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TAT-SOD是TAT蛋白转导结构域与SOD的融合蛋白质。作者以2007年构建的产TAT-SOD重组毕赤酵母菌为出发菌株,通过摇瓶实验研究不同温度、初始pH、诱导剂浓度等因素对蛋白质表达的影响。通过比色分析法测定菌体浓度、超氧阴离子自由基清除法测定酶活、SDS-PAGE分析目的蛋白质TAT-SOD的浓度;并采用定量PCR法分析表达菌株的目的基因的mRNA变化规律,从而研究长期保藏重组毕赤酵母菌株表达TAT-SOD的适合性及其条件优化。研究结果表明,摇瓶发酵的最佳条件下(YPDM培养基,体积分数1.0%诱导剂浓度,诱导温度30.0 ℃,初始pH值7.0),发酵液上清酶活水平为753 U/mL,是未优化初始酶活水平的5.1倍,其中pH值优化使TAT-SOD表达水平提高到原始值的3.4倍。7.0的初始诱导pH值的mRNA水平是对照组pH 4.0的3.5倍。这些结果说明,长期保藏的重组毕赤酵母菌株仍然适合表达TAT-SOD,发酵条件会对毕赤酵母的TAT-SOD表达造成显著影响,影响表达水平的最主要因素是目的蛋白质的mRNA水平变化。 相似文献
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<正>国内传统卸船机接料板卷扬机的减速器和制动装置一般采用开式或半开式结构,即减速器最后一级为开式齿轮传动,制动装置为开式的抱闸结构。由于卸船机的工作环境为海洋性气候、高湿度、有粉尘,这种开式结构使卷扬机的使用寿命和安全性受到很大制约,且开式结构一般都比较大,很容易失去润滑保护,磨损较快,尤其是制动装置的开式结构,在恶劣的工作环境下,制动块极易磨损,导致制动失效,是该型卷扬机主要的事故隐患。因此,接料板卷扬机结构的改进 相似文献
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氧化应激是造成溃疡性结肠炎(UC)的重要原因之一,而超氧化物歧化酶(SOD)是调控氧化应激的基本分子。为了探究TAT-SOD脂质体对UC模型大鼠的口服治疗作用,作者利用乙醇沉淀和大孔树脂分离的方法,从基因重组毕赤酵母菌发酵液中分离纯化TAT-SOD;利用TritonX-114相分离法,去除其细菌内毒素;利用逆向蒸发法,制备TAT-SOD脂质体;利用DSS诱导构建UC模型大鼠,经灌胃给药,通过DAI评分、结肠密度、组织切片、血清SOD酶活、血清脂多糖含量,评价其治疗效果。结果表明:初步分离获得TAT-SOD,比活为11 003 U/mg;TritonX-114对内毒素的去除率为99.30%;成功制备TAT-SOD脂质体,经体外模拟消化液处理,其酶活回收率为81.80%;动物实验中,SOD给药组与模型组相比,DAI评分均显著降低(P<0.05),且TAT-SOD脂质体组的评分最好;结肠密度和组织切片观察发现,结肠组织损伤情况均明显改善,且TAT- SOD脂质体组的改善最好;血清中SOD酶活均显著提高(P<0.05),且TAT-SOD脂质体组的酶活最高;血清中LPS含量无显著差异。这些表明,TAT-SOD脂质体对DSS诱导UC模型大鼠有良好的口服治疗效果,有望为UC的辅助治疗提供新的选择。 相似文献
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在采用电动葫芦进行油罐吊装施工中,有时会因电动葫芦超载运行而导致电动葫芦的损坏。文章介绍了避免电动葫芦超载运行的方法,强调要精确计算吊点间距,均衡布置吊点位置, 密切监视电动葫芦链条的松紧程度,根据每层起吊高度和施工进度,适当确定中间停机检查次数。 相似文献
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DSQ型竖吊起重钳用于起吊和搬运直立放置的钢板及钢管等。文中介绍该系列的主要性能参数,结构和工作原理,设计要点和主要零件的受力分析。 相似文献
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