HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的叶酸浓度及其药动学研究

目的大鼠灌胃给予叶酸溶液后,建立其在血浆中浓度的定量方法,并用于药动学研究。方法大鼠血浆采用蛋白沉淀法进行预处理,以格列本脲为内标,采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)检测大鼠血浆中叶酸的浓度。色谱分离采用Thermo Accucore C_(18)色谱柱,流动相为乙腈和0.1%甲酸-水,梯度洗脱。MS采集选用ESI正离子及多反应监测模式。结果叶酸在10～1000 ng/ml范围内线性关系良好。方法的回收率在80.0%～95.4%范围内;批内和批间的准确度为92.7%～111.4%,批内和批间精密度为2.6%～8.3%。药动学结果显示大鼠灌胃给药后叶酸在1 h左右达到最大浓度,C_(max)和暴露量随剂量的增加而增大,但和剂量并不成线性相关。结论该方法重现性好,分析时间短,能满足大鼠血浆中叶酸浓度的检测要求,并符合2015年版中国药典对生物样品分析的要求;     

HPLC-MS/MS检测非布索坦在大鼠血浆中的浓度及药动学研究

目的建立大鼠灌胃给予非布索坦后其血浆浓度的定量方法,并用于药动学研究。方法大鼠血浆样本加乙腈沉淀蛋白,以地西泮为内标,采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)技术检测大鼠血浆中非布索坦含量。色谱分离采用Thermo Accucore C_(18)色谱柱,流动相采用乙腈和0.1%甲酸,梯度洗脱。MS采集方法选用ESI正离子及多反应监测(MRM)模式。结果该方法非布索坦在10～10 000 ng/ml范围内线性关系良好。方法的回收率在97.6%～113.5%范围内;批内和批间的准确度(RE)为91.1%～115.6%,批内和批间精密度(RSD)为2.9%～16.7%。大鼠灌胃给予2,5,10 mg/kg的非布索坦后C_(max)和AUC_(0-t)分别为1603.0,3470.2,7695.0 ng/ml和10 186.1,22 427.5,65 671.5 h·ng/ml。结论该方法重现性好,分析时间短,能满足非布索坦在大鼠血浆中浓度的检测要求,并符合中国药典2015年版对生物样品分析的要求。药动学结果显示非布索坦在大鼠体内的C_(max)和AUC_(0-t)随剂量的增加基本呈线性增加。     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中酸枣仁皂苷A含量及其药动学研究

建立高效液相色谱-质谱串联(HPLC-MS/MS)法检测大鼠血浆中酸枣仁皂苷A的含量,并应用于药动学研究。大鼠静注(4 mg/kg)或灌胃(20 mg/kg)给药,不同时间取血,血浆样品经处理后,采用HPLC-MS/MS法测定酸枣仁皂苷A含量,色谱柱为Waters YMCTM ODS-AQ S-5 120A(2.0×100 mm)分析柱,以电喷雾离子化串联质谱(ESI)及多反应监测扫描模式(MRM)进行检测,流动相为甲醇-水(0.1%甲酸)=50∶50,流速为0.3 m L/min,柱温为30℃,根据测定结果求算药物的药动学参数。酸枣仁皂苷A在40 ng/m L~4 000 ng/m L的浓度范围内线性关系良好(r2=0.999 1),各浓度水平的精密度及稳定性的RSD均小于15%,提取回收率均大于85%。大鼠注射给药后主要药动学参数分别为Ke0.28/h,t1/22.55 h,AUC0→t2 839.89 h·ng/m L,AUC0→∞3 201.51 h·ng/m L,灌胃给药后主要药动学参数分别为Ke0.51/h,t1/21.35 h,AUC0→t206.02 h·ng/m L,AUC0→∞211.13 h·ng/m L。经计算,酸枣仁皂苷A在大鼠体内的生物利用度为1.32%。本试验所建立的检测方法快速简便、精密度好、灵敏度高及稳定性好,适用于酸枣仁皂苷A在大鼠体内血药浓度测定及药代动力学的研究。     

