利用电子自旋共振技术研究黄海海燕体壁多糖的体外抗氧化活性

以新鲜黄海海燕体壁为原料,制备粗多糖及精多糖。采用电子自旋共振波谱技术(ESR),检测不同浓度的黄海海燕体壁粗多糖及精多糖对羟基自由基、DPPH和超氧阴离子的清除能力。结果表明:黄海海燕体壁粗多糖及精多糖对羟基自由基、DPPH和超氧阴离子的清除能力随浓度升高而增强,黄海海燕体壁粗多糖对3种自由基清除能力的IC50值分别为59.56,27.29,32.36mg/mL;精多糖对3种自由基清除能力的IC50值分别为44.96,13.97,30.51mg/mL。在相同多糖干粉浓度下,黄海海燕体壁精多糖对羟基自由基、DPPH和超氧阴离子的清除能力强于黄海海燕体壁粗多糖。     

黄海海燕体壁胶原蛋白肽的制备及其抗氧化活性

以黄海海燕体壁为原料提取胶原蛋白,采用SDS-PAGE电泳检测胶原蛋白的纯度;再分别用胃蛋白酶和木瓜蛋白酶在各自最适条件下水解胶原蛋白,经10 ku的超滤膜超滤后,制备出分子量小于10 ku的胶原蛋白肽;并应用电子自旋共振波谱技术检测胶原蛋白肽的抗氧化活性。结果表明,提取的胶原蛋白纯度高,具有完整三螺旋结构;胃蛋白酶与木瓜蛋白酶对胶原蛋白的水解度分别为(5.46±0.14)%和(5.04±0.37)%;胶原蛋白肽对DPPH自由基的清除能力随着浓度的升高而提高,浓度为20 mg/mL,胶原蛋白肽(胃蛋白酶组)和胶原蛋白肽(木瓜蛋白酶组)对DPPH的清除率分别为(52.10±0.10)%和(46.78±0.09)%。     

黄海海燕内脏脂质的提取分析及其抗氧化活性的研究

以黄海海燕内脏为原料,应用四种蛋白酶辅助有机溶剂法提取黄海海燕内脏脂质,采用气相色谱-质谱法分析了脂质的脂肪酸组成,同时评价了脂质对细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,碱性蛋白酶组（Alc）、中性蛋白酶组（Nue）、木瓜蛋白酶组（Pap）和胰蛋白酶组（Try）辅助有机溶剂法提取的脂质得率分别为6.1%±0.02%,6.77%±0.06%,7.96%±0.04%和5.48%±0.02%;多不饱和脂肪酸分别占总脂肪酸的50.11%±0.21%,47.67%±3.78%,50.45%±0.76%和40.84%±0.14%,其中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸为主要成分;脂质可以显著抑制过氧化氢引起的细胞氧化损伤,具有一定的体外抗氧化活性。      

银鲳酶解物抗氧化活性研究

选用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶对银鲳蛋白进行酶解以制备蛋白酶解物,以羟基自由基清除活性为指标确定银鲳最佳水解酶。结果显示,碱性蛋白酶的水解物抗氧化活性最强。实验对碱性蛋白酶水解银鲳的酶解条件(时间、温度、pH、酶添加量和固液比)进行正交实验设计,并对最佳水解条件下所获得的酶解物进行抗氧化活性测试。结果表明,银鲳蛋白碱性蛋白酶水解物对DPPH自由基和羟基自由基具有清除作用,其自由基清除效果呈现剂量依赖性,而且银鲳蛋白水解物还具有明显还原能力。所有这些体外抗氧化数据说明,银鲳蛋白水解物有明显的抗氧化效力。     

银鲳酶解物抗氧化活性研究

选用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶对银鲳蛋白进行酶解以制备蛋白酶解物,以羟基自由基清除活性为指标确定银鲳最佳水解酶。结果显示,碱性蛋白酶的水解物抗氧化活性最强。实验对碱性蛋白酶水解银鲳的酶解条件(时间、温度、pH、酶添加量和固液比)进行正交实验设计,并对最佳水解条件下所获得的酶解物进行抗氧化活性测试。结果表明,银鲳蛋白碱性蛋白酶水解物对DPPH自由基和羟基自由基具有清除作用,其自由基清除效果呈现剂量依赖性,而且银鲳蛋白水解物还具有明显还原能力。所有这些体外抗氧化数据说明,银鲳蛋白水解物有明显的抗氧化效力。      

