白肋烟低亚硝胺品种选育

为了弄清降低白肋烟由烟碱到去甲烟碱的转化效率对特定亚硝胺（TsNA）水平的影响，我们在肯塔基和田纳西州于2004-2005年设计了4个试验点进行研究。在4个试验点分别种植了15个白肋烟栽培品种，每个试验点为一个完整的小区，每个品种种植于亚小区，重复3次，采用裂区设计的数据分析方法。结果表明，烟碱转化、N一亚硝基降烟碱（NNN）和整个亚硝胺水平在不同的分布点和不同的品种存在极显著差异。正如预期结果，烟碱转化效率和亚硝基．去甲基烟碱（r2=0．75，Pr〉｜r｜=0．001），     

白肋烟低TSNA含量的品种筛选初探

研究了不同白肋烟品种的TSNA含量及组成、各组成成分之间以及它们与烟碱和总氮的关系。结果表明白肋烟中的TSNA主要以N-亚硝基去甲基烟碱（NNN）的形态存在,在TSNA总量中NNN含量所占比重最大,N-亚硝基新烟碱（NAT）和N-亚硝基假木贼碱（NAB）所占比重次之,4-（N-甲基-N-亚硝胺）-1（3-吡啶基）-丁酮（NNK）所占比重最小。TSNA含量在不同品种之间差异比较明显,可以将参试的15个品种分为3类,其中B21为高TSNA含量品种,Ky8959、Tn97、Ky907、20＃、21＃为低TSNA含量品种,其余品种为中等含量品种。TSNA和NNN与烟碱、总氮呈负相关,TSNA与NNN、NAT+NAB、NNK,NAT+NAB与烟碱和总氮都呈正相关,但是除了TSNA与NNN的相关性达到极显著外,其余的相关性均不显著。总之通过筛选来获得低TSNA含量的品种是可能的。      

烟碱转化为去甲基烟碱的原理研究与遗传资源开发

转化是用来描述烟草合成和贮藏尼古丁过程的术语，尼古丁是烟草中存在的主要生物碱形式，在叶片衰老和烘烤过程中，尼古丁的很大比例转化成N-去甲基化合物-去甲基烟碱，转化是一种显性性状，且具有不可逆转的特性，能使植物积累去甲基烟碱达到总烟碱量的90％。转化是白肋烟的一个特殊问题，有些品种世代间转化率可高达20％。去甲基烟碱是N’-亚硝基去甲基烟碱（NNN）的前体物，N’-亚硝基去甲基烟碱（NNN）属于烟草特有亚硝胺，就烟草而言，科学家对降低去甲基烟碱的合成方面的研究有很大的兴趣。对控制转化过程基因的了解，有助于形成新的排除白肋烟中去甲基烟碱的对策，并能从分子水平上理解去甲基烟碱的生成。新的强大的基因组技术将加快农艺学重要基因的鉴定和特性描述。为鉴定转化过程的基因资源，我们利用来源于烟草衰老叶片转化特性的等位基因的cDNA文库构建了一个表达序列标签（EST）数据库，EST数据库基因微阵表达分布，提供了鉴定尼古丁转化基因的新的机会。     

云南宾川白肋烟生物碱含量及烟碱转化率分析

为确定宾川白肋烟生物碱组成特点和品种更新改良的可行性,对云南宾川白肋烟生物碱组成和含量及不同白肋烟品种烟碱转化株比例和烟碱转化率进行了分析.结果表明:宾川白肋烟生物碱含量较低,平均含量为3.31％,与国外白肋烟相似,烟碱转化率较低,烟碱转化问题不突出,且不同试验点降烟碱与烟碱转化率表现出差异性.不同品种烟碱转化率株间分布比较,以OD911和YNBS1烟碱转化问题相对较小,平均烟碱转化率低;TN86大部分为低转化株,烟碱转化率较低;TN90的平均烟碱转化率为11.84％,其中存在10％的高转化株;鄂烟1号烟碱转化株比例较高,有16.67％的高转化株,平均烟碱转化率达30.51％,需要进行系统选择和品种改良.     

