基因枪轰击小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导鹅体内体液免疫的机制

将小鹅瘟病毒VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只1μg、3μg和6μg的基因枪轰击免疫30日龄四川白鹅,用免疫组织化学法检测pcDNA-GPV-VP3在鹅体内各组织器官表达情况;用间接ELISA检测免疫鹅血清中GPV抗体滴度.结果:①各剂量免疫组1d时能在免疫部位皮肤,3d时能在心脏/十二指肠/空肠/盲肠/肝脏,7d时在回肠/直肠检测到pcDNA-GPV-VP3的表达;7d表达最多;表达可持续至35～63d;表达产物的数量和表达持续时间总体规律为6μg组＞3μg组＞1μg组.②免疫后第7d血清抗体开始升高,21d达到最大值,免疫后第14～217d极显著(P<0.01)高于PBS和空白质粒对照;体液免疫效果存在一定的剂量依赖.研究表明,pcDNA-GPV-VP3基因枪轰击免疫雏鹅后能在免疫部位皮肤、心肌、肝脏和各肠段中表达并能够诱导雏鹅产生良好的体液免疫.     

季冻区土冻胀量影响因素的灰关联度分析

正交试验设计是安排多因素试验的一种科学方法,灰色关联度法可以分析各因素各水平对正交试验结果影响的主次关系.本文用灰关联度分析法对室内正交冻胀试验结果进行分析,得出长春季冻区土的压实度,含水量及冻结温度对冻胀量影响大小的排序,结果表明,土的含水量与冻胀量的关联度最大,与压实度的关联度次之,与温度的关联度最小。     

小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其诱导小鼠和鹅中和抗体的初报

PCR扩增小鹅瘟病毒（GPV）CHv株VP3基因并克隆入pMD 18-T-Simple载体,亚克隆正向插入到真核表达质粒pcDNA3．1（＋）CMV启动子下游多克隆位点,经PCR和Hind与Bandt I双酶切鉴定表明成功构建了GPVVP3基因疫苗（pcDNA3．1．GPV—VP3）。该疫苗以200μg/只肌注免疫Balb／c小鼠和鹅,同时分别设肌注PBS和pcDNA3．1（＋）作为对照,于免疫后第30、45、60、75、90、105天应用鸭胚原代成纤维细胞（DEF）进行微量中和试验检测小鼠和鹅血清抗100TCID50GPV的抗体效价。结果表明,pcDNA3．1-GPV-VP3免疫小鼠第30天可检测到抗GPV的中和抗体,抗体效价缓慢上升至90天达到高峰（平均1：135．8）后下降,105天仍高于75天;免疫鹅的中和抗体效价呈现与小鼠类似的规律,第90天达到高峰（平均1：98．5）。因此,pcDNA3．1-GPV-VV3具有良好的免疫原性,肌注免疫小鼠和鹅后能够诱发产生抗GPV的中和抗体,有进一步开展临床研究和应用的前景。