制备富含n-3多不饱和脂肪酸的磷脂

以Novozym435为工具酶，在正己烷体系里，使大豆粉末磷脂和n-3多不饱和脂肪酸EPA与DFIA发生酸解反应，制备了结构化磷脂。探讨了温度、时间、加酶量（基于磷脂质量）、底物浓度（磷脂／正己烷）、加水量（基于酶质量）、底物摩尔比（多不饱和脂肪酸／磷脂）对结构化磷脂制备的影响，得出较优条件为：温度50℃、时间60h、加酶量15％、底物浓度20％、加水量3％、底物摩尔比5：1。在此条件下接到磷脂上的EPA和DHA的含量之和可达21．56％。     

酶法催化乙酯甘油酯酯交换制备富含EPA和DHA的甘油酯

采用国产固定化假丝酵母脂肪酶,催化乙酯型和甘油酯型鱼油酯交换制备富含EPA和DHA的甘油酯型鱼油,得到EPA和DHA总量超过45%的甘油酯。以5g甘油酯型鱼油为反应底物之一,考察了反应温度、时间、酶加量、底物质量比及加水量五个因素对酯交换反应的影响,利用正交实验优化,得到最佳反应条件为:反应温度60℃,反应时间24h,底物质量比为5:4,加酶量为80U,不向反应体系中加入水分。在该条件下得到的甘油酯中EPA和DHA的含量分别为33.40%和13.10%,并且脂肪酶重复利用7次仍能达到工艺目标。     

酶法制备n-3多不饱和脂肪酸型磷脂的工艺

研究了无溶剂体系中固定化磷脂酶A1催化大豆磷脂与乙酯型鱼油进行酯交换反应,制备n-3多不饱和脂肪酸型磷脂的工艺。考察了反应温度、反应时间、底物比(乙酯型鱼油与磷脂的质量比)以及加水量的影响,得到了较优的反应条件。实验结果表明,加酶量(按大豆磷脂的质量计算)20%,底物比8∶1,底物总质量5.0g,加水量55μL,55℃反应12h时,所得产物中EPA和DHA的含量分别为8.0%和17.8%。     

固定化磷脂酶A催化制备DHA型磷脂

以磷脂酰胆碱(PC)富集物和二十二碳六烯酸(DHA)浓缩液为底物,正己烷为反应介质,在固定化磷脂酶A1(PLA1)的催化作用下,制备DHA型磷脂(PL-DHA)。研究了底物摩尔比、加酶量、溶剂用量、反应温度、水活度、反应时间对PL-DHA制备的影响。通过条件优化,确定最佳条件为:DHA浓缩液和PC的摩尔比为4∶1,加酶量为2种底物总质量的20%,溶剂用量为4 m L,反应温度为40℃,反应时间为2 h。经气相色谱定量分析,得到的磷脂中DHA的含量为17.7 mg/g PL,并用棒状薄层色谱火焰离子检测器(TLC-FID)分析了PC含量随反应的变化。     

固定化磷脂酶A1催化制备DHA型磷脂

以磷脂酰胆碱(PC)富集物和二十二碳六烯酸(DHA)浓缩液为底物,正己烷为反应介质,在固定化磷脂酶A1(PLA1)的催化作用下,制备DHA型磷脂(PL-DHA)。研究了底物摩尔比、加酶量、溶剂用量、反应温度、水活度、反应时间对PL-DHA制备的影响。通过条件优化,确定最佳条件为:DHA浓缩液和PC的摩尔比为4∶1,加酶量为2种底物总质量的20%,溶剂用量为4 m L,反应温度为40℃,反应时间为2 h。经气相色谱定量分析,得到的磷脂中DHA的含量为17.7 mg/g PL,并用棒状薄层色谱火焰离子检测器(TLC-FID)分析了PC含量随反应的变化。     

