鹿茸多糖分离纯化及抗氧化活性研究

采用DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸粗多糖进行分离纯化,并通过对DPPH自由基、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2-·）清除能力和还原能力的测定,研究了粗多糖及纯化后多糖的抗氧化能力。结果表明:DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸多糖分离效果较好,可以分离纯化得到一种单一多糖;粗多糖和纯化后多糖对DPPH·、·OH、O2-·均有清除作用,且具有一定的还原能力,纯化后多糖抗氧化活性和还原能力均大于粗多糖。      

绿球藻多糖分离纯化及抗氧化活性研究

天然多糖具有良好的生物活性和功能,而微藻具有生长速度快、适应性强、在人工培养下能够大量繁殖、占地面积小、生产成本低等特性。为深入挖掘更多的微藻多糖资源,采用传统热水浸提方法对绿球藻(Chlorococcum sp.GD)多糖进行分离,并采用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-150柱层析对所获得的粗多糖进行纯化,并研究其抗氧化活性。结果表明:1)粗多糖提取率为6.07%,通过分级纯化,得到4个组分CPP-Ⅰ、CPP-Ⅱ、CPP-Ⅲ和CPP-Ⅳ,且纯度较高;2)绿球藻纯化多糖对DPPH自由基和羟基自由基具有明显的清除效果,清除率分别超过90%和70%,且纯化组分CPP-Ⅳ的效果优于粗多糖;3)绿球藻纯化多糖对超氧阴离子和ABTS+自由基也具有一定的清除效果,清除率分别超过50%和27%,且还原力为0.404。研究结果虽然低于VC的清除率,但仍然表明绿球藻多糖纯化后具有较好的抗氧化活性,并且清除率随多糖的浓度增大而增加。     

马齿苋多糖组分的分离纯化及抗氧化活性研究

本文对马齿苋总多糖进行了纯化分离,得到了POLⅠb、POLⅡa、POLⅢ’三种单一的多糖组分,分子量分别为18kD、56kD和410kD;均是非单一组分多糖,POLⅠb、POLⅢ’主要由葡萄糖、半乳糖组成,含有α-糖苷键;POLⅢ含有六种单糖,分别是阿拉伯糖、木糖、果糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,含有β-糖苷键。三种多糖体外实验证明均有一定的抗氧化功能,POLⅢ对于·OH有较高的灭活作用。     

小米多糖分离纯化及抗氧化活性研究

以河峪黄小米为原料,通过响应面实验考察料液比、超声时间、提取温度、纤维素酶量对小米多糖提取量的影响,并对小米多糖进行分离纯化和体外抗氧化活性研究。结果表明：超声辅助酶法提取小米多糖的最佳工艺：料液比为1:22（g/mL）,加酶量1%,超声时间21 min,提取温度60 ℃,此时小米多糖提取量为 30.34 mg/g。木瓜蛋白酶法-Sevag法蛋白脱除率为78.23%,多糖保留率为89.42%。用D315树脂法脱色率为88.00%,多糖保留率为80.20%。DEAE-52纤维素色谱柱和Sephadex G-100柱色谱纯化得到多糖组分MP-1。MP-1对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子清除率最高分别为75.33%、70.69%、68.62%,对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子半抑制浓度分别为1.105 mg/mL、0.200 mg/mL、1.371 mg/mL,表明小米中多糖具有较好的抗氧化能力。     

