盐酸埃他卡林对H2O2所致PC12细胞损伤的保护

目的: 研究 K_ATP 通道开放剂盐酸埃他卡林(iptakalim hydrochloride, Ipt) 对 H₂O₂ 所致 PC12 细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法: 采用培养的PC12细胞, MTT 法测定细胞存活率, HPLC 法测定细胞培养液中谷氨酸(Glu) 的含量, 荧光法测定胞内钙离子([Ca²⁺]_i) 浓度。结果: Ipt 可浓度依赖性的拮抗H₂O₂ 介导的细胞毒性, 提高细胞生存率, 降低胞外Glu的释放以及胞内 Ca²⁺ 浓度。该保护作用可被200 μmol°L^-1 5-HD(线粒体K ATP 通道阻断剂) 部分拮抗。结论: Ipt 可拮抗 H₂O₂ 介导的细胞损伤作用, 该保护作用可能与线粒体ATP 敏感性钾通道相关。     

萘哌地尔衍生物BWYJ 扩张血管效应及其机理研究

目的: 观察萘哌地尔衍生物BWYJ 对家兔血管活动的影响, 并探讨其血管活性机理, 为该药的开发研究提供基础资料。方法: 采用家兔主动脉收缩的方法, 观察BWYJ 对去甲肾上腺素(NA)、5-羟色胺(5-HT) 和高钾量效曲线的影响;应用无Ca²⁺-复Ca²⁺的实验法, 以NA 和咖啡因为血管收缩剂, 间接观察BWYJ 对细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]_i) 的影响,并分析其可能作用机理。结果: BWYJ 10^-7、3×10^-7、10^-6mol·L^-1使NA 量效曲线明显平行右移, 而最大反应不变, pA2 值为7.61 。本品10^-6、10^-5 mol·L^-1对5-HT 量效曲线也有同样的效应, pA2值为6.56 。而当剂量为3×10^-6、10^-5 mol·L^-1时,对氯化钾(KCl) 量效曲线没有明显影响。在无钙Krebs 液中, BWYJ 10^-7、3× 10^-7、10^-6 和10^-5 mol·L^-1呈浓度依赖性抑制NA 所致血管条的短暂收缩, 对复Ca²⁺后NA 所诱发的持续收缩也呈剂量依赖性抑制作用, 但其剂量达10^-5 mol·L^-1时尚不能抑制咖啡因在无Ca²⁺液中所致收缩。结论: BWYJ 可能是一种α受体阻断剂, 兼有拮抗5-HT 受体的作用。其扩血管的机理可能是通过阻断细胞膜上的α受体或5-HT 受体, 从而抑制这些受体中介的Ca²⁺内流和Ca²⁺释放所致。     

缺氧-复氧对心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用1

目的 观察缺氧-复氧对大鼠心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用 。方法 在缺氧-复氧条件下,测量对照组和不同浓度川芎嗪组对杆形心肌细胞百分比、心肌细胞内 K⁺/Na⁺浓度比及Ca²⁺浓度的影响。结果 缺氧-复氧对大鼠心室肌细胞有损伤作用,浓度为 4μmol·L^-1的川芎嗪对缺氧-复氧损伤细胞有保护作用,它能抑制损伤细胞挛缩,提高损伤细胞生存率,抑制心肌细胞内 K⁺/Na⁺浓度比的降低 、增加细胞内 Ca²⁺浓度,且剂量越大,保护作用越好,即川芎嗪对缺氧-复氧损伤细胞的保护呈剂量依赖性 。结论 川芎嗪对缺氧-复氧损伤的大鼠心肌细胞具有保护作用,它能显著地对抗缺氧-复氧对心室肌细胞的损伤作用 。     

萘哌地尔衍生物(BWYJ)对血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响

目的: 观察萘哌地尔衍生物(BWYJ) 对家兔血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响, 对其血管活性进行机理探讨, 进一步明确其作用机制。方法: 采用钙荧光指示剂Fura-2 /AM 负载的培养家兔胸主动脉平滑肌细胞, 观察该药对NA 、5-HT 和高钾所致的[Ca²⁺] _i 的升高的影响。结果: Fura-2 /AM 负载血管平滑肌细胞的实验中, 静息时各浓度的BWYJ 对[Ca²⁺]_i 无明显影响, 但其对NA 和5-HT 所引起的血管平滑肌[Ca²⁺] _i 增加均有明显的抑制作用, 而不影响高钾所致血管平滑肌[Ca²⁺] _i 的增加。结论: BWYJ 通过阻断细胞膜上的α₁ 受体或5-HT₂A 受体,抑制这些受体中介的钙内流, 从而抑制细胞内Ca²⁺的释放, 使血管平滑肌[Ca²⁺] _i 降低。     

