铜绿假单胞菌产抗菌代谢产物发酵条件的优化

以分离的铜绿假单胞菌作为实验菌株,以对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑制效果及菌体干重为评价指标,采用单因素实验、正交实验优化铜绿假单胞菌产抗菌物质的培养基组分和发酵条件。结果表明:优化的培养基组分为黄豆粉2.5 g·L~(-1)、大豆蛋白胨10 g·L~(-1)、磷酸氢二钠10 g·L~(-1),优化的发酵条件为接种量2%、初始pH值7、发酵时间96 h。     

对苯二甲酸生产废水高效生化处理的影响因素研究

采用响应曲面方法考察了时间、温度及pH值对铜绿假单胞菌(PA—18)生化处理模拟对苯二甲酸(PTA)生产废水的影响；并就微量重金属离子Co^2 、Mn^2 对菌体降解PTA的影响进行了研究。最终确定了PA-18菌生化处理PTA废水的优化条件。     

荧光光电法检测化妆品中致病菌的研究

建立了一种利用荧光光电技术快速检测化妆品中致病菌的方法。分别对化妆品中的大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌进行检测。结果显示此方法检测大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的特异性良好,检测菌液和人工污染爽肤水及乳液样品的灵敏度均达到100cfu·mL-1,总检测时间可控制在14 h以内。     

化妆品中致病菌检测规范方法和微生物富集方法的评价

为考察《化妆品安全技术规范》（2015年版）的方法（以下简称规范方法）中培养基质量对试验结果的影响，以及微生物富集方法（microbial enrichment general，以下简称ENR方法）和规范方法的适用性和一致性，以20株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌及其染菌样品进行试验，比较了4种不同品牌培养基对规范方法试验结果的影响。结果显示，4种品牌培养基对金黄色葡萄球菌检测结果和化妆品染菌样品的检出率存在显著差异，ENR方法的适用性检测结果显著优于规范方法。基于试验结果，本研究发现市售培养基质量良莠不齐；对于化妆品染菌样品，ENR方法的检出率显著优于规范方法。     

重组铜绿假单胞菌外毒素A工程菌发酵及表达产物的纯化

目的建立稳定、高效表达重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)的工程菌发酵及表达产物纯化工艺。方法规模化发酵表达rEPA的重组大肠杆菌rPE553D,离心收集菌体,渗透压调解使菌体周质间隙蛋白释放后,高速离心收集蛋白溶液。经DEAESepharoseFF、PhenylSepharose6FF疏水层析和SOURCE30Q强离子交换层析,超滤浓缩纯化rEPA。用HPLC、SDS-PAGE和Westernblot等方法检定生化和免疫学特性,并用小鼠和Vero细胞检定毒性。结果每55L培养基中rEPA产量超过4g,纯度在95%以上,细胞毒性降低了至少32000倍。其余各项指标均符合《中国生物制品规程》要求。结论已建立了收率高、纯度好、稳定、适合规模化生产rEPA的工艺。     

铜绿假单胞菌分泌鼠李糖脂能力对原油降解影响的研究

研究了铜绿假单胞菌分泌鼠李糖脂能力对原油生物降解的作用.将保存在原油中的铜绿假单胞菌转接至甘油培养基进行继代培养,观察到各继代培养下鼠李糖脂分泌量越高则该发酵液对原油的乳化降解能力就越强,推测该菌产鼠李糖脂能力决定了该培养液对原油的乳化与降解程度.鉴于此,分别将鼠李糖脂提取液、发酵液加入到原油培养基中,观察其各自的原油乳化程度的变化趋势,发现鼠李糖脂本身可以乳化原油但不能降解原油,且其乳化能力不如去菌体的发酵液.去菌体发酵液能很快地乳化原油而同样不能降解原油.只有含菌体的发酵液既能乳化又能降解原油.因此,可以认为鼠李糖脂本身具有乳化原油的能力,但是由铜绿假单胞菌同时分泌的其它表面活性物质可能协同鼠李糖脂更好地乳化原油以促进微生物对原油的利用与降解.     

天麻蛋白制备抗铜绿假单胞菌多肽最佳胃蛋白酶水解条件

为研究天麻蛋白在胃蛋白酶水解条件下获得的多肽对铜绿假单胞菌抗菌活性.以牛津杯法测得的抑菌圈大小为指标,考察水解温度、水解时间、水解pH单因素对天麻蛋白水解产物抗菌活性的影响.在单因素基础上设计正交试验获得具最强抑菌活性的多肽水解工艺.结果表明:当水解温度37℃,水解时间3 h和水解pH为4时,天麻蛋白水解物具最强抗铜绿...     

