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目的在大肠杆菌中表达并纯化人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的融合蛋白TB10.4-F1,检测其免疫原性。方法将重组工程菌TB10.4/pET28a/BL21和TB10.4-F1/pET30a/BL21经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白的表达形式;表达的融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1经His TrapTMHP层析柱进行亲和层析一步纯化后,免疫BALB/c小鼠。小鼠分为TB10.4(30μg/只)、TB10.4-F1(30μg/只)及PBS(200μl)组,分别于0、2、4周免疫小鼠,于每次免疫前1 d经尾部取血,分离血清,ELISA法检测小鼠血清中特异性的IgG水平;于末次免疫2周后摘眼球取血,分离血清,ELISA法检测特异性IgG水平及中和抗体滴度。结果表达的重组融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1的相对分子质量分别约13 300和59 600,均以包涵体形式表达,表达量分别占菌体总蛋白的53.9%和12%;纯化后的重组融合蛋白TB10.4和TB10.4-F1纯度分别可达95%和80%;与TB10.4组相比,TB10.4-F1组IgG水平明显升高,IgG1/IgG2a值明显降低,但仍大于1;TB10.4-F1组小鼠血清中RSV特异性中和抗体滴度可达log102.699。结论融合蛋白TB10.4-F1免疫原性强,能激发出较为平衡的Th1/Th2反应,并产生抗HRSV的中和抗体。融合蛋白TB10.4-F1有望成为预防HRSV感染的候选疫苗。 相似文献
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目的在大肠杆菌中融合表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)TB10.4蛋白与呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)F1蛋白。方法从MTB标准菌株H37Rv全基因组中扩增TB10.4(N/X)和TB10.4(N/B)基因,分别插入原核表达载体pET-28a和pET-30a中,构建重组表达质粒TB10.4(N/X)/pET-28a和TB10.4(N/B)/pET-30a;从F/18T/DH5α菌株中扩增F1(B/X)基因,与TB10.4(N/B)/pET-30a质粒连接,构建重组表达质粒TB10.4-F1/pET-30a;将质粒TB10.4(N/X)/pET-28a和TB10.4-F1/pET-30a分别转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的重组蛋白进行Western blot鉴定。结果重组表达质粒TB10.4(N/X)/pET-28a和TB10.4-F1/pET-30a经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组TB10.4和TB10.4-F1蛋白相对分子质量约为13 000和59 000,可与鼠抗His单抗特异性结合。结论成功在大肠杆菌中表达了重组融合蛋白TB10.4-F1,为进一步研究其免疫原性及保护性奠定了基础。 相似文献
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2006年12月12日.拉西瓦水电站工程建设进展顺利.整体工程进入大坝浇筑和机电安装阶段。黄河拉西瓦水电站位于青海省贵德县与贵南县交界的拉西瓦峡谷中.是黄河龙羊峡至青铜峡河段的第二个梯级电站.是黄河上装机容量最大的水电站.大坝为混凝土双曲拱坝,坝高250m,总装机容量420万kW(6×70万kW),总投资148亿元。[第一段] 相似文献
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应用有限时间热力学理论,建立了包含多变过程的内可逆往复式Brayton循环模型,由数值计算得到了多变指数n取不同值时的循环输出功率与压缩比、效率与压缩比、输出功率与效率之间的特性关系,分析了多变指数对循环性能的影响。结果表明:随着n的增加,当n k (k为绝热指数)时,γ_(P(opt))(最大输出功率对应的最佳压缩比)和P_η(最大效率对应的循环输出功率)减小,γ_(η(opt))(最大效率对应的最佳压缩比)和η_P(最大输出功率对应的循环效率)增加;当n k时,γ_(P(opt))和γ_(η(opt))减小,η_P和P_η减小。选取适当的多变指数,调整压缩比在γ_(P(opt))≤γ≤γ_(η(opt))范围内可得循环最优性能区域。 相似文献
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为了进一步强化执行力,提高工程建设管理水平。拉西瓦建设分公司制定下发了精细化工程管理实施方案,明确了各部门管理流程和职责。实施素质工程。坚持以人为本,实施全员培训,完善培训管理体系;根据工程建设和工作岗位的需要及员工队伍的实际状况,制定全员培训计划,明确培训的内容、目标、方式及时间; 相似文献
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在Balb/c小鼠模型上,评价双佐剂新型冠状病毒灭活疫苗的免疫效果及中和抗体水平.新型冠状病毒经Vero细胞培养、收获、浓缩、灭活、纯化等一系列步骤,制成灭活疫苗原液,以不同的配方剂量添加CpG佐剂和氢氧化铝佐剂后,免疫Balb/C小鼠,然后检测小鼠血清特异性抗体水平及中和抗体效价水平.结果表明:低、中剂量新冠抗原添加低、中剂量的CpG佐剂后,可以有效地提高S蛋白特异性抗体效价水平及中和抗体效价水平,效果远大于单独铝佐剂组;但CpG剂量如果过高,会有抑制效果.添加CpG佐剂后,可以使新冠病毒灭活抗原在较低的剂量下,就能产生较高水平的S蛋白特异性抗体效价及中和抗体效价. 相似文献
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