鸡骨酶解物的抗氧化活性研究

分别选用复合风味蛋白酶、Protamex复合蛋白酶、Alcalase蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、AS.1398中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解鸡骨泥,研究鸡骨酶解物(蛋白质含量3 mg/mL)对DPPH、羟自由基(OH·)的清除能力及其还原性.试验结果表明:Protamex复合蛋白酶酶解鸡骨产物的DPPH清除率最强,即81.44%;复合风味蛋白酶酶解物OH·清除率达30.32%,还原性测定的吸光值为0.3.总之,鸡骨酶解物的DPPH清除能力强于羟自由基清除能力和还原力.在研究不同浓度和水解度对鸡骨酶解物清除DPPH活性的影响时发现,随着酶解物蛋白质质量浓度的增大,酶解物的DPPH清除率升高.复合风味蛋白酶、Protamex复合蛋白酶的鸡骨酶解物蛋白质质量浓度分别为4、6mg/mL时,其DPPH清除率分别达91.49%、97.3%.但DPPH清除率与水解度不呈正相关性,只有在特定水解度下,使抗氧化肽含量最高时,水解物才表现出最强的抗氧化能力.例如复合风味蛋白酶、AS.1398中性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶、胰酶的最佳水解度分别为12.59%、23.78%、14.45%、20.04%.     

鲶鱼骨酶解物抗氧化活性及其稳定性研究

探讨鲶鱼骨酶解物体外抗氧化活性及其抗氧化稳定性。测定不同浓度酶解物对羟自由基(.OH)、H2O2和超氧阴离子自由基(O2-)的清除效果,观察其抗氧化活性及其剂量效应关系;将酶解物溶液进行不同pH、温度、微波以及紫外光照射处理,观察其抗氧化活性的变化。结果表明:在试验浓度下,酶解物对.OH、H2O2和O2-均有较强的清除能力,其清除作用随着酶解物浓度的增加而增强,清除作用的IC50分别为6.47、15.96、12.50 mg/mL;在pH2~9范围内、80℃~121℃加热条件下,以及20 min~120 min紫外线照射和0 min~5 min微波处理时,酶解物的总体抗氧化活性变化不大。鲶鱼骨酶解物具有较强的抗氧化作用且抗氧化活性基本稳定。     

鸡肉酶解物提高小鼠的抗疲劳及抗氧化活性

论文研究了鸡肉酶解物EP1和EP2的抗疲劳及抗氧化效果。以生理盐水及鸡肉匀浆[蛋白质剂量200 mg/(kg·bw·d)]作为对照组,以40 mg/(kg·bw·d)和200 mg/(kg·bw·d)两个剂量的鸡肉酶解物EP1和EP2对实验小鼠进行灌胃实验28 d后,测定小鼠的力竭游泳时间、游泳30 min后的血清尿素氮含量、血清乳酸含量及肝糖原含量,并分析了小鼠血清中SOD(超氧化物歧化酶)、GSH-Px.(谷胱甘肽过氧化物酶)和CAT(过氧化氢酶)等主要抗氧化酶的活性。结果显示,鸡肉酶解物能够有效延长小鼠的力竭游泳时间(SC组为766 s,而H-EP1组可达到2307 s);显著降低游泳30 min后小鼠的血清乳酸含量(SC组为10.06 mmol/L,H-EP1组和H-EP2均为6.66 mmol/L)及血清尿素氮含量(SC组为19.72 mmol/L,H-EP1组仅为13.34 mmol/L)),提高肝糖原含量(SC组为5.11 mg/g,H-EP2组可达到8.35 mg/g);显著提高游泳30 min后小鼠的血清中SOD(从89.08 U/mL提高到160.13 U/mL)、CAT(从0.25 U/mL U/m L提高到0.29 U/mL)和GSH-Px.(从257.36 U/mL提高到597.08 U/mL)等抗氧化酶的活性。研究结果提示,鸡肉酶解物EP1和EP2能够显著延长实验小鼠的力竭游泳时间,减少实验小鼠激烈运动时肝糖原的消耗和乳酸的产生与沉积,促进实验小鼠体内蛋白质的代谢及有效清除血清尿素氮,提高实验小鼠机体的血清SOD、CAT及GSH-Px.等抗氧化酶的活性,增强机体清除自由基的能力,改善小鼠的运动状况,确保小鼠在激烈运动状态下机体处于有氧运动模式,从而降低激烈运动后机体的疲劳程度,具有显著的抗疲劳和抗氧化效果。     

