Latrunculin B处理后青杄花粉管微丝骨架和细胞超微结构的观察

本文应用荧光探针标记技术和透射电子显微镜研究微丝抑制刺(latrunculin b,LATB)处理青杄花粉管后,对其微丝骨架和超微结构的影响.结果表明:LATB剂量依赖性地抑制青杄花粉萌发和花粉管生长;应用荧光探针FTTC-鬼笔环肽标记花粉管中的微丝,发现用正常培养基培养的花粉管中,束状的F-actin以与花粉管长轴平行的方向排列,从花粉管基部一直延伸到花粉管亚顶端,而LATB处理导致微丝的解聚.通过透射电镜观察发现,LATB处理使花粉管顶端的透明区消失,顶端区域被一些空泡、脂粒等占据,线粒体膜破裂,高尔基体片层断裂成泡状结构以至解体.上述研究结果表明:微丝抑制荆LATB通过破坏花粉管微丝的组装和超微结构影响青秆花粉萌发及花粉管生长,因此微丝在青秆花粉萌发、花粉管极性生长模式的建立和维持过程中起重要作用.     

'秦冠'苹果花粉培养及微丝骨架的变化

以'秦冠'苹果花粉为试材,采用花粉离体培养法,研究了不同培养基组分以及温度对苹果花粉萌发的影响.结果表明:(1)蔗糖和硼酸在一定质量浓度范围内,对苹果花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定质量浓度时则起抑制作用.秦冠苹果花粉最适的培养基为20%蔗糖和0.01%硼酸,花粉的萌发率可以达到60%.在此基础上,以Alexa Fluor 488phalloidin作为肌动蛋白微丝的探针,运用激光共聚焦显微镜技术,观察了苹果花粉萌发过程中微丝骨架的分布变化动态;(2)在未水合的苹果花粉粒中,均匀分布着短小弯曲、颗粒环形微丝.在水合而未萌发的的花粉中,微丝呈网状分布在胞质中,萌发沟部分肌动蛋白束网络较致密,中央胞质部分较疏松.花粉萌发后,微丝转变为平行排列,向花粉管伸长的方向延伸聚集,与花粉管纵向平行排列;(3)生长异常的花粉管内其微丝状态也异常.     

免疫抑制剂对浆细胞超微结构和功能影响的观察

浆细胞常分布于开放性的呼吸道和消化道的固有膜内,也常在淋巴结髓索和生发中心中发现,它是机体内重要的免疫细胞之一,也是机体内抗体合成的主要场所,所合成的免疫球蛋白参于机体的体液免疫,是分子免疫学的重要基础,各种生理和病理过程,不仅影响到细胞的数量和超微结构,而且影响到免疫球蛋白的合成和分泌。到目前为止,浆细胞如何合成和分泌免疫球蛋白的饥理尚不完全清楚。各种不同的免疫刺激剂和抑制剂(如肾上腺皮质激素和环孢素A等)对它结构和功能的影响,也知之不详,这方面的研究不仅有重要的理论价值,而且在移植免疫学和免疫治疗学上都有着实践意义,所以这些领域的研究颇为活跃。本文主要研究为防止异体移植器官排斥,长期使用免疫抑制剂对体内浆细胞超微结构和功能的影响。     

银杏小孢子和花粉发育过程的超微结构观察

利用透射电子显微镜技术对银杏(Ginkgo bilobaL.)小孢子发生与花粉发育过程进行超微结构观察.结果表明:(1)在小孢子母细胞减数分裂期间,细胞内发生了“细胞质改组”,主要表现在核糖体数量在历经不同发育时期逐渐减少,质体和线粒体形状与结构发生了规律性变化.第一次减数分裂完成后,两子核间无胼胝质壁沉积,而是被内质...     

用鬼笔环肽予处理保存花粉管中微丝超微结构的方法

近年来荧光标记的鬼笔环肽(F1—Ph)作为微丝的荧光探针已被广泛应用,有十多种植物的花粉管和花粉粒中的微丝用这种方法作过观察。此外,有少数电镜工作,阐明花粉管中的微丝与细胞器有联系。然而,花粉管中的微丝常因用常规电镜固定的方法不能保存下来,以致使这方面的研究受到限制。本研究根据鬼笔环肽有稳定微丝的作用,试验了先用鬼笔环肽予处理,然后进行常规透射电镜固定的方法,结果对微丝的保存效果是显著的。     

