磷脂酶A2水解大豆浓缩磷脂的研究(Ⅱ)贫水相的水解及产品性能的测定

研究了磷脂酶A2在水相(贫水)中水解大豆浓缩磷脂，经过正交试验得到最佳工艺条件：浓缩磷脂和水比例5：2；加酶量173．2IU／g浓缩磷脂；反应温度65℃，钙离子浓度0．1mol／L。研究了溶血磷脂产品乳化性能，结果表明其HLB值大于8，能很好的乳化O／W型体系。     

磷脂酶A_2水解大豆浓缩磷脂的研究(I) 富水相的水解及反应速度的测定

研究了磷脂酶A2 在水相 (富水 )中水解大豆浓缩磷脂 ,经过正交试验得到最佳工艺条件 :底物浓度 10 %,反应温度 5 5℃ ,pH值 8.5 ,Ca2 +浓度 0 .2mol/L。反应的水解率在 75 %～ 85 %。并研究了水解时间和水解速度的关系。     

磷脂酶A2水解大豆浓缩磷脂的研究(Ⅰ)富水相的水解及反应速度的测定

研究了磷脂酶A2在水相(富水)中水解大豆浓缩磷脂，经过正交试验得到最佳工艺条件：底物浓度10％，反应温度55℃，pH值8．5，Ca^2 浓度0．2mol／L。反应的水解率在75％～85％。并研究了水解时间和水解速度的关系。     

磷脂酶A1水解大豆浓缩磷脂研究

该研究采用磷脂酶A1水解大豆浓缩磷脂,通过单因素实验确定各因素合适范围,利用响应面实验方法,得到磷脂酶A1水解大豆磷脂最佳工艺条件为:反应温度51℃、反应时间6h、加酶量3．6％、 pH值5．0、底物浓度0．25 g／mL;利用气相色谱仪分析水解前后磷脂脂肪酸组成,硬脂酸完全水解,棕榈酸含量从20．2％减至5．1％。     

贫水相磷脂改性及改性产品性能的研究

以大豆浓缩磷脂为底物,探讨了贫水相中磷脂酶A1改性大豆浓缩磷脂的可行性。利用单因素实验确定了最佳反应条件,同时对产品的乳化性能进行了研究。实验获得的最佳反应条件为:反应温度50℃,加酶量500μg/g,初始pH 6,反应时间12 h,底物大豆浓缩磷脂质量分数75%。在此条件下所得改性产品的HLB值为10。     

浓缩磷脂的酶法改性研究

研究了磷脂酶A2在水相中水解浓缩磷脂的最佳工艺条件：底物浓度10％，反应温度55℃，pH值8．5，Ca^2 浓度0．2mol/L。在最佳条件下得到产品经HPLC检测，PC的转化率为92．7％，并研究了水解速度与时间的关系。水解得到的溶血磷脂产品的HLB大于8。     

磷脂酶A_2水解蛋黄磷脂工艺及改性蛋黄性质的研究

研究磷脂酶A2水解蛋黄卵磷脂的工艺及产品的功能性质。得到最佳工艺条件为：不需要外加Ca^2＋,pH7．0,反应温度为50℃,加酶量为2000 U／g蛋黄,反应时间为1．5h,得到磷脂的水解率约为80％。功能性质表明,与普通蛋黄相比,改性蛋黄具有更好的乳化稳定性,乳化容量提高了近25％;改性蛋黄制作的蛋黄酱经受100℃,30min热处理不会有油析出,普通蛋黄制作的蛋黄酱几乎全部破乳。     

磷脂酶A2水解菜籽油脚的研究

油脚中含有丰富的磷脂,磷脂的酶改性产物溶血磷脂有极广的应用。以菜籽油脚为底物,以实验室自制的磷脂酶A2为水解酶,采用水相反应方式,通过单因素实验和多因素正交实验,分别对底物用量、Ca2 添加量、反应温度、起始pH等因素进行了系统的研究。结果表明,菜籽油脚酶解的最佳条件为:底物浓度20%,钙离子浓度0.3%,温度50℃,起始pH8.0。在最佳条件下,FFA生成量可达到172.3μmol/g。     

大豆粉末磷脂的酶解工艺及产物性能研究

研究了放线菌型磷脂酶A2在水相中酶解大豆粉末磷脂的工艺条件,确定了最佳工艺组合为底物浓度10%,Ca2 浓度10mmol,温度40℃,初始pH值7.5,水解时间19h,磷脂转化率达43.3%;同时从宏观和微观两角度对酶解磷脂的乳化性能进行了研究,结果表明:酶解磷脂的乳化稳定性约为粉末磷脂的3倍,相同乳化能力下用量可减少50%,达到氧化平衡时的过氧化值为粉末磷脂的41.0%。     