米曲霉脂肪酶催化鱼油酯酯交换制备高含量EPA/DHA甘油酯的研究

利用米曲霉脂肪酶催化甘油酯型鱼油和乙酯型鱼油的酯酯交换反应制备高含量EPA/DHA甘油酯,考察了底物摩尔比、反应温度、酶添加量和摇床转速对酶催化反应的影响,得到了最优酶催化反应条件:甘油酯型鱼油与乙酯型鱼油摩尔比1∶3,酶添加量14%,反应温度70℃,摇床转速150 r/min。在最优的酶催化反应条件下反应18 h,产物甘油酯型鱼油EPA和DHA含量可达到39.72%。在优化条件下对米曲霉WZ007菌丝体重复使用6次,甘油酯型鱼油产品中的EPA和DHA含量仍保持在34.51%。     

磷脂酶A_1催化水解大豆磷脂制备溶血卵磷脂的研究

以价格相对低廉的磷脂酶A_1作为催化剂水解大豆磷脂制备溶血磷脂产品,反应体系简单,获得亲水性更好的溶血磷脂产品,拓展大豆磷脂在食品乳化剂中的应用范围。首先通过单因素试验研究反应温度、加水量、加酶量、反应时间等对溶血卵磷脂含量变化的影响,并在此基础上通过正交试验优化得出最佳制备条件为:大豆磷脂100g,反应温度65℃,加水20g[加水量20wt-%(底物质量)],加酶量120μL(加酶量12 U/g),反应时间80 min,获得的改性磷脂中溶血卵磷脂的含量可达9.87%。研究表明,加酶量对溶血卵磷脂含量变化影响最为显著,其次为反应时间、加水量、反应温度。     

脂肪酶催化乙酯甘油酯酯交换制备富含EPA和DHA的甘油三酯

采用脂肪酶催化乙酯型鱼油和甘油酯型鱼油进行酯交换制备富含EPA和DHA的甘油三酯。对脂肪酶进行了筛选,并确定了两种脂肪酶TLIM和K酶用于后续研究。应用填充床反应器作为反应装置,采用正交试验对影响酯交换反应的几个主要因素条件进行了优化,得到了反应的最佳条件为:以K酶为催化剂,反应温度40℃,加酶量6%,反应时间18 h,底物摩尔比2.0∶1.0。同时,也得到了以TLIM酶为催化剂,获得最高含量EPA和DHA反应的最佳条件。     

有机相酶促粉末磷脂制备溶血磷脂的研究

选用磷脂酶A1为工具酶,以响应面为数值分析方法,在正己烷有机相中进行了大豆粉末磷脂水解制备溶血磷脂研究。探讨了反应时间,反应温度,加酶量,底物浓度,加水量,pH对其反应的影响。结果表明,溶血磷脂制备优化条件为:反应时间12.1 h,反应温度45℃,加酶量3%,底物浓度20.8%,加水量23.8%,pH 6。该条件下验证得溶血磷脂酸值(KOH)为77.8 mg/g。所得产物中磷脂酰胆碱和1-酰基-溶血磷脂酰胆碱含量分别为15.51%和3.99%,且2-酰基-溶血磷脂酰胆碱相对含量为19.6%。     

酶催化大豆磷脂酸解的研究

选用固定化脂肪酶Lipozyme TL IM为工具酶,在正己烷中进行了酶促磷脂的酸解试验。得到优化条件为:反应时间48h;加酶量25/;反应温度58℃;底物摩尔比4/1(亚麻酸/磷脂);加水量3/;磷脂与溶液比25/。该条件下验证得磷脂中亚麻酸含量为17.12/。     

偏甘油酯脂肪酶Lipase G50催化酯化法制备甘油二酯

利用偏甘油酯脂肪酶Lipase G50催化甘油和脂肪酸酯化反应合成甘油二酯.探讨了酶加量、底物摩尔比、反应温度及加水量对酯化反应的影响.结果表明最佳反应条件为:脂肪酶Lipase G50加量为350 U/g,甘油和脂肪酸的摩尔比5∶1,加水量为底物总质量的5％,反应温度30℃,反应时间24h.在最佳反应条件下脂肪酸的酯化率为75.02％,甘油二酯的含量达到44.74％,产物中没有甘油三酯生成.     