银杏花粉萌发生长与分枝式花粉管形成的观察

本研究采用半薄切片法和扫描电镜等技术对银杏（Ginkgo bilobaL.）花粉管的体内萌发与生长以及花粉的离体培养进行了观察,结果表明：（1）银杏花粉粒通过传粉滴收缩后到达胚珠珠孔处,并经珠孔道进入贮粉室内停留,约7 d后花粉粒开始萌发;（2）贮粉室内的花粉最初萌发出的花粉管与花粉粒的四细胞轴几乎垂直,表现出明显的侧向萌发特征。初始花粉管在贮粉室内的生长方向无规律,有的通过一定的贮粉室空间向较远的珠心组织细胞间隙生长,有的直接进到较近的珠心组织细胞间隙,花粉管的生长不损伤珠心组织细胞;（3）花粉离体培养过程中会迅速发生水合作用,花粉粒由船形变为圆球形。48 h后花粉外壁脱落,管细胞膨大,花粉管自管细胞膨大处萌发。随着花粉管的生长,管细胞核移动进入花粉管内,而生殖细胞仍留在花粉粒内。伸长的花粉管可分为淀粉粒区和透明区,花粉管末端易形成多种类型的分枝。花粉管内原生质呈喷泉状流动。     

青扦花粉萌发及花粉管生长过程中的钾离子流及BaCl2和TEA的影响

本文以裸子植物青扦花粉为材料,运用非损伤、选择性电极技术探究了花粉水合、萌发及花粉管生长过程中的钾离子流,以及抑制剂处理后的影响.研究结果显示:(1)钾离子通道抑制剂BaCl2和TEA(氯化四乙胺)处理推迟花粉萌发;(2)BaCl2和TEA处理后,青扦花粉萌发和花粉管伸长均受到抑制;(3)选择性电极检测结果显示对照花粉不同发育时期钾离子均内流,即花粉水合、萌发及花粉管生长均需大量的钾离子.BaCl2和TEA处理后,花粉的钾离子流动态也随之发生改变.培养3~9 h,钾离子呈明显的外流,12~21 h钾离子内、外流基本平衡,24 h钾离子内流.抑制剂处理导致的钾离子流的紊乱使得花粉不能正常萌发、花粉管不能正常生长.因而,钾离子在青扦花粉萌发及花粉管生长过程中具有重要的调控作用.     

外源硼和钙对“索邦”百合花粉萌发和花粉管生长的影响

本文采用花粉液体培养法研究硼、钙离子对"索邦"百合花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明:百合花粉萌发和花粉管生长需要适宜的外源硼酸,适宜浓度为1mmol/L,低浓度促进花粉萌发和花粉管生长,而浓度过高则起抑制作用。适量的外源钙离子有利于花粉萌发和花粉管生长,适宜浓度为1mmol/L,高离子浓度抑制花粉萌发和花粉管生长。     

刺参体腔细胞的超微结构观察

应用透射电镜观察刺参（Apostichopus japonicus）体腔细胞的超微结构,结果显示刺参体腔细胞可分为四种类型：大颗粒细胞、小颗粒细胞、透明细胞和淋巴样细胞。大颗粒细胞呈圆形,直径约5～10μm,胞内充满1．5～3μm的高电子密度颗粒;小颗粒细胞圆形,直径约7—8μm,细胞颗粒0．5—1．5μm;透明细胞形状不规则,直径约5～7μm,胞质较透明,细胞核大、着色浅,细胞表面常有伪足形成;淋巴样细胞多呈圆形,直径5μm左右,细胞核大、着色深,胞质较少。     

青杄花粉管生长过程中囊泡运输与Ca~（2＋）分布的细胞学研究

应用激光扫描共聚焦显微镜技术,研究并同时定位了Ca2＋及分泌囊泡在青杄花粉管内的空间分布模式与对应关系。利用钙离子特异性荧光探针Fluo-3及分泌囊泡动态变化的指示性染料FM4-64对正在生长的花粉管进行的双重标记显示,青杄花粉管细胞质内Ca2＋从距顶端40～50μm处呈现典型梯度分布,花粉管顶端浓度最高;FM4-64荧光染料主要分布在花粉管质膜周围及花粉管顶端大约15～20μm的地方,而亚顶端区荧光较弱;在正在改变生长方向的花粉管中,FM4-64荧光主要集中在弯曲部位。对二者及与Rop GTPases在花粉管内的空间分布及与功能的关系进行了讨论。     

去细胞神经移植后再生神经纤维超微结构的观察

应用化学方法去除神经中的细胞成分并经γ射线辐照后进行家兔同种异体移植实验,分别对移植后6、8、12周再生的神经进行超微结构观察。结果表明：去细胞神经中的雪旺氏细胞成分基本缺失,仅残存一些膜状结构碎片。有髓神经纤维髓鞘明显破坏,神经纤维外周胶原纤维及其组成的膜结构基本保持完整。移植术后植入物内可观察到增生的雪旺氏细胞包裹再生的轴突形成有髓神经纤维和无髓神经纤维,其轴突内可见线粒体、神经微管、微丝。再生神经纤维的形态、结构及直径均与正常神经相似。表明植入物逐渐被新生的神经纤维所取代。     