烟碱向降烟碱转化对烟叶麦斯明和TSNA含量的影响

以白肋烟TN90为材料,研究了非转化株、低转化株及高转化株烟叶样品的烟碱转化程度及降烟碱含量与烟叶麦斯明和烟草特有亚硝胺(TSNA)含量的关系。结果表明,随着烟株烟碱转化能力的提高和烟叶降烟碱含量的增加,叶片和主脉的麦斯明含量呈线性增加。当烟碱转化率超过20％时,麦斯明含量超过了假木贼碱的含量。在4种主要的TSNA中,具有不同烟碱转化能力的样品间4-(甲基亚硝胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)、N-亚硝基新烟草碱(NAT)和N-亚硝基假木贼碱(NAB)含量没有显著差异,N-亚硝基降烟碱(NNN)含量则随着烟碱转化能力的提高和降烟碱含量的增加而大幅度升高,尤其在主脉中表现更为明显。NNN占总TSNA的比例随烟碱转化程度的提高而增加,在高转化烟株中可高达90％,其它3种TSNA占总TSNA的比例相应降低。叶片中NAT含量和比例一般高于NNK,而在主脉中NNK含量高于NAT。     

烟碱转化率与卷烟感官评吸品质和烟气TSNA含量的关系

用具有不同烟碱向降烟碱转化能力的白肋烟鄂烟一号上部叶(2003年)和中部叶(2004年)分别卷制试验卷烟,研究了烟碱转化率与卷烟感官评吸品质和烟丝及烟气中TSNA含量的关系。同一年份的卷烟样品间总生物碱含量无显著差异,烟碱含量和降烟碱含量呈相反趋势变化,从而形成样品间烟碱转化率的梯度差异。感官评吸由5-6名评吸专家组成的评吸小组进行。结果表明,随着烟碱转化率的增高,白肋烟风格程度直线下降,香气质逐渐下降,香气量减少,烟气浓度变淡,生理强度下降,杂气有增加的趋势,余味变劣,口腔残余加重,但刺激性有减小的趋势。两年卷烟样品基本表现相同的趋势,但2003年样品,由于生物碱水平高,不同样品间烟碱转化率的幅度较大,所以各项评吸指标的变化更为明显。随着烟碱转化水平的增高,烟丝和烟气亚硝基降烟碱(NNN)含量和总的烟草特有亚硝胺(TSNA)含量大幅增加,而其它3种烟草特有亚硝胺含量无较大变化。      

法国对影响晾烟中烟草特有亚硝胺(TSNA)浓度因素的研究

为了研究品种、施氮量和调制后贮存方式对白肋烟和深色类型晾烟中 TSNA浓度的影响 ,于 1997年和1998年在法国贝日拉克烟草研究所进行了数次试验。并对这两种类型的烟草作了进一步的试验证实 ,TSNA的浓度 (1,4 - 3,8ppm)与生物碱的浓度呈正相关 ,尤其是在亚硝基降烟碱 (NNN)的浓度中亚硝胺占优势 (0 ,5 - 2 ,5 ppm) ,与调制后烟叶中降烟碱的浓度密切相关 ,而亚硝基降烟碱 (NAT)又与新烟草碱 (0 ,3- 1,2 ppm)的浓度相关。深色烟每公顶的施氮量从 2 5 0单位增加到 5 0 0单位 ,致使 TSNA的浓度增加 5 0 %。本研究采用深色烟对不同贮存期…     

不同产地和品种白肋烟烟草特有亚硝胺与前体物关系

收集了我国4个白肋烟产区33份白肋烟晾制后上部叶样品,并以美国、马拉维样品为对照,测定了烟草特有亚硝胺(TS-NA)、生物碱和硝酸盐含量,以揭示TSNA含量与前体物之间的关系。结果表明,四川达州和云南宾川白肋烟TSNA含量水平较低,分别与美国和马拉维相当,不同产区间NNN和总TSNA含量差异较大,NNK、NAT和NAB含量差异相对较小。烟碱转化导致降烟碱含量升高是造成国内一些产区NNN和总TSNA含量较高的主要原因,随着总TSNA含量的增加,NNN所占比例增大。烟叶降烟碱含量、烟碱转化率与NNN和总TSNA含量呈极显著的正相关关系。NNK、NAT、NAB含量与硝酸盐含量呈显著正相关,同一产区不同烟叶样品NNK含量与硝酸盐含量呈极显著的正相关。品种间比较可知,鄂烟1号和鄂烟3号烟碱转化率较高,是导致其TS-NA含量升高的主要原因。     

不同栽培方式对白肋烟烟碱转化率及TSNA含量的影响

为探索不同栽培方式对白肋烟烟碱转化率及烟草特有亚硝胺(TSNA)含量的影响,采取裂区试验,以不同烟碱转化率类型的品系为主处理,不同种植规格、行向为副处理和再副处理,进行了垂垄向和垄向烟叶的光照强度、生物碱含量、烟碱转化率及4种TSNA含量的比较分析。结果表明,不同转化率的品系是影响烟碱转化率和TSNA含量的主要因素;不同种植规格、行向及不同方向烟叶的TSNA含量存在显著的差异;品系与行向及种植规格间亦存在显著的互作效应,且HC(高转化)品系受行向和种植规格的影响大于LC(低转化)品系。初步推断,生物碱代谢、TNSA的形成与积累均与光照强度有关。据此认为,在白肋烟生产上首先要选用低转化率品系,确立合理的栽培规格及行向,努力改善烟株的光照条件,是降低烟叶TSNA含量的有效措施。     