脂肪酶催化大豆磷脂制备溶血磷脂的研究

以脂肪酶Novozym 435为催化剂,正己烷为溶剂,探讨了以大豆磷脂为原料制备溶血磷脂的影响因素,并得到最佳工艺条件:底物浓度为25%(W/V)、加水量20%、反应温度为51℃、加酶量为6.6%.该条件下磷脂水解后的酸值可达到77.8mgKOH/g.     

酶法催化制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯

研究了两步酶法催化制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯工艺。首先利用脂肪酶Lipozyme 435催化1-十八烷氧基甘油和DHA乙酯合成1-十八烷氧基-2,3-二DHA烷氧基甘油二酯(DEAG1),然后利用脂肪酶Lipozyme RM IM催化油酸乙酯和DEAG1进行酯交换反应制备1-十八烷氧基-2-DHA-3-油酸烷氧基甘油二酯。通过单因素实验研究了反应温度、反应时间、底物摩尔比和加酶量对酯交换反应的影响,得到了最佳工艺条件。结果表明:在反应时间48 h、DHA乙酯与1-十八烷氧基甘油摩尔比2∶1、加酶量为底物总质量的10%、反应温度50℃条件下,合成的DEAG1含量最高,为75.41%;在反应时间12 h、油酸乙酯与DEAG1摩尔比3∶1、加酶量为底物总质量的7%、反应温度60℃条件下,Sn-3位油酸结合率为30.23%,烷氧基甘油二酯总含量为80.49%。     

己烷体系中磷脂酶A1催化卵磷脂乙醇解制备溶血卵磷脂的研究

在己烷体系中,采用磷脂酶A1催化卵磷脂乙醇解制备溶血卵磷脂。首先通过单因素试验分别考察了加酶量、加水量、底物比、温度和溶剂比对卵磷脂乙醇解制备溶血卵磷脂的影响,并在此基础上利用响应面法对反应工艺进行了优化。最终确定最佳工艺条件为:卵磷脂1.5 g,加酶量40μL/g(磷脂酶A1/卵磷脂),加水量25μL/g(水/卵磷脂(PC)),底物比:1∶3(PC/无水乙醇,mol/mol),温度30℃,溶剂比:1∶2(PC/正己烷,W/V),反应时间3.55 h,溶血磷脂转化率达98.3%。结果表明,磷脂酶A1可以催化磷脂酰胆碱乙醇解反应制备溶血磷脂酰胆碱。     

酶法制备米糠抗氧化生物活性肽的最佳条件的研究

以木瓜蛋白酶为工具酶,在水相体系里水解米糠蛋白,制备具有抗氧化能力的生物活性肽,以其对OH.自由基的清除率为指标,利用响应面试验方法,探讨了温度、时间、加酶量（基于米糠质量）、pH值以及底物浓度对抗氧化生物活性肽制备的影响,所得的最佳反应条件为：温度56℃,时间6.3h,加酶量1.1%,pH值8.7,底物浓度4.83%。研究结果表明：在此条件下制备的米糠生物活性肽对羟自由基具有良好的清除能力。     

Lipozyme RM IM催化大豆卵磷脂与棕榈硬脂酯交换

为了得到富含棕榈酸的卵磷脂,研究了正己烷溶剂体系下Lipozyme RM IM催化大豆卵磷脂与棕榈硬脂的酯交换反应。通过单因素实验,探讨了大豆卵磷脂质量浓度、底物摩尔比、加水量、加酶量和温度等对酯交换过程中酯交换量和卵磷脂回收率的影响,并采用响应面法对该酯交换反应的条件进行了优化。得到的最佳工艺条件为大豆卵磷脂质量浓度0.3 g/m L(大豆卵磷脂在加入的正己烷中的质量浓度),加酶量25%(以底物总质量计),加水量4%(以大豆卵磷脂质量计),底物摩尔比1∶2(大豆卵磷脂中脂肪酰基与棕榈硬脂中脂肪酰基摩尔比),温度46.7℃,时间27.4 h;在最佳工艺条件下,酯交换量可达19.8%,卵磷脂回收率为50.6%。     