贻贝蛋白的酶解及其酶解物的抗氧化活性研究

比较了6种不同的蛋白酶(胰蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶)对贻贝粗蛋白的酶解效果,确定碱性蛋白酶为最适用酶。用此酶制备不同水解度(DH 6%、DH 11.5%、DH16%、DH 20%、DH 25%)的贻贝蛋白酶解物,考察不同DH酶解产物的抗氧化活性。试验结果表明:贻贝酶解产物具有较强的抗氧化活性,并呈一定的量效关系;当DH为25%时,贻贝酶解物对DPPH自由基、超氧自由基、羟基自由基的清除率最高,分别为77.4%、75.2%、43.4%,同时具有最强的金属螯合率(64.7%);而DH为16%时,酶解物对亚油酸的过氧化抑制作用较还原型谷胱甘肽强,达65.6%。DH对酶解产物的抗氧化活性有一定的影响,但在不同的抗氧化体系中,影响趋势不一致。     

罗非鱼皮明胶酶解物及其模拟消化产物的抗氧化活性

以罗非鱼皮为原料提取罗非鱼皮明胶,选用风味蛋白酶和胰蛋白酶制备罗非鱼皮明胶酶解物,采用ABTS自由基、DPPH自由基、羟基自由基及亚油酸过氧化体系,初步评价罗非鱼皮明胶酶解物的抗氧化活性,再通过模拟体外胃肠道消化实验,结合分子质量分布测定,进一步考察罗非鱼皮明胶酶解物的抗氧化活性。结果显示,在酶解过程中,风味蛋白酶及胰蛋白酶酶解的水解度逐渐升高,在3 h时达到最高,分别达到5.8%和25.36%。在酶解60 min时其TCA可溶性肽得率最高,风味蛋白酶、胰蛋白酶酶解物分别达56.82%和54.44%。通过比较半抑制浓度（IC₅0）,确定了酶解60 min时风味蛋白酶酶解物的清除DPPH自由基及抑制亚油酸过氧化能力较胰蛋白酶酶解物强。模拟体外胃肠道消化后,酶解物羟基自由基清除活性均显著提高（p<0.05）,亚油酸脂质过氧化活性明显降低,消化前后样品分子量分布范围均主要集中于3000⁵000 Da,消化后风味蛋白酶及胰蛋白酶酶解物3000⁵000 Da组分的含量分别提高了45%及13%。以上研究结果表明,罗非鱼皮明胶酶解后制备的明胶水解物具有一定的抗氧化能力,具有潜在的开发价值。      

电子自旋共振技术及其在食品脂质氧化检测中的应用进展

电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)技术是以含未成对电子的物质如自由基、过渡金属离子、三重态分子等为检测对象的光谱分析技术。因其能通过检测未成对电子而分析有机导体、金属化合物、化学物质的光合作用,故其广泛应用于物理、化学、医学、生物等研究领域。又因ESR技术可对食品成分发生物理、化学变化产生的自由基进行定性和定量分析,故其在食品检测领域也具有广泛的应用。本文首先介绍了食品中的脂质氧化、ESR技术的原理、自旋捕获法及捕获剂的选择依据,明确了脂质氧化早期可产生自由基与基于自旋捕获法的ESR技术可定性、定量自由基之间的关系。在此基础上,重点综述了畜禽肉制品、水产品、植物油脂等富脂食品在加工、贮藏过程中,ESR技术检测其脂质是否发生氧化反应及氧化反应程度的研究进展。为ESR技术在食品脂质氧化检测中的广泛应用提供理论依据。     

文蛤蛋白酶解液的制备及自由基清除活性的研究

以文蛤为原料,利用木瓜蛋白酶对其进行水解,以水解度为指标确定最佳水解条件。在此基础上通过正交试验,以自由基清除率为指标,对水解条件进行了优化,结果表明在温度55℃、水解时间90min、加酶量1.5%、料︰水=1︰3、pH6.5条件下可以获得好的自由基清除能力。     

Antioxidant activity of peptide fractions derived from cottonseed protein hydrolysate

BACKGROUND: Cottonseed protein is widely regarded as a potential source of nutrients for humans and animals, but it is mainly used as forage in China. In the present study, Neutrase was employed to hydrolyse cottonseed protein to produce a hydrolysate with antioxidant activity suitable for conversion to high‐value products. The antioxidant potential of the cottonseed protein hydrolysate (CPH) and its fractions was investigated using different in vitro methods. Furthermore, the amino acid composition of the CPH fractions was determined to evaluate the relationship between antioxidant activity and amino acid composition. RESULTS: The CPH prepared using Neutrase was separated into four fractions (I, II, III and IV) by gel filtration on Sephadex G‐25. All fractions were effective antioxidants, with fraction III (0.8–1.2 kDa) showing the strongest activity. The amino acid analysis showed that fraction III also had the highest total amino acid content (616.8 g kg^?1 protein) and was rich in Phe, His, Pro, Met, Ile and Cys compared with the other fractions. CONCLUSION: The results showed that the hydrolysate derived from cottonseed protein, particularly fraction III, could be a natural antioxidant source suitable for use as a food additive. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry     