建筑供水管道材料对水化学性质、微生物群落和条件致病菌的交互影响机制研究进展

饮用水安全与公众健康息息相关，而供水管道材料的选择会影响饮用水化学性质、微生物生长，甚至是致病菌定殖。近年来，包含了原核病原体(如：嗜肺军团菌、非结核分枝杆菌)和真核病原体(如：棘阿米巴)在内的一类新型饮用水条件致病微生物引发了公众健康安全担忧，通过管材优选控制条件致病菌及其他微生物生长，具有研究价值和应用潜力。文章综述了建筑供水管网金属管材和塑料管材在不同环境条件下(如消毒剂、停滞时间、温度)对水化学性质的影响，分析了不同管材影响下微生物载量和群落结构组成的差异，剖析了管材对条件致病菌定殖的直接影响，以及在环境因子交互作用下的间接效用，提出了深化认识供水系统中真核微生物群落结构多样性及新兴管材的微生物安全风险的研究需求。     

建筑热水系统中的军团菌赋存水平及影响因素

建筑热水系统水质微生物安全,对公众健康至关重要。文中介绍了我国华东地区某宾馆建筑热水系统研究结果,采用常规水质指标检测及q-PCR定量分析,了解建筑热水系统中军团菌(Legionella spp.)的存在水平、时空分布特征及其影响因素。建筑热水系统的军团菌检出率为100%,含量为1.57×10⁴～3.55×10⁵ copies/mL;嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)检出率为50%,含量为33.45～259.00 copies/mL,其中热交换器中含量最高;宾馆热水温度低、浑浊度高是造成军团菌含量增加、嗜肺军团菌检出的重要原因;磷可能是军团菌的限制性生长因素。因此,通过适当提高热交换器热水供应温度、降低水的浑浊度、控制水中磷的含量等措施可有效控制军团菌生长繁殖,保障水质生物安全。     

重组铜绿假单胞菌外毒素A含量SDS-PAGE检测方法的建立及验证

目的建立测定重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant exotoxin of Pseudomonas aeruginosa,r EPA)含量的SDSPAGE法,并进行验证。方法采用SDS-PAGE,经考马斯亮蓝R-250染色后,利用Image Lab软件分析获得目标蛋白条带光密度值,计算目标蛋白在待测样品中的含量。对建立的方法进行专属性、准确性和重复性验证,确定检测范围,并用建立的方法检测r EPA宿主湿菌体中r EPA发酵产量及r EPA宿主菌休克液柱层析纯化样品中r EPA含量。结果 r EPA含量在100~600μg/ml范围内与其对应条带的光密度值具有良好的相关性,决定系数在0.97以上。大肠埃希菌固有组分及纯化过程中常用的添加物对r EPA含量检测均未产生明显影响,专属性较好;用建立的方法检测500、300、150μg/ml r EPA样品10次的回收率分别为(102.32±4.18)%、(102.77±4.94)%和(95.04±16.41)%,CV值分别为4.08%、4.81%和17.27%。各批r EPA发酵产量为250~500 mg/L,三步柱层析纯化后,r EPA总回收率约为50%。结论建立了测定r EPA含量的SDS-PAGE法,该方法专属性、准确性和重复性良好,为r EPA生产工艺的优化奠定了基础。     

正十六烷降解菌的分离、鉴定及降解特性

以正十六烷为唯一碳源进行选择性富集培养,从石油污染土壤中筛选出1株正十六烷降解菌;根据形态观察和自动化鉴定分析,初步确定其为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa);采用气相色谱法测定了其对正十六烷的降解作用。结果表明,该菌株降解正十六烷的作用明显,在pH值为7.0时降解效果最好。     

酶催化合成L-半胱氨酸产酶培养基及产酶条件的研究

假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138经DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-ATC)的诱导,在菌体内能产生催化该诱导物生成L-半胱氨酸的酶系.对产酶培养基及产酶条件进行了研究,得出DL-ATC的最适添加量为0.5%,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为尿素,最适培养温度为27～29℃,最适摇瓶装液量为40mL.根据摇瓶优化结果,进行了7 L罐试验,酶活力最高达1 780 U/mL.     

假单胞菌O-2-2产鼠李糖脂的结构表征及理化性质

利用液相色谱/质谱联用仪分析了铜绿假单胞菌O-2-2以正十八烷为碳源所产鼠李糖脂生物表面活性剂的组成。共检出21种鼠李糖脂的同系物,都由1~2分子的鼠李糖和1~2个含β-羟基的碳链长度为8~12的饱和或不饱和脂肪酸构成;主要组分为α-L-吡喃鼠李糖苷-β-羟基癸酰-β-羟基癸酸和2-O-α-L-吡喃鼠李糖苷-α-L-吡喃鼠李糖苷-β-羟基癸酰-β-羟基癸酸。该糖脂类生物表面活性剂可将水的表面张力降至28·6mN/m,临界胶束浓度为1·3×10-4mol/L,在120℃加热4h或者在ρ(NaCl)=100g/L或ρ(CaCl2)=20g/L的盐溶液中仍能保持表面活性。     

