亚硒酸钠与白藜芦醇联合应用对肺癌细胞的协同效应分析

目的:观察亚硒酸钠与白藜芦醇单独及联合应用对肺癌细胞的影响,并通过细胞周期探讨其作用机理。方法:用四甲基偶氮唑盐法检测亚硒酸钠和白藜芦醇单独及联合应用对细胞增殖和存活的影响;用流式细胞术测定细胞的凋亡率及细胞周期。结果:亚硒酸钠和白藜芦醇对肺癌细胞A549均有拮抗作用,且随浓度的增加,拮抗效果越显著,当亚硒酸钠浓度大于等于5μmol/L时,拮抗效果极显著(P0.01);当白藜芦醇浓度大于等于65μmol/L时,拮抗效果极显著(P0.01)。亚硒酸钠对A549细胞的半致死率(lethal dose of 50%,LD_(50))为4.759μmol/L,白藜芦醇对A549细胞的LD_(50)为45.24μmol/L。然而亚硒酸钠和白藜芦醇联合用药作用于A549细胞的拮抗效果优于单独用药,且低剂量的亚硒酸钠和白藜芦醇联合就能发挥出高剂量亚硒酸钠对A549细胞的拮抗作用效果,有效地降低了亚硒酸钠对细胞的毒副作用。另外,亚硒酸钠联合白藜芦醇作用可以阻滞A549细胞G0/G1期,最终导致细胞凋亡。     

硒对啤酒酵母细胞生长的影响

目的研究不同硒浓度对啤酒酵母细胞生长的影响，确定适宜的硒添加量。方法用分光光度计测定不同硒浓度时酵母细胞培养液在不同时间的吸收度，绘制生长曲线，比较硒浓度不同时酵母细胞的生长情况。结果亚硒酸钠的添加浓度小于20μg／mL时，有促进酵母菌生长的作用；亚硒酸钠浓度高于30μg／mL时，对酵母菌生长有明显的抑制作用；亚硒酸钠浓度在20μg／mL时酵母菌可以正常生长。结论亚硒酸钠的添加浓度应在20μg／mL左右。     

苦荞异槲皮苷对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响

从苦荞中提取制备异槲皮苷,研究其对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡、迁移和细胞周期的影响。将异槲皮苷作用于人胃癌SGC-7901细胞和人肾上皮细胞系293T,通过噻唑蓝法检测异槲皮苷对其增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamino-2-phenyl indole,DAPI) 荧光染色法观察细胞核的形态学变化;划痕擦伤迁移实验检测异槲皮苷对SGC-7901细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测异槲皮苷对SGC-7901细胞凋亡及细胞周期的影响。结果表明：苦荞异槲皮苷可以抑制SGC-7901细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性,当用100 μmol/L异槲皮苷作用细胞48 h后,对SGC-7901细胞的增殖抑制率达到35.92%, 而对人肾上皮细胞系293T的增殖抑制率仅为 3.15%;DAPI荧光染色法观察异槲皮苷处理细胞后,染色体凝聚,有凋亡小体产生;划痕擦伤实验显示,异槲皮苷能抑制SGC-7901细胞的迁移;流式细胞术检测结果表明,异槲皮苷可使G1和S期细胞减少,G2/M期细胞增多,且细胞凋亡率明显增加。综上所述,苦荞麦异槲皮苷能够诱导SGC-7901细胞发生凋亡,阻断细胞周期并抑制细胞增殖和迁移。     

泥鳅体表粘液多糖诱导SGC—7901细胞凋亡机理研究

探讨泥鳅体表粘液多糖（PML）对人胃癌SGC-7901细胞凋亡作用和机制。采用Sevege法对PML进行分离、纯化,用紫外分光光度法、凝胶色谱法和高效液相色谱法对其鉴定后作用于SGC-7901细胞中。采用MTT法鉴定PML对该细胞的抑制作用,光显下观察细胞形态结构变化,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western Blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达变化。结果表明,用Sevege法提取PML纯度高、成分单一。MTT法,10～270μg/mL PML处理SGC-7901细胞24、48、72h,抑制作用随PML浓度和时间增加而逐渐增强。流式细胞术检测细胞凋亡,凋亡率随PML浓度和作用时间增加而逐渐增高。Western Blot检测,细胞经10～270μg/mL PML处理24、48h后Bcl-2和Bax蛋白表达随浓度和时间增加分别增强和减少,说明PML对SGC-7901细胞凋亡有促进作用,其机理与对Bcl-2与Bax基因的调控有关。      

