绿原酸在肝微粒体和肠道菌群中的体外代谢研究

摘 要：目的 研究绿原酸在大鼠肝微粒体和肠道菌群中的代谢产物及代谢途径。方法 运用大鼠肝微粒体体外温孵法和大鼠离体粪便温孵法,采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS),色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18 (1.7 μm, 2.1 mm×100 mm),流动相为乙腈和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱系统,流速为0.35 mL/min,离子源为电喷雾离子源(ESI),以负离子模式进行检测。采用Masslynx软件通过保留时间与一、二级质谱信息,进行成分分析。结果 大鼠肝微粒体温孵样品中有绿原酸原型成分和奎宁酸、咖啡酸2个代谢产物;粪便温孵样品中有绿原酸原型成分和奎宁酸、3-羟基苯丙酸、二氢咖啡酸、二氢阿魏酸、咖啡酸、O-甲基绿原酸6种代谢产物。结论 UPLC-Q-TOF/MS技术鉴定绿原酸及其代谢产物,操作便捷高效,结果准确全面,绿原酸在体外代谢的主要途径为氢化、甲基化、水解、去羟基化等。     

黄芪多糖对肿瘤模型小鼠红细胞免疫功能的影响

本文研究了黄芪多糖对肿瘤模型小鼠红细胞膜结构组分和免疫功能的影响。黄芪多糖对S180小鼠腹腔注射给药7 d,聚丙烯酰胺凝胶电泳测定小鼠红细胞膜带3蛋白及血型糖蛋白A的相对含量,采用试剂盒测定红细胞膜磷脂、胆固醇和唾液酸含量,荧光偏振法测定红细胞膜流动性。应用流式细胞仪测定红细胞CR1数量;显微镜观察肿瘤红细胞花环率(DTER)和C3b受体花环率(RBC-C3bRR)。黄芪多糖可以使S180小鼠红细胞膜磷脂含量升高0.17 mmol/L、胆固醇含量降低0.06 mmol/L;可以显著增加S180小鼠红细胞膜带3蛋白及血型糖蛋白A的相对含量(2.88%、7.40%)和增加0.23 mmol/L红细胞膜唾液酸含量;提高S180小鼠红细胞膜流动性;还可以使S180小鼠红细胞CR1数量增加5.9%,S180小鼠红细胞DTER和RBC-C3bRR增加3.13%和3.26%。黄芪多糖可以改善肿瘤机体红细胞膜组分及结构,从而维持细胞膜的流动性,恢复红细胞的功能;还可以增加肿瘤机体红细胞CR1的数量,增强红细胞CR1天然免疫活性,改善肿瘤机体红细胞免疫功能。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究

目的 分离纯化桦褐孔菌多糖(Inonotus obliquus polysaccharide, IOP),分析其结构并对其抗氧化活性进行评价。方法 以桦褐孔菌为原材料,采用水提醇沉工艺,经大孔树脂吸附法除杂脱色得到IOP;通过DEAE-52纤维素柱对IOP进行分离纯化,得到4个多糖组分:IOP-1、IOP-2、IOP-3和IOP-4,通过Sephadex G-100凝胶柱纯化得率较高的组分IOP-1,得到均一多糖IOP-1a。对IOP-1a进行结构鉴定,并考察其体外抗氧化能力。结果 IOP-1a相对分子质量为12040Da;由7种单糖组成:葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖和岩藻糖(0.341:0.246:0.150:0.102:0.842:0.559:0.213),红外光谱显示IOP-1a含有β型糖苷键、羰基、羟基等官能团。体外抗氧化实验表明,IOP和IOP-1a均有较好的抗氧化能力。结论 从IOP中分离纯化得到的中性组分IOP-1a具有较好的抗氧化活性。     