杜仲叶酶解液辅助提高醋抗氧化活性的研究

为探究杜仲叶酶解液与醋的协同作用、杜仲叶酶解液对醋的抗氧化活性的影响,以杜仲叶酶解液、杜仲醋为主要样品,研究了DPPH自由基清除活性、羟自由基清除活性和还原力。结果表明:杜仲叶酶解液具有较强抗氧化活性,应用到食品时,产品中绿原酸(CA)含量应不小于10μg/mL。依据以上结果,配制镇江香醋和酶解液的混合溶液EV9和EV19,通过测定抗氧化活性得到:EV9、EV19的抗氧化活性分别显著高于各自对照(p<0.05),但均略低于杜仲叶酶解液。杜仲叶酶解液能够辅助提高醋的抗氧化活性,为杜仲叶在食品中的应用提供了理论基础。      

A comparative study of physico‐chemical properties and antioxidant activity of freeze‐dried mung bean (Vigna radiata) and adzuki bean (Vigna angularis) sprout hydrolysate powders

Mung bean (MB) and adzuki bean (AZB) sprouts were hydrolysed with Flavourzyme^® at four different concentrations for 6 h. Nongerminated beans subjected to each enzyme concentrations were set as the control. For both bean sprouts, the highest amounts of free amino group, total free amino acids and total phenolic content (TPC) were obtained with 7% (w/w) Flavourzyme^®. Each bean sprout hydrolysate was subjected to freeze‐drying in absence and presence of 5% maltodextrin (w/v). The addition of maltodextrin resulted in a decrease in the free amino group, TPC, surface hydrophobicity and hygroscopicity in resulting freeze‐dried powders. Gallic acid, p‐coumaric acid and vitexin were identified in all freeze‐dried powders, while catechin and rutin were detected only in freeze‐dried AZB hydrolysate powder. Freeze‐dried AZB hydrolysate powder contained higher antioxidant activities. DPPH radical scavenging activity of all samples measured using electron spin resonance spectrometry was higher than that obtained by the colorimetric method.     

Identification of phenolic compound in manuka honey as specific superoxide anion radical scavenger using electron spin resonance (ESR) and liquid chromatography with coulometric array detection

Apitherapy has become the focus of attention as a form of folk and preventive medicine for treating certain conditions and diseases as well as promoting overall health and well‐being. In apitherapy, honey is the therapeutic agent used for dressing surgical wounds, burns or skin ulcers, as well as for dyspepsia, peptic ulcer, etc., because of its antioxidant activity. Therefore, it is important to determine the antioxidants in honey by analytical techniques. In the present study, the antioxidant activities of honeys from different floral sources were investigated by electron spin resonance (1,1‐diphenyl‐2‐picrylhydrazyl (DPPH) and H₂O₂/NaOH/DMSO scavenging systems), liquid chromatography with coulometric array detection (LC‐ED), and liquid chromatography with electrospray mass spectrometry (LC‐MS). The antioxidant activities of some unifloral honeys (acacia, Chinese milk vetch, buckwheat and manuka) were evaluated using the radical scavenging systems. It was shown that DPPH radical scavenging activity was significantly different among the honeys, with buckwheat and manuka honeys having significantly higher scavenging activity than acacia honey. In addition, only manuka honey had specific scavenging activity for superoxide anion radicals. The compound responsible for this activity in manuka honey was identified by LC‐ED and LC‐MS. Careful examination of the LC‐ED chromatographic patterns of manuka and other honey samples revealed a distinct peak in the chromatogram of manuka honey to be methyl syringate (MSYR). The radical scavenging activity of MSYR was specific for superoxide anion radicals, similar to the case of manuka honey. Copyright © 2005 Society of Chemical Industry     

啤酒产生和清除自由基的双重性质

本文利用自旋捕集技术，采用电子自旋共振（ESR）仪研究了啤酒经保温产生自由基以及啤酒自身清除二苯代苦味酰肼自由基（DPPH）的过程，说明啤酒具有产生和清除自由基的双重性质。文章初步探讨了啤酒酿造及贮存过程中易于形成自由基和发生自由基链反应的工艺阶段，以及清除自由基的物质种类及来源。