番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用及其机理研究。方法:番茄红素及不同浓度番茄汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48h;采用生长曲线及噻唑蓝(MTT)法检测番茄汁、番茄红素对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,通过原位(缺口)末端标记法(TUNEL)法观察凋亡细胞的形态结构变化,流式细胞仪检测细胞凋亡峰。结果:番茄汁、番茄红素能显著抑制人前列腺癌PC-3细胞生长;TUNEL方法检测呈阳性;流式细胞仪分析图上出现典型的凋亡细胞峰。以上各指标中,番茄汁随着浓度增大其作用加强;低剂量组的作用虽比番茄红素组差,中剂量组的作用与番茄红素组相比无差别,高剂量组的作用比番茄红素组强。结论:番茄汁对抗人前列腺癌PC-3细胞的作用,除番茄红素外,可能还存在其他抗癌成分的交互作用。番茄汁、番茄红素对PC-3细胞生长抑制作用的机理可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞细胞凋亡有关。     

硒对啤酒酵母细胞生长的影响

目的研究不同硒浓度对啤酒酵母细胞生长的影响,确定适宜的硒添加量。方法用分光光度计测定不同硒浓度时酵母细胞培养液在不同时间的吸收度,绘制生长曲线,比较硒浓度不同时酵母细胞的生长情况。结果亚硒酸钠的添加浓度小于20μg/mL时,有促进酵母菌生长的作用;亚硒酸钠浓度高于30μg/mL时,对酵母菌生长有明显的抑制作用;亚硒酸钠浓度在20μg/mL时酵母菌可以正常生长。结论亚硒酸钠的添加浓度应在20μg/mL左右。     

紫阳富硒茶对人肝癌细胞凋亡过程的诱导

通过运用倒置荧光显微镜和流式细胞仪观察和测定细胞形态、周期、和凋亡率的变化,从而分析紫阳富硒茶对人肝癌细胞增殖的抑制作用及其诱导凋亡途径。结果表明：紫阳富硒茶能抑制人肝癌细胞的生长,并诱导人肝癌细胞凋亡;同时随着紫阳富硒茶质量分数的增加,人肝癌细胞形态发生明显变化,细胞周期被阻滞在S期,细胞凋亡率显著增加。试验表明紫阳富硒茶能抑制人肝癌细胞增殖,通过阻滞细胞周期从而诱导细胞凋亡。     

珠母贝糖胺聚糖PG-Ⅱ诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的:探讨珠母贝糖胺聚糖PG-II诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡,从而抑制其增殖。方法:MTT法检测珠母贝糖胺聚糖PG-II对人宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用。倒置显微镜、荧光显微镜观察HeLa细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂片段,流式细胞仪定量检测细胞凋亡的百分率及对其细胞周期的影响。结果:MTT法显示PG-II可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖。倒置显微镜和荧光显微镜形态学观察可见HeLa细胞凋亡的形态明显变化。琼脂糖凝胶电泳显示PG-II作用HeLa细胞24h,出现分子质量为200bp到2000bp不等的细胞凋亡的特征性DNA梯状条带。流式细胞术测试表明:PG-II可使HeLa细胞阻滞于G1期,剂量为100mg/L作用24h阻滞作用最明显,凋亡指数为42.6%。结论:珠母贝糖胺聚糖PG-II可能通过诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡而抑制其增殖。     

霍山石斛多糖对人胃癌细胞生长的抑制作用

研究霍山石斛多糖对人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制作用,探讨多糖抗肿瘤作用与肿瘤相关基因表达之间的相关性。胃癌细胞SGC-7901生长的MTT检测表明,霍山石斛总多糖(DHP)、阴离子交换色谱水洗组分(DHP-1)及0.05 mol/L盐洗组分(DHP-2)能显著抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,并呈时间和剂量依赖性,其中以DHP-2效果最好。光学及激光共聚焦显微镜观察发现,DHP-2处理过的胃癌细胞形态固缩,凋亡显著。荧光定量RT-PCR技术检测表明,DHP-2不仅能明显下调原癌基因c-myc的表达,其表达仅为对照的42.34%,而且能显著提高抑癌基因野生型p53的表达,其表达比对照高1.04倍。结果表明:霍山石斛多糖对人胃癌细胞生长的抑制作用与其组分、浓度及作用时间相关,其可能的作用机制是多糖通过下调c-myc基因和上调p53基因的表达来发挥抑制效果。     