大鼠血浆中桑色素的浓度测定及其药动学研究

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中桑色素的含量,并对其在大鼠体内的药动学特征进行研究。方法以芫花素为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Thermo Hypersil GOLD-C_(18)(50 mm×4.6 mm,3μm)色谱柱进行梯度洗脱,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),进样量2μl,柱温40℃,流速0.5 ml/min。质谱采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式,以多反应监测模式(MRM)检测。桑色素和内标的定量离子对分别为m/z 300.9→151.2和283.1→268.2。结果桑色素的浓度在1.01～504.2 ng/ml范围内线性良好(r2≥0.99);定量下限为1.01 ng/ml;精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性均符合生物样品的分析要求。结论本方法可满足大鼠血浆中桑色素的测定及药动学研究的要求。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中克伦特罗的浓度及其疗效研究

目的探索用液相-质谱串联法测定人血浆中的克伦特罗含量,并比较其舌下片剂与气雾剂的疗效。方法血浆离心后过玻璃纤维滤膜,经酶解加入氘代克伦特罗内标溶液,用C18小柱净化后以3%氨水甲醇溶液对Oasis MCX小柱进行洗脱,吹干,以0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液(95:5)溶解残余物,用液相-质谱串联法测定,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱。结果克伦特罗在0.25~10.0 ng/m L浓度范围线性关系良好,定量下限为0.10 ng/m L。克伦特罗的不良反应为普遍血压升高、心率加快等,临床对照发现气雾剂疗效与不良反应都比舌下片剂明显。结论本法灵敏准确、重现性与特异性强、干扰少,可作为研究人血浆中克伦特罗浓度变化的检测方法。     

HPLC-MS/MS测定纺织品中苯并三唑类化合物

通过萃取和优化仪器条件,建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定纺织品中2-(2’-羟基-5’-甲基苯基)-苯并三唑的含量,并分析该物质的质谱图和母离子可能的裂解机理。该方法采用Varian PursuitXRs C18色谱柱,含0.1%甲酸的CH3CN-H2O溶液(65∶35)作为流动相,并以多反应监测模式进行定性定量分析。结果表明,在0.01~50.00 mg/L范围内,UV-P峰面积S与浓度C呈良好的线性关系,回归方程为S=1.0×107C+2.0×106,相关系数为0.999 8;以3σ计算得UV-P的检出限为3 ng/L,平均回收率为96.4%~102.6%。该方法灵敏度高、操作简便,可用于纺织品中苯并三唑类紫外线吸收剂中UV-P的日常检测。     

HPLC-MS/MS测定豆类及其制品中的赭曲霉毒素A含量

建立了基于高效液相色谱-串联质谱法检测豆类及其制品中赭曲霉毒素A含量的方法。该方法以有机溶剂提取结合免疫亲和柱净化作为前处理技术,以1%甲酸-乙腈为流动相,在正离子多反应监测模式下,采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用仪进行样品检测。结果表明:赭曲霉毒素A的质量浓度在0.5～20 μg/L范围内时,浓度与色谱峰面积的线性关系良好(R~20.99),方法检出限为0.3 μg/kg。样品的加标回收率为85.6%～106.2%,相对标准偏差介于0.96%～3.5%(n=6)。该方法具有分析时间短、操作简单、灵敏度高等优点,能够较好地满足豆类及其制品中赭曲霉毒素A含量检测的需要。     

HPLC-MS/MS法同时测定白酒曲药中10种真菌毒素

该研究针对白酒曲药基质样品,建立了一种高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）法同时测定白酒曲药中10种真菌毒素的方法。采用甲酸-乙腈-水（1∶19∶80,V/V）混合溶液对样品进行萃取,经Waters-PRIME HLB固相萃取小柱净化后氮吹浓缩,使用0.1%乙酸水-乙腈10∶90(V/V)复溶后上机检测。真菌毒素目标物经C18色谱柱进行梯度洗脱分离,采用多反应监测模式（MRM）,同位素内标法进行定量。结果表明,10种真菌毒素在0.5～500μg/L范围内均呈现良好的线性关系（R2>0.99）,在低、中、高3个浓度水平的平均回收率为63.8%～129.6%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为1.4%～9.1%(n=6),检出限为0.5～5.0μg/kg,定量限为2～20μg/kg,基本满足国标GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的要求,可用于白酒曲药中真菌毒素的日常筛查工作。     