酶法全酯化合成富含EPA/DHA甘油酯工艺研究

以富含EPA/DHA的脂肪酸为底物,采用两步酶法合成富含EPA和DHA的甘油酯。首先,以T1脂肪酶为催化剂催化富含EPA/DHA的脂肪酸和甘油反应;在最优条件为:反应温度40℃,水分添加量为底物混合物的3%、甘油与脂肪酸摩尔比3∶1和酶添加量50 U/g底物混合物时,富含EPA/DHA的脂肪酸的转化率达到62%以上,此时产物中甘油三酯、甘油二酯、甘油单酯的质量分数分别为10.52%、38.15%、25.64%。将游离酶催化酯化反应产物中的油相回收,利用自制的固定化CALB(LipozymeCALB L固定于环氧树脂ECR8285上)为催化剂,在真空条件下继续催化未反应的脂肪酸与偏甘油酯(甘油单酯和甘油二酯)继续酯化反应12 h,此时产物中甘油三酯、甘油二酯和甘油单酯的质量分数分别达到38.34%、51.02%、10.63%,没有检测到脂肪酸的存在。     

超临界体系酶法催化甘油解制备甘油二酯的研究

对在CO2超临界体系酶法催化甘油解反应制备甘油二酯进行研究,考察了底物大豆一级油／甘油的摩尔比、反应温度、加酶量、加水量、时间和搅拌速度等因素对甘油二酯含量的影响。通过单因素与正交实验,确定了最优工艺条件为：大豆一级油与甘油摩尔比2：1,反应温度65℃,加酶量2．5％,甘油含水量1％,反应时间7h,搅拌速度120r／min,得到反应产物中甘油二酯含量为70．2％,其中1,3-甘油二酯含量迭56．2％。与常规甘油解相比,甘油二酯含量要高出7％左右,其中1,3-甘油二酯含量要高出5％左右,并且,时间减少2h左右。     

两步酶法合成富含EPA/DHA甘油酯的研究

采用两步酶法合成富含EPA/DHA的甘油酯。首先利用游离脂肪酶催化富含EPA/DHA的脂肪酸与甘油进行酯化反应,在水添加量为底物混合物质量的3%、脂肪酸与甘油摩尔比1∶3和酶添加量为底物混合物质量的1%时,酯化反应达到平衡时富含EPA/DHA脂肪酸的酯化率可以达到67%左右。再将游离脂肪酶催化酯化反应产物中的油相回收,利用Novozym 435为催化剂,在真空状态下继续进行酯化反应6 h,富含EPA/DHA脂肪酸的酯化率可以达到96.4%,甘油酯的组成为甘油三酯52.07%、甘油二酯41.9%。     

酶法富集小黄鱼内脏鱼油中EPA和DHA甘油酯

目的：以小黄鱼内脏精炼鱼油为原料,通过脂肪酶选择性水解法富集二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）甘油酯和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）甘油酯。方法：采用气相色谱峰面积外标法定量测定EPA和DHA甘油酯总含量。通过单因素和响应面试验,考察反应时间、pH值、反应温度、加酶量等因素对富集效果的影响。结果：确定最佳工艺条件为反应时间4 h、pH 8.0、反应温度30 ℃、加酶量1.0%,在此条件下,EPA和DHA甘油酯总含量为21.65%,且4 个因素对EPA和DHA甘油酯富集的影响依次增强。结论：富集后鱼油理化指标和感官评价均优于精炼鱼油,EPA和DHA甘油酯总含量是富集前的1.74 倍,获得了天然的EPA和DHA甘油酯。