磷脂酶A1催化水解大豆浓缩磷脂的研究

研究了反应温度、加酶量、底物比(水/磷脂,mL/g)、反应时间对磷脂酶A1水解大豆浓缩磷脂的影响。采用正交设计方法,确定了各因素影响的显著性顺序为:底物比>反应温度>反应时间>加酶量;磷脂酶A1水解大豆浓缩磷脂的最佳工艺条件为:反应温度40℃,加酶量600μL,底物比12,反应时间10h。最佳工艺条件下产物酸值达129.6mgKOH/g。      

磷脂酶A1水解卵磷脂的研究靠

研究磷脂酶A1水解卵磷脂的条件,确定最佳的酶解条件为酶解温度50℃,水∶磷脂(w/w)50,反应溶液pH 8.0,酶解时间9h,添加50μL 0.3mol/L Ca2 溶液及100μL磷脂酶A1溶液。     

水相体系中磷脂酶A1酶解南极磷虾磷脂制备溶血磷脂的分析

采用磷脂酶A1（phospholipase A1,PLA1）在水相体系中酶解南极磷虾磷脂,以期得到富含二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）的溶血磷脂。以酸价衡量磷脂酶解程度,通过高效液相色谱对酶解前后磷脂组分进行分析,结合甘油磷脂酰胆碱（glycerol phosphatidylcholine,GPC）含量分析进一步证实酰基位移现象,并利用气相色谱-质谱分析磷脂酶解前后脂肪酸组成。结果表明：酸价随加酶量的增加呈现先上升后下降的趋势。随着酶解时间的延长,Sn-2-溶血磷脂酰胆碱（Sn-2-lysophosphatidylcholine,Sn-2-LPC）含量先增加后趋于平衡,Sn-1-溶血磷脂酰胆碱（Sn-1-lysophosphatidylcholine,Sn-1-LPC）含量先升高后降低,这是由于部分Sn-2-LPC发生酰基位移生成Sn-1-LPC,而Sn-1-LPC又进一步被PLA1酶解生成GPC,且在较短酶解时间内,温度对酰基位移的影响不大。最后通过气相色谱-质谱分析得出酶解产物Sn-2-LPC中EPA和DHA含量较高,且其乳化稳定性也得到了提高。     

有机相酶法制备溶血磷脂工艺

以大豆浓缩磷脂为原料,通过响应面分析法研究有机相酶法制备溶血磷脂的工艺条件,得出溶血磷脂酸值与影响因素间的回归模型,根据模型进行工艺参数优化。同时,用红外光谱法和高效液相色谱法对所得磷脂进行分析。结果表明,在正己烷有机相中利用磷脂酶A1制备溶血磷脂的最佳工艺参数:反应温度50℃、反应时间13h、加酶量4%、加水量17%、磷脂质量浓度24g/100mL,该条件下磷脂酸值为73.8mg KOH/g。该脱油溶血磷脂中磷脂酰胆碱和1-酰基-溶血磷脂酰胆碱含量分别为6.79%和4.45%。     

重组乳酸克鲁维酵母产磷脂酶A2发酵条件的优化

利用重组乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis）GG799表达磷脂酶A2,对其产酶发酵条件进行研究。采用单因素试验和正交试验对培养基及培养条件进行优化,确定了重组菌产酶的最佳发酵条件。结果表明：最优培养基组成为葡萄糖30 g/L、酵母粉20 g/L、蛋白胨30 g/L、KH2PO4 3 g/L;最优培养条件为：发酵温度30 ℃、接种量2%（V/V）、初始pH?7.0、装液量90 mL/250 mL三角瓶、摇床转速220 r/min,在此条件下发酵培养,酶活力由（1.87±0.12）U提高到（5.35±0.27）U。     

氧弹燃烧-灰化分光光度法测定胡麻卵磷脂的含磷量

采用氧弹燃烧灰化进行样品的预处理,用水作为吸收剂进行吸收,然后用磷钼蓝分光光度法测定精制胡麻卵磷脂的含磷量,检测波长为690nm,结果表明在0.4×10-4～3.2×10-4mg/ml范围内浓度与吸光度呈良好的线性关系,相关系数r=0.9994;考察了显色时间对测定结果的影响,选择了最佳的沸水浴时间,精密度实验和准确度实验结果满足含量测定要求,平均回收率为99.7%,RSD=1.46%;样品含磷量测定结果为4.68%,超过国家标准(≥2.70%)。该方法准确、简单、易行,可以直接应用于测定胡麻卵磷脂的含磷量。