HPLC-MS/MS测定油炸及高温烘烤食品中的丙烯酰胺

为检测食品中的丙烯酰胺,建立了饼干、面包、油条、薯片、咖啡多种食品中丙烯酰胺的测定方法。试样经水溶液振荡提取,硅藻土柱净化,采用HPLCMSMS和同位素稀释定量技术,以选择反应监测(SRM)方式测定目标化合物。方法的检出限和定量限分别为4μgkg和12μgkg,线性范围10～3000μgL,不同食品基质的不同加标水平(20～2000μgkg)的回收率为90%～105%,RSD<10%。本方法定量准确、可靠,适用于食品中丙烯酰胺的测定。     

HPLC-MS/MS在活性多肽检测中的应用

多肽具有调节机体生理功能和为机体提供营养的双重功效，生物活性肽的分离和检测日益受到各国的关注。综述了近年来HPLC-MS／MS在某些活性多肽（化学合成多肽、阿片样肽、抗菌肽、磷酸肽）检测中的应用概况。     

HPLC-MS/MS法测定家兔血液中的NNN及其代谢物

为了准确测定家兔血液中的N-亚硝基降烟碱(NNN)及其代谢物,通过对色谱、质谱条件的优化和选择,建立了以NNN-d4为内标,通过沉淀蛋白的前处理操作以及Waters亲水相互作用色谱(HILIC)柱分离和多离子反应监测模式(MRM)测定大耳朵白兔血浆中NNN及其代谢物的HPLC-MS/MS方法。结果表明,NNN及其代谢物的相对标准偏差(RSD)、回收率和检测限分别为0.50%~8.62%,80%~111%和0.039~0.217 ng/mL。该方法简单、快速灵敏,适合于血液中NNN及其代谢物的检测。     

纺织品中紫外线吸收剂的HPLC-MS/MS测定

建立了液相色谱-串联质谱对纺织品中苯并三唑类紫外线吸收剂UV-327和UV-328的测定方法。采用反相C18色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,以0.3 m L/min流速进行梯度洗脱。采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测模式检测。结果表明,UV-327和UV-328在0.01~50μg/m L范围内,峰面积A与浓度c呈良好的线性关系,检出限分别为0.015μg/m L和0.011μg/m L,加标回收率为99.2%。该方法灵敏度高、操作简便,可测定纺织品中苯并三唑类紫外线吸收剂UV-327和UV-328。     

基于HPLC-MS/MS技术测定纺织品中的苯扎氯铵

建立了纺织品中苯扎氯铵的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测试方法。结果表明,采用超声萃取的方法对纺织品中的苯扎氯铵进行提取,提取率可达85%以上。采用C₁₈液相色谱柱,流动相采用0.1%甲酸水-甲醇体系溶液,质谱采用电喷雾离子源正离子模式电离,选择多反应监测(MRM)模式,在0.1～0.8 mg/L范围内具有良好的线性关系(R~2>0.999),平均加标回收率在83.04%～98.91%,相对标准偏差(RSD)小于4.61%。该方法的准确性和重复性好,灵敏度高,操作简便。     

HPLC-MS/MS法定量测定方便面中的丙烯酰胺

开发了方便面中的丙烯酰胺的测定方法。试样以C3-丙烯酰胺为内标,经水溶液振荡提取,采用HPLC-MS/MS方法,以多选择反应监测（MRM）模式测定目标化合物。方法的检出限和定量限分别为10、30μg/kg,回收率为71·5%～119·5%,RSD为7·1%～8·1%。本方法定量准确、可靠,适用于测定方便面中的丙烯酰胺。      

HPLC-MS/MS测定八宝粥中8种霉菌毒素

建立了测定八宝粥中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2,T-2毒素,赭曲霉毒素A,玉米赤霉烯酮和杂色曲霉素8种霉菌毒素的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法。样品经乙腈-水(88:12,V/V)超声提取、离心后,用多功能净化柱净化,以乙腈和5 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,经ZORBAX Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,多反应监测(MRM)正离子模式进行检测,外标法定量。在0.5~50.0 ng/mL的浓度范围内,8种霉菌毒素均具有良好的线性关系(r≥0.999 6)。此方法的检出限为0.06~0.18μg/kg,平均回收率为73.5%~97.4%,RSD为4.6%~8.2%(n=7)。该方法简便、准确、灵敏,适用于八宝粥中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2,T-2毒素,赭曲霉毒素A,玉米赤霉烯酮和杂色曲霉素的同时检测。     

