天花粉蛋白的定点突变及聚乙二醇修饰

目的对天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)进行定点突变及聚乙二醇(PEG)修饰,并对修饰产物进行DNA酶活性分析。方法选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点(YFF81-83和KR173-174)进行定点突变,将所构建的两个突变体(TCSYFF81-83ACS和TCSKR173-174CG)在大肠杆菌中表达,并纯化表达产物。通过第82位和173位引入的半胱氨酸残基,分别对突变体蛋白进行PEG定点修饰。通过与突变型TCS比较,分析两个PEG修饰型TCS的DNA酶活性。结果突变的TCS经酶切鉴定及测序分析,证明质粒构建正确,表达的目的蛋白相对分子质量约为30000,经PEG修饰后,相对分子质量约为40000。初步分析显示,与突变型TCS相比,所构建的两个PEG修饰型TCS也显示出类似DNA酶活性。结论成功进行了TCS的定点突变及PEG修饰,为基因工程及化学修饰方法改造TCS提供了一条可行的途径。     

乙醇提取-丙酮沉淀法提取分离茶皂素的工艺研究

以油茶饼粕为原料,采用乙醇提取-丙酮沉淀法对茶皂素进行提取分离。以茶皂素纯度和得率为考察指标,对乙醇体积分数、液料比、提取温度、提取时间、提取次数、提取液浓缩程度和丙酮用量等工艺参数进行了单因素优化。结果表明：体积分数95%的乙醇为提取溶剂,乙醇与预处理过的油茶饼粕液料比为9：1（mL：g）,提取温度为70℃,提取时间为4 h,提取次数为2次,提取液浓缩至刚好有固体析出,丙酮用量为4倍浓缩液体积量时提取分离效果较佳,得到的茶皂素纯度为85.17%,得率为9.82%。不同溶剂打浆对产品纯化效果的比较发现：丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇、体积分数95%的乙醇作为打浆纯化溶剂用于提高茶皂素纯度效果均不明显。     

昆虫融合抗冻蛋白提取方法的比较

目的 对用低温乙醇法、硫酸铵盐析法及等电点法提取的昆虫融合抗冻蛋白EGFP-OcAFP4浓度和蛋白相对得率进行比较。方法 选取不同终浓度的乙醇（5%～65%）、硫酸铵（0.2～3.0 mol/L）及pH(5.6、5.4、5.2、5.0、4.8、4.7、4.6、4.5、4.4)提取重组质粒pET28a-EGFP-OcAFP4诱导表达液破菌上清中的EGFP-OcAFP4,并检测其纯度及蛋白相对得率。结果 乙醇终浓度为30%时提取EGFP-OcAFP4的纯度最高,达86.21%,蛋白相对得率为6.89%;硫酸铵终浓度为2.0 mol/L时提取EGFP-OcAFP4的纯度最高,达42.33%,蛋白相对得率为30.83%;pH为5.0时提取EGFP-OcAFP4的纯度最高,达15.46%,蛋白相对得率为11.97%。结论 低温乙醇法、硫酸铵盐析法和等电点法均可用于EGFP-OcAFP4的提取,但低温乙醇法和硫酸铵盐析法提取蛋白的纯度及相对蛋白得率更高,更适用于EGFPOcAFP4的提取。     

丙酮提取番茄红素的工艺优化

研究了丙酮提取番茄红素的最佳条件,考察了丙酮体积分数、提取温度、固液比与提取时间对提取量的影响。结果表明,番茄红素的最佳提取工艺为:丙酮体积分数70%,提取温度40℃,固液比1∶5(g/mL),提取时间60 m in。在此条件下,番茄红素的提取量为12.47 mg/g。     

天花粉蛋白突变体TCS_(KR173-174CG)的构建、表达与纯化

目的构建天花粉蛋白(TCS)突变体基因,并进行表达及纯化。方法应用计算机预测TCS分子上可能的抗原决定簇,并进行定点突变。以栝楼基因组DNA为模板,经PCR扩增突变基因,与pRSET-A表达载体连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行Ni-NTA层析纯化。结果目的蛋白在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,表达产物经纯化后,得到均一的TCS突变体蛋白。结论已成功构建了TCS突变体基因,并获得高效表达。     