我国不同类型烟叶烟碱向降烟碱转化研究

对我国不同类型烟叶生物碱含量和烟碱向降烟碱转化的株间变异研究表明,白肋烟和沙姆逊香料烟降烟碱占总生物碱比例高,不同样品间变化幅度和变异性大,烟碱向降烟碱转化问题比较突出。单株分析表明,白肋烟JB80和TN90群体中转化株比例分别为20．0％和18．3％,且50％以上的转化株为转化率在20％以上的高转化株,烤烟转化株比例和转化程度较低。去除转化株后的纯化群体,其生物碱组成得到优化。     

2-氯乙基磷酸诱导白肋烟烟碱提前转化的有效性

为评价2-氯乙基磷酸诱导烟碱提前向降烟碱转化的有效性,对湖北和海南两个白肋烟产地的3个白肋烟品种(系)和1个改良品种,进行了2-氯乙基磷酸早期诱导烟碱转化效果研究,并与正常调制的烟叶进行对比分析。结果表明,经过2-氯乙基磷酸处理后,除湖北恩施种植的鄂烟1号外,其余试验品种(系)群体平均烟碱转化率均高于正常调制后的烟叶,其中B21群体平均转化率和高转化株比例高于其它品种;湖北恩施种植的3个品种(系)早期诱导和正常调制在转化株鉴定结果的一致性上比海南高,其中湖北恩施种植的TN90和海南种植的改良鄂烟1号的转化株数超过正常调制出现的转化株数;利用2-氯乙基磷酸早期诱导鉴定筛选留种非转化株,使鄂烟1号后代转化率分别由改良前的22.10%和16.93%降为3.98%,转化株比例尤其是高转化株的比例分别由改良前的48%和27%降为2%。     

筛选尼古丁转换的白肋烟品种

由不同的研究所进行的几项研究证明，白肋烟中的次生烟碱和TSNA之间存在着显的相关性。2001年在Tennessee和Kentucky的4个不同地点进行了初步试验，以便决定次生碱和TSNA在30个白肋烟品种晾晒样品中的含量水平。在不同的地点和不同的栽培品种中发现次生碱尼古丁转换为去甲基烟碱和TSNA含量水平的显差异。     

基于不同烟碱转化株鉴别标准的白肋烟品种改良效果

在采用不同烟碱转化株鉴别标准对TN86进行改良的基础上,对不同改良种的烟叶经济性状、烟碱转化率和TSNAs含量进行比较分析,以探讨采用不同转化株鉴别标准进行白肋烟品种改良的效果。结果表明,以烟碱转化率低于2.5%作为选择标准得到的改良种1（PNC<2.5）烟碱转化率稳定,上部叶比常规种低37.7%,中部叶低38.3%;总TSNAs含量低,比常规种低17.9%;产量、产值及上中等烟比例也明显优于其他改良种,且后代变异系数最小。改良种2（PNC<3）和改良种3（PNC<5）的烟碱转化性状分离明显,TSNAs含量较高。综合来说,烟株烟碱转化率2.5%作为区别转化株和非转化株的标准较为可靠,选择PNC<2.5的烟株进行留种或制种可以保证后代群体中出现转化株的频率最低,能够更有效地降低降烟碱含量和烟草特有亚硝胺的形成和积累,提高烟叶的香味品质。      

提高白肋烟质量及其可用性的技术研究

为解决国产白肋烟烟碱含量偏高、白肋烟特征香气不显著等问题 ,提高其质量及可用性 ,于1999- 2 0 0 1年对我国白肋烟的品种选育、高香味适宜烟碱栽培调制技术、质量与香味成分的关系、醇化技术等进行了系统研究。确定了目前国内产区生产优质白肋烟的品种 ;明确了降低烟碱含量和生产优质白肋烟的关键技术措施 ;揭示了国内外、国内不同地区、不同部位白肋烟的香味物质组成及其异同 ,考察了生长、采收和调制过程中国产白肋烟 2 0种重要香味成分的变化 ;找到了白肋烟醇化过程中烟叶品质的变化规律及醇化的最佳技术条件     

