过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫反应性研究

目的 探究天然肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP)的可替代物,为蟹类过敏原的检测提供基础材料,本研究首次利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达表达三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)重要过敏原SCP,并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastoris GS115菌株后经遗传霉素(Geneticin, G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(Western blotting, WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 SCP在P. pastoris GS115中实现了可溶性高效表达,其表观分子量约为28 kDa。在摇瓶水平下,最佳诱导条件为pH为6.0、每24 h添加1.0%(v/v)甲醇,于28℃发酵144 h,在此条件下,纯度为91.6%的SCP产量可达15 mg/L。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有IgG结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究为SCP的理化研究及产业化应用奠定了基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。     

三相桥式整流电路功率因数PSPICE仿真分析

分析了LC无源功率因数校正电路和纯阻性负载的三相桥式整流电路所能达到的极限功率因数 ,并在此基础上 ,优化了一种无源校正电路的结构和参数 ,最终将功率因数校正到0 991。     

在Transputer网络上实现五层数值预报模式的试验

本文介绍在Transputer网络上并行计算五层数值预报模式的一个方案:用一个Transputer芯片完成一层的计算量,最大限度地缩小层间数据交换,试验结果的令人满意的.     

一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌噬菌体qdsa002的分离鉴定及其生理学性质研究

为探究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的生物防治方法,从青岛市团岛污水处理厂采集到的污水中分离得到了一株噬菌体qdsa002。借助噬菌斑形态、酶切、电镜等技术对其进行了分类鉴定。研究了其最佳感染复数、一步生长曲线、p H稳定性和热稳定性等生理学特征。结果表明,qdsa002核酸属于线型双链DNA,具有正多面体的头部及较长的尾部,qdsa002头部直径约47 nm,尾长约120 nm,属肌尾噬菌体科。生理学特征研究结果表明,qdsa002在双层平板上能形成清晰透亮的噬菌斑。最佳感染复数为0.001,潜伏期40 min,爆发期180 min。在p H为5~9范围内能够保持良好的生理活性。在温度不高于50℃条件下裂解性能良好。该噬菌体可用于防治MRSA感染的生物制剂。      

酪氨酸酶为基础的时间温度指示系统的初步研究

利用酪氨酸酶催化酪氨酸褐变的原理开发了一种新型的时间温度指示系统（TTIs）。在液态条件下,研究了不同温度对TTIs的褐变程度的影响。并且初步研究了TTIs在固相载体上的颜色变化。结果表明,反应体系在0℃和5℃时,经过0⁴8h体系的颜色由原来的无色变为褐色,最终变为明显的黑色（指示终点,灰度值42.05±2.00）,而在35℃条件下,体系的颜色经过4h就到达指示终点。进一步将酪氨酸固定在海藻酸钠-羧甲基纤维素钠混合薄膜上与酪氨酸酶液进行反应,颜色变化非常显著。实验证明,以酪氨酸酶为基础的酶型TTIs具有良好的发展前景。本研究为我国生鲜食品流通的监测提供了新的选择,为消费者选择物有所值的新鲜食品提供方便。      

高效液相色谱法测定食品中的酸性橙Ⅱ

建立食品中非食用色素酸性橙Ⅱ的高效液相色谱快速检测方法。样品用饱和乙腈提取,经饱和正己烷萃取除去油溶性色素及杂质,采用高效液相色谱柱分离,二极管阵列检测器(DAD)检测,结合标准物质保留时间和DAD光谱图进行定性分析,外标法定量。色谱柱为AgilentZORBAXSB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数0.3%醋酸溶液进行梯度洗脱,检测波长为484nm,线性范围为0.01～1.0μg/mL,相关系数R2=0.9997。采用本方法对乳制品、辣椒粉、辣椒酱、卤肉制品、卤蛋、卤豆腐干6种常见基质进行验证,结果表明,HPLC-DAD测定食品中的酸性橙Ⅱ,对于1.0g样品定容至5mL、进样量为20μL时,检出限为0.05mg/kg;添加标准回收实验表明,本方法在添加水平分别为0.05、0.1、0.2mg/kg时的样品平均回收率在74.9%～100.0%之间,相对标准偏差(RSD)在1.41%～8.64%之间(n=6)。本方法准确、可靠。     

固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定紫菜中扑草净的残留量

目的建立固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定紫菜中扑草净的残留量。方法样品用乙腈提取,经活性炭/氨基复合柱(Envi-Carb/NH_2)净化,经Rxi-5MS石英毛细管色谱柱分离,采用电子轰击源质谱检测,选择离子监测(selective ion monitoring,SIM)模式检测,外标法定量。结果扑草净在2~1000μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数r~2=0.9998。扑草净在5、10、20、50μg/kg 4种条件下,样品加标回收率在95.1%~107.9%,RSD在5.36%~7.77%(n=6),方法检出限为1μg/kg,定量限为4μg/kg。结论该方法操作简单,准确度与精密度较好,能快速简便地检测紫菜中扑草净的残留量。     

利用发光细菌进行褐牙鲆中氯霉素残留快速检测的研究

从青岛近海分离鉴定出1株鳆发光杆菌(Photobacterium leiognathi)YL,发光性质及其发光规律曲线的测定表明,鳆发光杆菌发光规律稳定,持续发光时间长,发光强度大。各种抗生素的抑菌圈试验得出,鳆发光杆菌YL对氨零素最敏感。在浓度0～1.0μg/L,氯霉素的浓度与鳆发光杆菌的抑制发光率有良好的线性关系。采用乙酸乙酯提取氯霉素的方法可以有效降低它族抗生素的干扰。褐牙鲆加标回收试验中,鳆发光杆菌检测氯霉素残留的方法检出限为0.14μg/kg。     

食品中嘌呤含量分布的研究进展

目前国内外嘌呤检测方法不统一, 导致一些文献报道的同种食品中嘌呤分布数值出入较大。本文对食品中嘌呤检测的前处理方法、定量方法以及嘌呤含量分布研究现状进行综述分析, 以期为嘌呤检测技术发展提供借鉴。对于指导消费者合理膳食, 降低痛风发病率具有重要意义。     

中国食品机械润滑剂的使用情况及风险分析

对中国食品加工企业食品机械润滑剂的使用和认知情况进行了调研,对国内外食品机械润滑剂相关的标准和法规进行了汇总和比较,对食品机械润滑剂和常用润滑油脂的成分组成以及可能的危害进行了风险初探和分析,论证了食品加工过程中合理使用食品级润滑剂的必要性和可行性,并对食品企业正确选择和使用食品级润滑剂和监管部门提出了建议。