莲房原花青素体外抗肿瘤作用研究

目的:研究莲房原花青素(LSPC)的相对分子量分布及体外抗肿瘤作用。方法:用ESI-MS分析LSPC,MTT法检测人肺癌LETP-2、胃腺癌SGC-7901、黑色素瘤A3753种细胞增殖,采用平板集落实验测定3种癌细胞集落形成。结果:LSPC的分子量范围为290.1～1154.3,是以二聚体为主的低聚原花青素;一定浓度的LSPC对3种瘤细胞均有抑制作用,当LSPC浓度为100μg/mL作用72h时对3种瘤细胞生长抑制率分别为62.6%、49.8%、77.0%;集落形成抑制率分别为77.0%、43.2%、95.3%。结论:LSPC体外对LETP-2、SGC-7901、A3753种瘤细胞有显著的抑制作用。     

α-乳白蛋白油酸复合物对SGC-7901细胞增殖的影响

分别采用了MTT法检测细胞增殖,Hoechst33258染色观察细胞形态变化,以及电泳法观察DNA梯形条带研究经油酸诱导的牛乳α-乳白蛋白分别以不同浓度不同时间作用于胃癌SGC-7901细胞对其增殖作用的影响。结果表明,α-乳白蛋白油酸复合物对胃癌SGC-7901细胞的确有明显的促凋亡作用。     

牛α-乳白蛋白-油酸复合物(BAMLET)对SGC-7901细胞的促凋亡作用及凋亡机制的研究

通过研究α-乳白蛋白-油酸复合物(BAMLET)对SGC-7901细胞的促凋亡作用及其对cAMP/PKA信号途径的影响来探讨BAMLET促进细胞凋亡作用的机制。方法:倒置显微镜下观测细胞形态学变化;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞的凋亡;酶联免疫试剂盒检测人胃癌细胞中cAMP和PKA的浓度变化。实验结果表明,α-乳白蛋白-油酸复合物处理细胞24、48、72h后,细胞增殖明显受到抑制,且抑制率随时间延长而增加;流式细胞仪检测药物作用细胞24、48、72h后细胞发生不同程度的凋亡且凋亡率逐渐升高。cAMP及PKA实验结果表明,cAMP的浓度在药物作用细胞20min时达到最大值且明显高于对照组、PKA的活性明显高于对照组且差异性显著。上述结果表明BAMLET能够激活cAMP/PKA信号通路,发挥其促进细胞凋亡的作用。     

龙须菜藻红蛋白对Hela细胞增殖抑制及其机制的研究

目的:探讨龙须菜藻红蛋白(PE)对人宫颈癌细胞Hela体外的抑制作用及其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度的藻红蛋白对Hela细胞增殖抑制效果。流式细胞仪和Annexin V-FITC/PI双荧光染色法观察藻红蛋白对Hela细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:PE可显著抑制Hela细胞的生长,并呈剂量-效应关系(p<0.01,r=0.84),剂量为20μg/ml,作用48h,其抑制率达70.88%,其48h的IC50值为4.12μg/ml。PE可阻滞Hela细胞从G2/M期进入S期,诱导细胞凋亡。结论:PE对Hela细胞有较强的抑制作用,其作用机制部分与诱导Hela细胞调亡有关。     

大豆异黄酮抑制胃癌细胞生长作用的研究

本实验以人胃癌SGC-7901细胞为体外实验模型,通过MTT实验,分裂指数法和集落形成实验,筛选具有较强抑制胃癌细胞生长作用的大豆异黄酮单体成分。结果表明游离形式的金雀异黄素的抑癌效果最为显著,其他形式的金雀异黄素苷和黄豆苷体外抑制细胞生长作用不明显。金雀异黄素代谢前体物鸡豆苷素亦有较显著的抑制效果,但作用迟缓。苷元形式的大豆异黄酮抑制肿瘤细胞生长作用明显强于苷类形式的大豆异黄酮,三羟异黄酮金雀异黄素是大豆异黄酮发挥生物学作用的最有效单体成分。     

菱灵颗粒有效成分的抗肿瘤作用研究

目的:研究菱灵颗粒有效成分-化合物Ⅰ在体外对Hela细胞的作用及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原法检测化合物Ⅰ对肿瘤生长抑制作用,应用光学显微镜、透射电子显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果:化合物Ⅰ对人宫颈癌细胞生长具有明显的抑制作用及诱导细胞凋亡作用,且这种作用有剂量依赖关系,化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组30h抑瘤率为52.04%、34.44%、23.72%,100、50、25、12.5、6.25、3.125mg/L剂量组30h抑瘤率显著正相关,相关系数r=0.9860(p<0.01),IC50值为10.9mg/L。透射电子显微镜对化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组受试细胞观察,均出现不同程度细胞凋亡现象,细胞核明显皱缩、染色质趋边凝聚、线粒体空化等特征。流式细胞仪检测发现凋亡峰。结论:化合物Ⅰ对Hela细胞增殖抑制作用明显并且有诱导细胞凋亡作用。