白肋烟品种、调制环境、降烟碱转化和TSNAs积累

2001年和2002年,供试的两个白肋烟品种,一个是从烟碱转化为降烟碱的品种BB16NN,另一个是非转化品种ITB501。不论是逐叶采摘还是整株采收,都在不同的调制环境中调制,即:在不同CO2浓度的调制房中;在常规调制房中;在有或没有热交换加热器的自动化塑料棚中。     

嵌合体植株对白肋烟内的烟碱向降烟碱转换稳定性的作用

烟草（Nicotiana tabacum L．）中现有的可将烟碱转化为降烟碱的转化株都不够理想。目前的认知水平对这一特性在白肋烟中的表现也知之甚少。研究就非稳定植株的遗传特性对其后代的影响进行了评估，并对可能造成这种遗传非稳定性的原因进行了探讨。     

我国不同类型烟叶烟碱转化株的比例和转化程度分布

为进一步纯化烟叶群体,提高烟叶品质。对我国5种类型(烤烟、白肋烟、香料烟、马里兰烟和晒红烟)13个主栽品种的烟叶(2003-2004年调制)烟碱转化株的比例和转化程度分布进行了分析测定。白肋烟品种和杂交种存在严重的烟碱向降烟碱转化问题,总转化株占烟株群体的比例除B37外,均在30%以上;烤烟品种烟碱转化问题相对较小,转化株比例低,且多为低转化株,所测品种群体中总转化株的比例不超过7%;香料烟和马里兰烟群体总转化株比例也偏高,分别为10.0%和9.84%,而且有一定比例的高转化株;晒红烟转化株比例较低。      

烟碱去甲基化酶基因功能阻断是一种有效和实用的降低烟草去甲基烟碱水平的方法

阻断烟草中去甲基烟碱的形成可以降低一种在烟叶调制过程中经亚硝化形成的TSNA——N’-亚硝基-去甲基烟碱（NNN）的含量。在之前的研究中，我们报道了烟碱去甲基化酶基因的发现及其使用GMO（转基因生物，RNAi干扰方法）和非GMO（诱变）策略降低烟碱去甲基酶活性。本研究报道了在高代和育成品系中这种策略的有效性和稳定性，并且描述了将RNAi和突变位点成功转入不同品种的育种过程和进展。在多重试验中实验材料种植在大田环境下，包括4代RNAi转基因系和相应的R2代雄性不育系副本。     

白花白肋烟与烟碱转化的关系研究

通过对发现的5株白肋烟B37花色突变株后代的连续观察与研究,结果表明,5株白花突变株当代均为高烟碱转化株;随着世代的增加,白花后代群体花色遗传稳定,高转化率性状更趋于纯合;烟株群体的平均烟碱含量明显下降,降烟碱则明显上升,烟株群体生物碱表现为以降烟碱为主。研究认为,在白肋烟品种中,花色由显性向隐性和烟碱转化率由隐性向显性突变,二者关系密切;在白肋烟新品种选育和品种提纯、繁殖过程中,对白色花冠突变烟株应及时发现、淘汰,对烟碱转化株应随世代跟踪检测,严防群体转化株积累和基因逐渐纯合;利用白花烟草突变株进行新品种选育应在明确其烟碱转化情况后,再确定是否加以利用。      

多香果对生鲜肉制品中N-亚硝胺、生物胺及游离氨基酸含量的影响

选用新鲜肉加入多香果粉制成肉丸,通过测定N-亚硝胺、生物胺、游离氨基酸含量,探究不同浓度多香果粉对肉丸中N-亚硝胺、生物胺含量变化的影响以及与游离氨基酸的关系。在肉丸4 ℃冷藏期间,用液相色谱串联质谱法（GC-MS/MS）测定3个N-亚硝胺的含量,高效液相色谱法（HPLC）测定8个生物胺的含量,全自动氨基酸分析仪测定18个游离氨基酸,结果表明：添加多香果,对二甲基亚硝胺（NDMA）、对亚硝基哌啶（NPIP）、亚硝基吡咯烷（NPYR）含量有明显的下降作用;添加0.04%和0.08%的多香果,降低效果较好;多香果对苯乙胺（Phe）、腐胺（Put）、亚精胺（Spd）含量也有显著的下降作用;对色胺（Tyr）、精胺（Spm）的作用不稳定;未添加与添加多香果粉的肉丸相比,添加的Phe与NPIP、NPYR相关性上升,Spd与NDMA的相关性上升。多香果可抑制游离氨基酸向生物胺的转化,进而降低N-亚硝胺产生。