油茶皂甙对缺血大鼠心肌线粒体Na+、Ca2+、Mg2+含量及ATPase 活性的影响1

目的 观察大鼠心肌缺血时心肌线粒体Na⁺、Ca²⁺、Mg²⁺含量、ATPase 活性的变化及油茶皂甙(SQS)对它们的影响。方法 以皮下多点注射异丙肾上腺素(ISO 4 mg · kg^-1)诱导心肌缺血损伤为模型, 测定Na +、Ca²⁺、Mg²⁺含量及ATPase 活性。结果 心肌缺血时线粒体Mg²⁺含量明显减少, Na⁺、Ca²⁺含量显著增多;Na⁺-K⁺-ATPase 、Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase 活性显著下降。SQS(0.2 mg ·kg^-1, iv)能显著对抗缺血心肌线粒体Na⁺、Ca²⁺、Mg²⁺含量及Na⁺-K⁺-ATPase 、Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase 活性的上述改变。结论 SQS 具有抗钠钙超载的心肌细胞保护作用。     

醋柳黄酮对血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度的影响

目的:探讨醋柳总黄酮(TFH) 对血管平滑肌细胞胞内游离钙浓度([Ca²⁺]_i) 的影响。方法:采用新一代钙荧光探针Fluo-3/AM 检测在高钾、去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素II(Ang Ⅱ) 刺激下单层兔主动脉平滑肌细胞内游离钙水平的改变, 并与传统的钙拮抗剂Verapamil (Ver) 进行对照研究。结果:TFH(100 mg·L^-1) 对静息状态的血管平滑肌细胞[Ca²⁺]_i 无明显影响;TFH(60 ～ 100 mg·L^-1) 呈剂量依赖性抑制高K⁺ 去极化引起的[Ca²⁺]_i 升高, 与Ver 作用相似, 但弱于Ver;TFH(80、100 mg·L^-1) 对NE、Ang Ⅱ通过受体介导引起[Ca²⁺]_i 升高均具有明显的抑制作用;在无细胞外Ca²⁺存在下, TFH(80、100 mg·L^-1) 对NE 引起的[Ca²⁺]_i 升高也具有一定程度的抑制效应。结论:醋柳总黄酮通过对电压依赖性钙通道和受体操纵型钙通道双重抑制降低血管平滑肌细胞内游离钙水平, 这可能是醋柳黄酮产生舒血管降压作用机制之一。     

多非替利衍生物CPU228(V03) 对大鼠心室肌细胞钙瞬变的调节

目的:在β-受体激动情况下, 研究多非替利衍生物CPU 228 对电刺激触发心肌细胞的胞浆Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i) 变化及钙瞬变动力学参数的影响。方法:游离单个大鼠心室肌细胞, Fluo-3/AM 负载, 电刺激诱发心室肌细胞钙瞬变, 定量测定心室肌细胞内Ca²⁺浓度变化, 异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO) 100 nmol°L^-1激动β-受体, 观察CPU 228 1 μmol°L^-1对钙瞬变动力学参数、[Ca²⁺]_i 及钙负荷水平的影响。结果:CPU228 1 μmol°L^-1对大鼠心室肌细胞[Ca²⁺]_i 的影响不明显(P>0.05);ISO 100 nmol°L^-1显著升高大鼠心室肌细胞[Ca²⁺]_i 和细胞内钙负荷水平, 缩短钙瞬变时程, 并且增加钙瞬变的消除速率。CPU 2281 μmol°L^-1显著抑制ISO 的上述作用。结论:在β-受体激动情况下, CPU 228 可以降低心肌细胞[Ca²⁺]_i,使ISO 改变的钙瞬变动力学参数恢复到正常水平。     