HPLC-MS/MS法同时测定牛肉中80种兽药及其代谢物

为全面排查宁夏地区牛肉兽药残留风险,从农业农村部规定的禁停用药物、 GB 31650—2019《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》中规定有最大残留限量的药物以及宁夏养殖环节大量使用药物三方面筛选确定12类药物,利用简单、快捷的前处理方法和超高效液相色谱-串联质谱多反应监测分析技术,建立了一次进样可同时分析检测12类80种兽药及其代谢物残留的快速检测方法。样品采用Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,经Waters HSS T3色谱柱分离,多反应监测模式监测,基质匹配外标法定量。结果表明:80种兽药及其代谢物在基质匹配标准溶液1.0～50.0μg/L的质量浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.990,方法定量限在2.0~5.0μg/kg,方法在2.0～100.0μg/kg的平均回收率为60%～103%,相对标准偏差(n=5)均小于20%;应用该检测方法对40份市售牛肉进行检测,其中4份牛肉检出兽药残留,分别为土霉素(54.5μg/kg)、磺胺间甲氧嘧啶(23.3μg/kg和35.4μg/kg)及恩诺沙星(118μg/kg),再分别使用GB/T 21317—2007、GB/T 20759—2006、GB/T 21312—2007方法对阳性样品进行复检,结果一致。经验证表明:该检测方法定性定量结果准确可靠、灵敏度高、重现性好,可满足对牛肉中兽药残留检测分析的要求。     

HPLC-MS/MS快速测定婴幼儿食品中丙烯酰胺含量

建立高效液相色谱-串联质谱仪测定婴幼儿食品中丙烯酰胺含量的方法。以13C3-丙烯酰胺为同位素内标,4%三氯乙酸水溶液作为提取液,经Na Cl盐析,乙腈萃取净化,通过高效液相色谱-串联质谱仪多反应监测模式进行测定,内标法定量。该方法的线性范围为12.24 ng/m L~612 ng/m L,相关系数r20.999 9,检出限为7μg/kg,定量限22μg/kg。3种婴幼儿食品及辅助食品中丙烯酰胺的加标回收率为96.5%~104.2%,相对标准偏差为0.9%~2.5%。本方法具有操作简便、准确率高、重现性好等优点,可应用于多种婴幼儿食品中丙烯酰胺含量的测定。     

HPLC-MS/MS测定大豆中虫酰肼残留量

建立了大豆中虫酰肼残留量测定的高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)检测方法。样品中残留的虫酰肼用酸性乙腈匀浆提取,提取液经N-丙基乙二胺(PSA)、十八烷基硅烷(ODS)和石墨化炭黑净化,用反相高效液相色谱柱分离后进行质谱分析检测和确证,外标法定量。虫酰肼的浓度在0.0004μg/mL~0.5000μg/mL范围内时,线性关系良好,虫酰肼相关系数(r2)为0.9933。在0.001mg/kg~0.500mg/kg浓度范围内,样品平均加标回收率在82.00%~107.02%之间,相对标准偏差为5.22%~8.71%。最低检出限为0.001mg/kg。     

HPLC-MS/MS测定猪肉和猪肝中氯霉素残留量的研究

建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)检测猪肉和猪肝中氯霉素药物残留的分析方法。样品经4%的氯化钠溶液和乙腈提取并沉淀蛋白质,正己烷脱脂净化,乙酸乙酯液液萃取,再浓缩定容,上HPLC-MS/MS仪器,用Syncronis C18柱分离,以乙腈-水(40∶60)作为流动相,采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式,多反应监测(MRM)方式检测,用氯霉素-D5作内标物来定量。在该试验条件下,氯霉素在1～15ng/mL浓度呈良好的线性关系,r=0.999 2,最低检出浓度为0.1μg/kg,样品的加样回收率在90.0%～110.0%,重复性好RSD<3.0%。该方法能对猪肉和猪肝中氯霉素残留进行定性及定量分析,方法精密度较好、准确度较高、选择性好,结果满意。