β-伴大豆球蛋白的水解研究

采用Nagano法从豆粕中分离β-伴大豆球蛋白并酶解制备水解肽,以单因素试验和正交试验确定酶解最佳条件,通过高效液相法分析β-伴大豆球蛋白水解肽的分子量分布,比较并检测了β-伴大豆球蛋白水解肽和大豆分离蛋白水解肽的体外抗氧化效果。结果显示:在20g/L的底物浓度下的最佳条件为酶和底物比10000U/g,温度55℃,pH7.5,水解时间4h,水解度为72.7%,明显高于酶解大豆分离蛋白51.4%的水解度,且水解时间更短。β-伴大豆球蛋白水解肽主要为130～1000u的短肽,占肽总量的86.3%,均一性极高。β-伴大豆球蛋白水解肽对O2-.和.OH均有清除作用,清除.OH的能力明显高于大豆分离蛋白水解肽,即β-伴大豆球蛋白的水解肽对大豆肽清除.OH的作用贡献更大。     

大豆球蛋白的水解研究

采用Nagano法从豆粕中分离大豆球蛋白,利用大豆蛋白改性酶解大豆球蛋白制备水解肽,以单因素试验和正交试验确定酶解最佳条件,通过高效液相法分析大豆球蛋白水解肽的分子量分布。结果显示:在20 g/L的底物浓度下的最佳条件为酶和底物比10 000 U/g,温度55℃,pH8.0,水解时间4 h。优组合条件下的水解度为69.6%。大豆球蛋白水解肽主要为130 u～1 000 u的短肽,占肽总量的86.5%,说明大豆球蛋白水解肽的均一性极高。     

大豆β-伴球蛋白多肽抗氧化活性研究

以大豆β-伴球蛋白为原料,利用枯草芽孢杆菌进行发酵制备抗氧化肽,研究发酵时间和浓度对大豆β-伴球蛋白肽抗氧化活性影响。结果表明,发酵40 h时,大豆β-伴球蛋白肽抗氧化活力最高,抑制自由基能力最强;在此最佳发酵时间下,当大豆β-伴球蛋白肽浓度为1.6 mg/mL时,对羟自由基清除率最大;浓度为2 mg/mL时,对超氧阴离子自由基清除能力最强。     

汉麻球蛋白酶解产物中巯基肽的含量及分布研究

采用DTT还原结合Sephadex LH-20葡聚糖凝胶层析的方法分离测定了汉麻球蛋白3种酶解产物中巯基肽的含量，测定结果显示：碱性蛋白酶>胃蛋白酶>木瓜蛋白酶。采用LC-MS-MS检测并鉴定出3种蛋白酶酶解物中巯基肽的分布和序列，结果显示：碱性蛋白酶酶解物中巯基肽数量为41个，木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解物中都是31个，来源均是Edestin2、Edestin3、清蛋白和非特征蛋白。3种酶酶解获得的麻仁球蛋白(Edestin)巯基肽大部分为亲水性的，分子质量主要分布于1 000～2 000 u,其中10个是3种酶解产物共有的，碱性蛋白酶和胃蛋白酶酶解物中有4个相同的来源于Edestin3的麻仁球蛋白巯基肽。胃蛋白酶酶解得到1个独有的源于Edestin2的麻仁球蛋白巯基肽。碱性蛋白酶酶解得到了4个独有的源于Edestin3的麻仁球蛋白巯基肽。3种蛋白酶由于作用位点和效力不同得到的麻仁球蛋白巯基肽数量和分布均有不同，但是碱性蛋白酶酶解汉麻球蛋白可以获得更多的麻仁球蛋白巯基肽，推测碱性蛋白酶可以更好地打开汉麻球蛋白中的二级及以上结构，使二硫键更多地暴露出来。     

伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对双歧杆菌增殖的影响

大豆种子的贮藏蛋白主要由2种球蛋白组成,伴大豆球蛋白(conglycinin)是其中一种,它由3个不同的亚基组成。文中对伴大豆球蛋白进行了分离纯化,并研究了其体外经过胃蛋白酶水解后的肽对双歧杆菌增殖的影响。结果表明,分离纯化的伴大豆球蛋白纯度为90.13％,可供生理功能的研究,经胃蛋白酶水解后的肽能够促进双歧杆菌的增殖,表现出一定的生物活性作用。     

伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解产物中促双歧杆菌增殖肽的分离和鉴定

大豆贮藏蛋白主要包括大豆球蛋白(Glycinin)和伴大豆球蛋白(Conglycinin),本研究采用Sephadex-G15凝胶过滤和薄层层析的方法,对伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解产物中促双歧杆菌增殖肽进行分离,所得活性组分通过毛细管HPLC及质谱进行鉴定,结果表明,分离得到促双歧杆菌增殖活性最强的组分是由性质相近的肽混合物组成,通过毛细管HPLC可以得到活性酶解肽的图谱,并通过质谱可知酶解肽主要由6-10个氨基酸残基组成。上述结果提示,伴大豆球蛋白中的生物活性物质是以无活性的形式存在于蛋白质的多肽链中,必须通过适当酶解,在一定条件下才能释放出来,发挥出各种生物学功能。     

β-伴大豆球蛋白水解产物中糖肽的分离和鉴定

本研究对大豆蛋白水解产物中含糖的肽组分进行了分离和鉴定。从大豆蛋白中分离出相对纯度为75．5％、含糖量为3．23％的B．伴大豆球蛋白后，以β-伴大豆球蛋白为底物，用Alcalase进行酶解调制大豆肽。所得大豆肽SephadexG-25凝胶过滤，得到两个组分P1和P2，分子量较大P1含糖量为8．23％。用薄板层析对这一含糖的肽组分进行了鉴定，结果表明此含糖的肽为糖结合性肽。     

猪血球蛋白营养分析与水解工艺优化及制备金属螯合肽的研究

以猪血球蛋白为原料,检测其基本营养指标和氨基酸组成,以水解度为指标,研究螯合pH、水解温度和时间等单因素的影响,进一步通过响应面法优化水解制备金属螯合肽。结果表明,猪血球蛋白具有优异的营养特征,且富含多种氨基酸;采用碱性蛋白酶水解猪血球蛋白制备金属螯合肽的最佳工艺为pH值10.69、水解温度48.50 ℃、水解时间6.76 h、底物添加量8%、酶与底物比(m_酶∶m_底物)1∶250,血球蛋白粉水解度的实测值为37.83%。采用ICP-AES检测猪血球蛋白肽螯合铁、铜、锌的量分别为343.80,11.34,4.53 μg/mL。     

大豆生物活性肽的制备及其生物活性研究

大豆蛋白活性肽是以大豆为基本原料,通过现代生物技术将大豆球蛋白转化为小分子肽,不仅有很好的加工性能,而且在体内消化吸收快,并可在组织水平上引起机体的生物学效应。通过对大豆肽的组分、生物活性,抗氧化性、发酵试验、降血脂分析功能、抗疲劳分析功能等进行分析,认为大豆肽具有良好的生物活性。     

大豆蛋白酶解过程中聚集行为的研究

主要研究了大豆β-伴球蛋白对大豆球蛋白酶解过程聚集行为的影响。在相同蛋白浓度下使用Alcalase进行酶解时,与β-伴球蛋白、大豆分离蛋白相比,大豆球蛋白聚集现象较为明显,这说明大豆蛋白酶解过程的聚集与蛋白种类有关;改变β-伴球蛋白对大豆球蛋白的添加量进行酶解时发现,β-伴球蛋白添加量越大,大豆球蛋白酶解过程的聚集程度越小,这说明β-伴球蛋白对大豆球蛋白的酶解过程的聚集有抑制作用。高效液相和SDS-PAGE结果表明上清液的分子质量大于聚集物的分子质量,聚集体主要是由分子质量小于5 ku的肽段聚集而成。