薇菜多糖的分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法制备薇菜粗多糖（water-soluble polysaccharide of Osmunda japonica,WOJP）,并用二乙氨乙基（diethylaminoethyl,DEAE）-纤维素层析法对其进行分离纯化,获得2?个多糖组分薇菜中性糖（neutral WOJP,WOJP-N）和薇菜酸性糖（acidic WOJP,WOJP-A）。WOJP-N的分子质量为31.8?kDa,由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,对应各成分物质的量比为9.1∶5.7∶13.3∶37.6∶5.6∶11.8;WOJP-A的分子质量为15.7?kDa,由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,对应各成分物质的量比为7.0∶56.4∶26.1∶5.2。傅里叶变换红外光谱分析结果表明,WOJP-N主要由β-构型的半乳糖组成;WOJP-A主要由吡喃半乳糖醛酸组成,且存在部分酯化修饰。体外抗氧化活性实验结果表明,WOJP的Fe3＋还原能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）清除能力和超氧阴离子清除能力与VC相当,具有较好的抗氧化活性,其中WOJP-N和WOJP-A在WOJP发挥抗氧化活性时具有协同作用,两者均是WOJP发挥抗氧化活性的多糖组分。本研究结果可为进一步研究薇菜多糖的构效关系和开发功能性食品提供依据,并为薇菜的应用提供理论参考。     

莲藕多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

本实验从莲藕渣中通过水提醇沉法提取得到水溶性莲藕粗多糖NPh,采用DEAE Sephrose Fast Flow离子交换层析法纯化NPh,实验不同pH值及盐浓度对NPh的洗脱效果,确定了合适的纯化条件为以pH5.0 0.05mol/L HAc-NaOAc缓冲液作为起始缓冲液,起始缓冲液加0.5mol/L NaCl进行分步洗脱,洗脱速度为6.0ml/min,收集得到均-多糖组分NPhz.通过清除DPPH·自由基和保护红细胞氧化溶血的实验研究NPh2的抗氧化活性,结果显示,NPh不存在清除DPPH·自由基的作用,能够有效抑制红细胞氧化损伤.     

河蚬多糖分离纯化及抗氧化、抗肿瘤活性研究

采用DEAE-52纤维素色谱法和Sephadex~(TM) G-100葡聚糖凝胶色谱法对河蚬多糖进行分离纯化,获得CFP-1和CFP-2两个纯化组分,并对两组分进行紫外光谱和红外光谱扫描,结果表明:两组分中没有蛋白质和核酸,并证明它们是多糖类物质。液相色谱分析得到CFP-1和CFP-2的平均相对分子质量分别为1 172,3 627kD。对河蚬多糖的抗肿瘤、抗氧化活性研究结果表明:CFP-1对人肝癌细胞(HepG-2)抑制作用较CFP-2明显,作用48h时,CFP-1对人肝癌细胞的抑制活性IC_(50)值为0.24 mg/mL;而在抗氧化活性方面CFP-2优于CFP-1。     

紫苏叶多糖分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法得到紫苏叶粗多糖（Perilla frutescens leaf polysaccharides,PFP）,并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化,获得4个多糖组分PFP-1、PFP-2、PFP-3和PFP-4。PFP-1为中性低聚糖,但总糖含量较低;PFP-2重均分子量为4.7 kDa,峰位分子量为2.2 kDa,主要组成单糖为半乳糖醛酸;PFP-3主要由两种分子量段的多糖组成,主要峰位分子量为5.2 kDa和40.0 kDa,为杂多糖,所含单糖种类较多,主要含半乳糖醛酸和半乳糖;PFP-4分子量较小,主要组成单糖为半乳糖和阿拉伯糖。体外抗氧化活性试验表明,PFP的DPPH自由基清除能力、ABTS+自由基清除活性和Fe3+还原能力较强,具有良好的抗氧化活性,其中组分PFP-3和PFP-4抗氧化活性与PFP接近,是其发挥抗氧化作用的关键组分。     