沉淀法提取植酸的原理分析

沉淀法是一种传统的植酸生产方法,现从原理上对其整个生产中的酸浸、沉淀、精制、阳离子交换、脱色、浓缩等过程进行分析,以便能更好的指导生产。     

沉淀法提取卤水中硼的研究进展

沉淀法从卤水中提取硼对于硼资源的开发利用具有重要意义。本文简要评述国内外沉淀法从卤水中提取硼的研究进展,对比了其他卤水提硼方法并指出了沉淀法提硼的发展方向。     

离子沉淀法提取绿茶中的茶多酚

摘要：以绿茶为原料,水为浸提溶剂,采用离子沉淀法对茶叶中茶多酚的提取进行了研究。探讨了沉淀剂种类、沉淀剂用量、溶剂用量、浸提温度、浸提时间5个因素对茶叶中茶多酚提取的影响,优化了茶多酚提取的最佳工艺条件。结果表明,当以AlCl3为沉淀剂且m沉淀剂：m茶叶=1：5、溶剂用量m茶叶：m水=1：20、浸提温度为水浴75℃、浸提时间45min时,茶多酚的提取率最高,为14．12％。     

天花粉与氨甲喋呤联用治疗异位妊娠的疗效观察

目的寻找一种简单、有效,成功率高的异位妊娠的药物治疗方法。方法98例患者分氨甲喋呤单次注射(A组),天花粉蛋白注射(B组)及两药联合治疗(C组)进行比较。结果C组较A、B两组能明显缩短血-HCG(绒毛膜促性腺激素)降至正常范围的时间,减少住院日,提高治疗成功率。结论氨甲喋呤单次注射加天花粉蛋白注射联合治疗异位妊娠,疗效高,副作用小,可作为临床首选治疗方案。     

铝盐在沉淀法白炭黑中的应用

简述了铝盐在沉淀法白炭黑中的应用现状，添加铝盐对白炭黑物理化学性能的影响和含铝沉淀法白炭黑的用途进行了阐述。     

苯基丙酮新合成方法的研究

通过苯并咪唑盐与Grignard试剂的加成-水解反应合成了苯基丙酮,并对反应机理进行了探讨。     

丙酮提取姜黄中姜黄素的工艺研究

用丙酮提取姜黄中的姜黄素,考察了丙酮浓度、固液比、提取次数、提取时间对姜黄素产率的影响。结果表明,丙酮提取姜黄素的最佳工艺条件为:加20倍量70%丙酮,提取2次,每次提取2 h,在此条件下姜黄素含量达到5.17%(HPLC法)。     

丙酮提取虾青素的影响因素研究

用低毒性有机溶剂（如丙酮）提取虾青素,研究了提取时间、提取温度、藻粉用量、稀释倍数、是否使用石英砂、是否使用石油醚等因素对提取效果的影响。实验表明：在40℃下提取30 min,藻粉用量0.15 g,稀释倍数为25/1.5,使用石英砂和石油醚,虾青素提取率可以达到63.3%。     

杜仲胶的溶剂——沉淀法提取

较全面讨论了杜仲胶的提取方法。提出了一种低消耗，橡胶烃纯度高的杜仲胶提取方法，即由溶解度参数选择合适的溶剂抽提，然后加入沉淀剂，改变溶剂溶解度参数，使其发生相分离，快速析出。     

杜仲胶的溶剂-沉淀法提取

较全面讨论了杜仲胶的提取方法，提出了一种低消耗、橡胶烃纯度高的杜仲胶提取方法，即由溶解度参数选择合适的溶剂抽提，然后加入沉淀剂，改变溶剂溶解度参数，使其发生相分离，快速析出。     

双丙酮丙烯酰胺提取方法的改进

双丙酮丙烯酰胺(DAAM)是一种新开发出来的乙烯基单体,极易与其他乙烯基单体共聚,形成含有酮羰基的聚合物,利用酮羰基活泼的化学性质,可使聚合物发生交联、接枝等反应[1],因而在聚合物改性方面有着重要的作用.国外对该产品应用方面的研究越来越多[2～4],但合成方面的研究较少,且多为专利所覆盖[5].我国目前尚难以买到该产品,其合成及应用方面的研究报告极少[5].为此,本论文研究了DAAM的合成方法,尤其是改进了产品的提取方法,并采用正交实验设计法对提取过程中的影响因素进行了研究.     

双丙酮醇的研制

介绍了以丙酮为原料合成双丙酮醇的方法，对催化剂的选择、工艺条件的确定做了较详细的讨论和分析。用该方法试制出的产品达到试剂三级标准。     

沉淀法提取茶叶废料中茶多酚的工艺研究

采用金属沉淀方法,运用正交实验,通过比较提取温度、提取时间、沉淀离子以及pH这四个方面,研究了从茶叶废料中提取茶多酚的工艺,并得到最优的提取条件.实验结果表明最优的提取条件为:温度为100℃,提取时间为0.5 h,沉淀离子为Al3+,pH为6.5.     

氯代丙酮合成方法的研究进展

主要介绍了近年来丙酮氯化生产一氯代丙酮、二氯丙酮和三氯丙酮的方法。