川芎嗪对心肌细胞核钙转运功能异常的保护

目的: 观察异丙肾上腺素(ISO) 致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能的变化及川芎嗪对其影响。 方法: Wistar 大鼠皮下注射 5 mg·kg^-1 ISO 液, 造成心肌缺血损伤模型。超速离心分离纯化心肌细胞核。 酶学方法鉴定核纯度和测定核膜Ca²⁺-ATP 酶活性, 同位素法观测核钙的摄取。 结果: 与正常对照组比较, 心肌缺血组(实验组) 心肌细胞核膜 Ca²⁺ 依赖性ATP 酶活性降低 18.1%(P<0.05), ⁴⁵Ca²⁺ 摄取效率也显著降低, 其最大反应速度(V_max ) 降低 54.6%, 细胞核 Ca²⁺ 依赖性ATP 酶的最大反应速度(V_max ) 降低 33.0%(P<0.05), 平衡常数(K_m ) 降低 42.8%(P<0.01);川芎嗪保护组心肌细胞核 Ca²⁺-ATP 酶活性及核 ⁴⁵Ca²⁺ 摄取与正常对照组比较均未见显著性改变。结论: 川芎嗪对 ISO致大鼠心肌缺血损伤时心肌细胞核钙转运功能降低有保护作用。     

左旋荷包牡丹碱对猪冠状动脉条收缩效应的影响1

目的 观察左旋荷包牡丹碱(L-dicentrine,L-D)对K⁺、5-HT 、Hist、Ca²⁺引起的猪冠状动脉条收缩效应的影响。方法 利用猪冠状动脉条的离体实验法,观察对其收缩的影响。结果 L-D对K⁺、5-HT、Hist、Ca ²⁺诱发的猪冠状动脉平滑肌的收缩有显著的拮抗作用,量效曲线显示:L-D呈现非竞争性拮抗方式。在无Ca²⁺液中,L-D 能抑制5-HT 诱发的猪冠状动脉收缩,说明5-HT对猪冠状动脉依赖细胞内Ca²⁺所致的收缩有明显的抑制作用,而对外Ca²⁺所致的收缩无明显的影响。结论 L-D 具有松弛猪冠状动脉条的作用,同时也提示冠状动脉平滑肌可能存在5-HT受体。     

神经生长因子对新生大鼠脑细胞内游离钙浓度的影响

目的 观察神经生长因子(NGF)对分离的新生大鼠脑细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]_i)的影响。方法 以 Fura-2/AM 为细胞内钙离子的荧光指示剂, 测定谷氨酸(Glu)及过氧化氢(H₂O₂)诱导的新生大鼠脑细胞内[Ca²⁺]_i, 观察 NGF 对此影响。 结果 新生大鼠脑细胞内静息 [Ca²⁺]_i 208±22nmol/L, NGF对神经细胞静息 [Ca²⁺] i 无明显影响, NGF 1～ 100μg/L 能剂量依赖地抑制 Glu 和 H₂O₂ 引起的 [Ca²⁺]_i 升高, 其 IC₅₀ 分别为 42.5 和 27.3 μg/L。结论 NGF 通过降低 [Ca²⁺]_i 的水平来保护大脑皮质神经元抗谷氨酸毒性及过氧化氢损伤。     

洛沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞c-fos表达及对细胞内游离钙升高的拮抗作用

目的 研究血管紧张素AT₁亚型受体拮抗剂洛沙坦(losartan,LT)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞c-f os 表达及细胞内游离钙变化的影响。方法 斑点杂交及Fura-2技术。结果 AngⅡ10nmo l/L 能诱导培养乳鼠心肌细胞c-fos的一过性高表达及[Ca²⁺] 的显著升高。LT 20μmol/L能显著抑制AngⅡ诱导的心肌细胞c-fos的高表达,而血管紧张素AT₂亚型受体拮抗剂PD123319 则无明显作用。LT1~100μmol/L 能剂量依赖性地抑制AngⅡ引起的[Ca²⁺]i升高。结论 AngⅡ诱导的心肌细胞c-f os 高表达及[Ca²⁺]i升高可能是通过AT₁亚型受体介导而实现的,LT可能是一种治疗心肌肥厚的有效药物。     

组胺对离体兔中枢和外周血管收缩作用的比较及其机理初探

目的: 比较组胺及其受体阻断药对离体家兔脑及外周血管的作用;并观察钙离子在组胺效应机制中的作用。方法: 取家兔基底动脉和肠系膜动脉,分别在不同剂量苯海拉明、西咪替丁和硝苯地平存在的情况下, 观察组胺量效曲线的变化。结果: 组胺可引起基底动脉和肠系膜动脉收缩;苯海拉明可拮抗组胺的上述作用;西咪替丁小剂量时即可增强组胺所致的基底动脉的收缩, 而大剂量时才对组胺引起的肠系膜动脉收缩有增强作用;硝苯地平对组胺引起的两种动脉的收缩都有抑制作用。结论: 组胺对离体家兔脑及外周血管均有收缩作用, 这种缩血管作用主要通过Ca²⁺内流引起。同时, 实验结果提示两种血管上组胺受体的分布密度有差别。