冬枣多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的：分离纯化冬枣多糖,并研究其组分、结构特征和抗氧化活性。方法：采用水提醇沉、脱蛋白脱色、DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化冬枣多糖;利用Sephadex G-100凝胶色谱柱进行纯度鉴定和分子质量的测定;通过紫外光谱、红外光谱、气相色谱法进行了初步结构分析;采用邻二氮菲法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）体系对纯化多糖进行抗氧化活性的研究。结果：冬枣多糖经DEAE-52分离和Sephadex G-100纯化得到2 个组分DPA和DPB,经Sephadex G-100鉴定均为均一组分,DPA和DPB分子质量分别为1.04×104、3.02×105 D,不含蛋白质和核酸,为吡喃型糖苷环骨架,DPA的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为6.66∶1.00∶6.75∶2.09;DPB的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量比为4.33∶10.90∶1.00∶3.25∶4.78;DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性,随着多糖质量浓度的增加,其抗氧化活性增强,在质量浓度为8 mg/mL时对羟自由基清除率分别为28.52%、78.79%,在质量浓度为0.4 mg/mL时对DPPH自由基清除率分别为9.97%、24.54%。结论：DPA和DPB均具有一定的抗氧化活性。     

沙棘多糖分离纯化及抗氧化活性

分离纯化沙棘多糖(sea buckthorn(Hippophae rhamnoides)polysaccharides,SBP),并对其单糖组分、结构表征及体外抗氧化活性进行分析.通过水提醇沉、Sevag法除蛋白得到沙棘粗多糖,利用DEAE-52纤维素柱对其进行分离纯化得到中性多糖SBP-I和酸性多糖SBP-II、SB...     

牡丹叶多糖的提取纯化、分级制备及抗氧化性能研究

以牡丹叶为实验对象,建立牡丹叶多糖的提取及分离纯化方法,再采用不同体积分数(25%、45%、65%、85%)乙醇分级沉淀,得牡丹叶多糖PW-25、PW-45、PW-65、PW-85,采用红外光谱分析各组分的光谱学特征,并通过DPPH自由基和羟自由基清除实验对各组分体外抗氧化活性进行研究。结果表明:采用ZTC1+1-Ⅱ型天然澄清剂法脱蛋白和过氧化氢脱色法联用进行牡丹叶粗多糖的分离纯化,在此方法下牡丹叶粗多糖中蛋白脱除率为89.66%,色素脱除率为79.35%,多糖保留率为61.41%,得到PW-25多糖纯度达91.23%,得率为1.29%;4种牡丹叶多糖组分均具有一定体外抗氧化能力,其中PW-25对DPPH自由基和羟自由基具有明显清除能力,且半数抑制浓度(IC50)分别为15.36、65.77μg/m L,但均略差于VC(IC50分别为7.89、46.46μg/m L)。研究结果为牡丹叶多糖开发和应用提供基础。     

超声波辅助提取菠萝皮渣多糖及其抗氧化活性研究

采用超声波技术辅助提取菠萝皮渣多糖,利用正交设计实验优化其提取工艺,并利用体外实验研究该多糖对羟自由基（·OH）、DPPH自由基（DPPH·）的清除能力及其还原能力,以评价其抗氧化活性。研究结果表明,超声波辅助提取最佳工艺参数为:料液比1∶50（m/v）,时间40 min,温度60℃,功率为570 W,该条件下多糖的得率为2.38%;在本实验浓度范围（1.50³.50 mg/m L）内,菠萝皮渣多糖对·OH的清除率随其浓度的增加而增加,但清除能力均低于同浓度VC,清除DPPH·自由基的IC₅₀为2.47 mg/m L,对Fe³⁺的还原能力随多糖浓度的增加而增加。可见,超声波辅助提取工艺效果较好,能缩短提取时间,提高菠萝皮渣多糖的得率;体外抗氧化实验表明菠萝皮渣多糖具有一定的抗氧化活性。从菠萝皮渣中提取活性多糖,可以变废为宝,实现菠萝资源的高值化利用。      

板栗壳天然色素对油脂抗氧化作用的研究

以猪油和花生油作为底物,采用烘箱贮藏法测定油脂的 POV值,研究板栗壳天然色素对油脂的抗氧化活性,结 果表明,板栗壳色素具有一定的抗油脂氧化能力,当色素 的添加量分别为猪油和花生油质量的0.03％和0.01％时, 效果最好,而且柠檬酸与抗坏血酸对色素的抗氧化性有 协同增效作用,柠檬酸的协同作用更好,同时添加质量分 数0.005％的柠檬酸和0.03％与0.01％的色素,对猪油和花 生油的抗氧化效果可与0.02％的BHT媲美。     

