以及防御酶系和叶绿素a、叶绿素b的含量。结果表明,接种PVYN后,SN02均不发病,但普通K326的发病率达100%,病情指数达84.13。SN02与普通K326的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性变化趋势一致,接种PVYN后第4 d均达到峰值,但SN02的PAL活性是普通K326品种的1.35倍;过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化氢酶(CAT)活性变化趋势也相似,但SN02的POD,PPO和CAT酶活性高于普通K326品种,3种酶活性出现峰值的时间不同,分别在接种PVYN后第8 d,第12 d和第16 d。在测定时间范围内,SN02的叶绿素a和叶绿素b含量高于普通K326品种。