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌耐药机制及高危因素的研究进展

碳青霉烯是一种非典型内酰胺类药物,因为它抗菌谱广,抗菌能力强等特征,临床上常用于医治重大的细菌感染。近期,随着此类药物的普遍运用,致使一些肠杆菌科细菌(如铜绿假单胞菌)对其敏感性逐年下降。此类现象的出现,导致临床对这类细菌的医治相当棘手。本文将从耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(Carbapenem resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)耐药机制及高危因素的角度出发,为临床控制和治疗耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌提供帮助。     

2003年至2010年铜绿假单胞菌的耐药性变迁及临床对策

目的调查及分析临床分离的铜绿假单胞菌的耐药性及其变迁,为临床合理用药提供依据。方法对医院2003年1月至2010年12月住院患者各种标本中分离到的铜绿假单胞菌1124株,采用20种抗菌药物进行药敏试验,并比较4年的变迁。结果分离到的铜绿假单胞菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢替坦、头孢唑林、呋喃妥因、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率均>90.00%;对碳青酶烯类美罗培南产生了51.51%的耐药率;对头孢哌酮/舒巴坦、庆大霉素、头孢匹美、头孢他啶、环丙沙星的敏感率均>60.00%;而最敏感的是妥布霉素、阿米卡星。结论铜绿假单胞菌对阿米卡星、妥布霉素敏感性最高,而对其他几种多药耐药现象严重,当引起临床重视。     

红假单胞菌浮选脱硫影响因素研究

采用微生物预处理-浮选联合工艺流程,利用红假单胞菌对高硫煤进行微生物-浮选脱硫实验,重点考察了预处理时间、矿浆浓度、pH值和细菌浓度等因素对浮选脱硫效果的影响．研究结果表明,微生物-浮选脱硫是一种高效的脱硫方法,红假单胞菌是一种有效的浮选脱硫菌种,其预处理时间、体系的pH值、矿浆浓度和细菌浓度等因素对脱硫效果有着显著的影响。     

恶臭假单胞菌降解光氧化褐煤工艺条件优化

从6种细菌(铜绿假单胞菌、黄杆菌、枯草芽孢杆菌、多粘类芽孢杆菌、恶臭假单胞菌和金色葡萄球菌)中筛选出降解光氧化褐煤的优势菌株恶臭假单胞菌,并通过单因素实验优化了恶臭假单胞菌降解光氧化内蒙古胜利褐煤的工艺条件。确定恶臭假单胞菌降解光氧化内蒙古胜利褐煤的最佳工艺条件为:煤加量0.3 g·(20 mL)~(-1)、接种量2.0 mL·(20 mL)~(-1)、培养箱振荡频率160 r·min~(-1)、降解时间12 d、煤样粒度(-0.15+0.075) mm、降解温度30℃。     

异养培养光合细菌产5-氨基乙酰丙酸发酵条件的研究

从废水处理厂的活性污泥中筛选出产5 氨基乙酰丙酸(ALA)的红假单胞菌原始菌株,可产生7 35mg/L的ALA,采用亚硝基胍(NTG)以及紫外线对该菌株进行诱变处理,得到产量为19 12mg/L的菌株C-1。在摇瓶实验过程中,对培养基组成和培养条件进行了初步优化,使菌株产ALA的能力达到了38 9mg/L。     

卡拉胶酶高产菌株YDK-6的筛选、产酶条件优化及酶学性质研究

从腐烂的角叉菜中筛选出卡拉胶酶高产菌株YDK-6,通过形态观察及16S rDNA序列分析对其进行鉴定,采用正交实验对其产酶条件进行了优化,并对其所产卡拉胶酶的酶学性质进行了研究。结果表明,菌株YDK-6为假单胞菌(Pseudomonas sp.);在葡萄糖加量为15 g·L^-1、酵母粉加量为10 g·L^-1、卡拉胶加量为2 g·L^-1、NaNO₃加量为2 g·L^-1、NaCl加量为15 g·L^-1、K₂HPO₄加量为1.00 g·L^-1、MgSO₄加量为0.05 g·L^-1、FePO₄加量为0.01 g·L^-1、CaCl₂加量为0.01 g·L^-1、起始pH值为7.5的条件下,于28℃摇床培养72 h,所产卡拉胶酶的活力达到111.33 U·mL^-1<...     

铜离子吸附假单胞菌MEW079筛选鉴定及其发酵条件优化

为了寻找高效吸附铜离子的菌株,以重金属污水为筛选对象,筛选到一株细菌MEW079.经鉴定,MEW079归属为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).以菌株(菌浓度OD600=1.0)对100 mg/L铜离子的吸附效率为指标,通过单因素实验、最陡爬坡路径试验和Box-Behnken响应面实验,优化了MEW079的发...