干燥方式对牛蒡多糖理化性质及抗氧化活性的影响

分别研究热风干燥、真空干燥和冷冻干燥3种方式对牛蒡粗多糖理化性质和抗氧化活性的影响。结果表明:3种干燥方式所得牛蒡多糖均为灰白色固体、是无多酚类物质的非淀粉类多糖;冷冻干燥牛蒡粗多糖的多糖含量和蛋白质含量最高,分别为(90.72±1.45)%和(2.41±0.17)%;真空干燥牛蒡粗多糖的糖醛酸含量最高,为(2.66±0.09)%;热风干燥牛蒡粗多糖的相对分子量最大,为46.74×10~4 Da。同时,冷冻干燥牛蒡粗多糖的抗氧化活性高于热风和真空干燥,其DPPH自由基和羟自由基清除率以及还原力的IC_(50)分别为2.11,2.44,3.68mg/mL。综上,考虑到多糖含量最高及抗氧化能力最好,可选用冷冻干燥方式干燥牛蒡粗多糖。     

鸭小肠抗菌肽的分离纯化及抗菌活性研究

为了探究鸭肠道抗菌肽的高效提纯方法和抗菌活性,本研究将新鲜鸭肠黏膜破碎,高温处理,乙酸浸提后,再经超滤和Sephadex G50凝胶过滤层析,收集各组分并用琼脂糖弥散法检测抑菌活性。同时,采用TricineSDS-PAGE测定其主要抗菌肽的分子量。结果表明:采用\     

米邦塔仙人掌多糖的提取纯化及体外抗氧化活性

目的:研究米邦塔仙人掌多糖的纯化及体外抗氧化活性。方法:用水提醇沉的方法提取得到米邦塔仙人掌粗多糖polysaccharides from Opuntia Milpa Alta（MAP）,MAP经过DEAE-纤维素-52柱纯化得到多糖MAP1和MAP2,经过DEAE-琼脂糖-CL-6B柱纯化得到多糖MAP3。采用凝胶渗透色谱（GPC）分析多糖的相对分子质量,采用体外抗氧化评价体系研究米邦塔仙人掌多糖抗氧化活性。结果:MAP1相对分子质量（Mn）为476.9,MAP2相对分子质量（Mn）分布为5449、9724、529 ku,MAP3相对分子质量（Mn）分布为13270、15.87、474 ku。体外抗氧化活性结果显示,MAP的总抗氧化能力最高,MAP2和MAP3对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除作用均高于MAP,其中MAP2的各项抗氧化指标的活性均高于MAP3。结论:纯化后的MAP2具有较好的抗氧化活性,米邦塔仙人掌多糖体外抗氧化活性与其相对分子质量有关。      

板栗过氧化氢酶基因CAT1的克隆及生物信息学分析

为研究板栗过氧化氢酶基因CAT1的功能,旨在为其采后贮藏中品质变化研究提供分子机理基础。以板栗为试材,提取总RNA,通过c DNA末端快速扩增技术（RACE）,克隆到板栗CAT1基因c DNA全长,并对其进行生物信息学分析。结果表明,该基因序列全长1485 bp,包含一个1479 bp的开放阅读框,编码492个氨基酸。氨基酸序列分析表明,板栗CAT1与枣（Ziziphus jujuba）、烟草（Nicotiana tabacum）、陆地棉（Gossypium hirsutum）等植物过氧化氢酶CAT1氨基酸序列有较高的相似性。蛋白分析表明,该蛋白分子量为56947.31 Da,理论等电点6.65,属稳定性亲水蛋白;亚细胞定位于过氧化氢酶体,存在30个磷酸化位点,无信号肽。二级结构以α螺旋、无规则卷曲为主。保守结构域预测表明,该基因编码蛋白属于Catalase-like超家族。本研究克隆获得了板栗CAT1基因,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。