超声治疗前后外阴白色病变的超微形态比较研究

目的：了解超声治疗对外阴白色病变患处上皮细胞及真皮组织超微结构形态的影响。方法：30例患者分别做治疗前及治疗后3—6月的外阴皮肤组织活检,用光镜和透射电镜观察。结果：治疗前,表皮显示不同程度的上皮增生或萎缩并伴过度角化;细胞间隙增大,桥粒减少;细胞内黑色素颗粒减少,线粒体内室肿胀和局部胞质溶解;黑色素细胞少见;真皮内毛细血管减少,管腔多呈皱缩状;表皮及真皮内常见淋巴细胞浸润。治疗后,病变皮肤组织呈不同程度恢复,表皮细胞排列整齐,桥粒及胞质内黑色素颗粒均有不同程度增加,基底层常见黑色素细胞;真皮内成纤维细胞多见,毛细血管增多且管腔形态正常;浸润的淋巴细胞明显减少。结论：超声治疗可使患处上皮细胞及真皮组织的超微结构和色素代谢趋于恢复正常。     

乙型病毒性肝炎LAL的流式细胞检测与电镜观察

肝脏相关淋巴细胞 ( Liver- associated lymphocytes,LAL)是指一类不参与血液循环 ,粘附于肝窦壁的淋巴细胞群。在肝内诸多因素影响下 ,它的形态 ,表型均有特异表现 ,作为肝脏的第四类非实质细胞 ,广泛地参与肝脏疾病的始终。本文运用流式细胞术和电镜方法从形态、表型角度来分析 LAL在乙型病毒性肝炎中的表现。材料与方法　参照第五次全国会议修定的肝炎临床诊断标准 ,选择乙肝患者 2 3例。 ( 1 )流式细胞检测方法 :将新鲜肝穿标本 1 mm3制备成实体肝细胞悬液 ,加入鼠抗人 CD3FITC/CD5 5 +1 6 PE单克隆抗体进行免疫标记后 ,使用 FA…     

Modification of physicochemical properties of actin filaments suppresses cell fragmentation in the execution phase of staurosporine-induced apoptotic processes

Effects of jasplakinolide (JSP), a stabilizer of F-actin, and latrunculin A (LTA), a destabilizer of F-actin, on a series of events occurring in the execution phase of staurosporine (STS)-induced apoptotic processes were studied using human osteosarcoma 143B cells. Time-dependent apparent increases of the population of cells with collapsed membrane potential of mitochondria (Delta Psi(m)) caused by STS treatment were not due to actual decreases in the Delta Psi(m) per cell, but due to the fragmentation of cells resulting in decreases in the number of active mitochondria per cell. Decreases in the Delta Psi(m) in fragmented cells occurred late in the execution phase. Both JSP and LAT failed to prevent STS-induced release of cytochrome c from mitochondria followed by the activation of caspases 3 and 9, the cleavage of poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) and apoptotic nuclear fragmentation. However, both drugs prevented STS-induced apoptotic cell fragmentation and decreases in the Delta Psi(m). These results indicate that physicochemical states of actin filaments play a certain role in the execution phase of STS-induced apoptotic processes.     

颅内血管内栓塞治疗的超微结构电镜观察

应用扫描电镜及透射电镜对三种不同颅内血管栓塞材料进行颅内动静脉畸形（AVM）和动脉瘤治疗后的手术标术进行了超微结构的观察和比较。研究结果显示：可控性钨制电解式微弹簧圈栓塞效果理想，血栓形成完全；丝线栓因栓形成较差，而氰基丙烯酸正丁酯（NBCA）则对血管组织可引起慢性炎症及异物吞噬反应。本文对颅内AVM和动脉瘤等血管内栓塞治疗选择栓塞材料提供一定参考价值。     

Electron microscopic visualization of actin filaments in the early embryo of Drosophila melanogaster: the use of phalloidin and tropomyosin

Various specimen preparations for thin-section electron microscopy were tested to better preserve and visualize actin filaments in the cortex of the early embryos of Drosophila melanogaster. When embryos were treated with phalloidin prior to fixation, many actin filaments were observed in their cortex comparable to the staining with fluorescently labeled phalloidin in light microscopy. Then we used various fixatives containing phalloidin. As far as we examined, actin filaments were best preserved in the specimen fixed with 2.5% glutaraldehyde, 2% paraformaldehyde in 0.1 M sodium phosphate buffer or in 0.1 M PIPES buffer (1 mM EGTA and 1 mM MgCl2) containing 10 microM phalloidin and 0.1% saponin. When embryos were glycerinated and then treated with tropomyosin before fixation, actin filaments were well visualized as thicker, uniform-sized filaments, though the number of filaments decreased probably owing to glycerination. This suggests that, like heavy meromyosin and its subfragment-1, this protein may protect actin filaments from being disrupted by chemical fixation. Using these improved fixation procedures, we successfully examined the distribution of actin filaments in the Drosophila embryo cortex during cellularization. These methods may be applicable to stabilize labile actin filaments in other types of cells.