芦笋多糖对肿瘤小鼠红细胞离子通道活性的影响

目的:研究芦笋多糖对肿瘤小鼠红细胞离子通道活性的影响。方法:建立了肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予芦笋多糖7 d,采集并制备红细胞悬液,用试剂盒结合分光光度计测定肿瘤小鼠红细胞膜Na+,K+-ATPase、Ca2+,Mg2+-ATPase活性,采用Fluo-3/AM、MQAE、BCECF-AM荧光探针染色,使用激光共聚焦显微镜和荧光分光光度计分别测定小鼠红细胞内[Ca2+]、[CI-]、[H+]浓度的变化。结果:芦笋多糖能升高肿瘤小鼠红细胞膜Na+,K+-ATPase、Ca2+,Mg2+-ATPase活性,降低肿瘤小鼠红细胞内[Ca2+]浓度,增强红细胞阳离子通道转运活性。芦笋多糖能够降低肿瘤小鼠红细胞内[CI-]浓度,增强红细胞阴离子通道转运活性。芦笋多糖还能够降低肿瘤小鼠红细胞内的[H+]浓度,升高红细胞内pH,维持红细胞酸碱平衡。结论:芦笋多糖通过提高肿瘤小鼠红细胞膜离子通道的功能,稳定细胞内环境,从而有助于保护红细胞膜结构,维持红细胞发挥正常功能。     

流式细胞仪检测苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ对SGC-7901细胞增殖的影响

为了进一步研究苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ对人胃癌细胞(SGC-7901)增殖的影响,采用流式细胞仪测定了DNA含量的变化,分析细胞周期的变化.结果表明:苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ促进了SGC-7901细胞由G1期进入S期和G2期,表现为G1期细胞平均DNA含量下降,S期DNA含量上升,G2期DNA含量上升,细胞增殖指数(PI)增加,S期细胞指数(SPF)增加.其中苏丹Ⅲ在50μg.mL-1剂量时对SGC-7901细胞增殖影响非常显著(P<0.01),苏丹Ⅰ、Ⅳ在10μg.mL-1剂量时对SGC-7901细胞增殖影响非常显著(P<0.01).苏丹Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ是通过影响细胞周期,从而调节SGC-7901细胞的增殖活动,促进细胞分化增殖.     

多糖与肠道菌群相互作用的研究进展

多糖是由10个以上的单糖分子通过缩合、失水而成的高分子聚合物,是构成生命体的基本物质之一.大多数多糖不能被人类基因组中编码的酶降解.肠道菌群由寄生在宿主胃肠道内的多种微生物构成.肠道菌群中的拟杆菌门、厚壁菌门、少量放线菌门和变形菌门能够分泌多糖降解酶降解多糖,促进人体对多糖的消化吸收.多糖中不可被直接消化的成分和发酵产...     

高效毛细管电泳法测定香菇多糖中单糖的组成

测定分析纯化的香菇多糖的单糖组分。单糖经α-萘胺衍生化以后,用硼砂做电泳介质,实现高效毛细管电泳分离,得到标准的α-萘胺衍生单糖的毛细管区带电泳谱图。将香菇多糖水解成单糖,用相同的方法实施电泳,得到多糖的毛细管区带电泳谱图。最佳工作条件：运行缓冲液为75mmol／L、pH10.5的硼砂水溶液,分离电压15kV,进样压力0．5Psi,进样时间15s,柱温25℃。通过与标准谱图对照分析,香菇多糖由鼠李糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖和半乳糖组成。高效毛细管电泳能有效分析多糖中单糖组分,灵敏度高,分离效果好。     

A study of the effect of Sudan I, III, and IV on the DNA/RNA ratio and 3D structure of HepG-2 using LCM

Sudans are artificially synthesized red colorants.As industrial colorants,they are widely used for hyper-chromatic effect for solvents,oils,waxes,and petrole-um,and as polish for shoes and floor boards.Sudans are lipophilic azo-compounds,and includemainly sudan I,II,III,and IV.In chemical nomen-clature,sudan I is1-phenylazo-2-naphthalenol,orC6H5=NC10H6OHin structural formula,with a molec-ular weight of248·28,and sudan II,III,and IV are1-[(2,4-dimethylphenyl)azo]-2-naphthalenol,1-{[4-…