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采用6种不同孔径和亲疏水性的聚苯乙烯微球,通过吸附法固定化脂肪酶YS2071,筛选得到最佳载体,对固定化条件进行了优化并对其性能进行了研究。结果表明:粒径范围0. 6~1μm的氨基聚苯乙烯微球B具有最佳的固定化效果,在酶质量浓度5 mg/m L、p H 10、固定化温度20℃、振荡转速250 r/min、吸附时间6 h条件下,酶活回收率达到42. 82%;与YS2071脂肪酶游离酶相比,经固定化后的载体脂肪酶的温度稳定性、金属离子稳定性、有机溶剂稳定性、pH稳定性均明显增强; 25℃存储30 d后,固定化酶酶活保留率比游离酶酶活保留率提高了15. 09个百分点;固定化酶重复使用5次后,酶活保留率为63. 77%。 相似文献
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针对海洋微生物溶菌酶发酵工艺中参数实时测量,采用根据发酵过程中主辅变量关系的相关灵敏度矩阵绝对值最大元素排序选择辅助变量,运用非线性核脊回归(NKRR)算法预测主导参数的软测量方法.相关灵敏度矩阵反映主辅变量联系,根据发酵实际实验得到.改进直接优化的非线性核脊回归算法辨识发酵非线性系统,将空间Rn中主导变量和辅助变量非... 相似文献
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扇贝多肽(PCF)抑制紫外线诱导的HaCaT细胞凋亡 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了紫外线A和B辐射诱导的永生化角质形成细胞(HaCaT)凋亡的模型,采用四甲基偶氮唑盐法、琼脂糖凝胶电泳、流氏细胞仪、酶化学方法和蛋白印迹等技术,研究了扇贝多肽(PCF)抑制紫外线诱导HaCaT细胞凋亡的分子机制。实验发现,PCF可明显抑制紫外线A和B诱导的HaCaT细胞凋亡。1.42~5.68mM剂量范围内PCF剂量依赖性抑制紫外线诱导的HaCaT细胞内活性氧的生成,并能提高细胞内抗氧化酶活性,增强细胞总抗氧化能力,减少脂质过氧化产物的产生;同时,PCF也抑制细胞内JNK蛋白的磷酸化及Caspases-3蛋白的活化。通过加入ROS、JNK和Caspase-3抑制剂证实,PCF作为抗氧化剂减少了细胞内ROS的生成并提高了细胞内抗氧化酶活性,进而阻断了ROS→JNK→Cas-pase-3信号级联反应,抑制了紫外线辐射诱导的HaCaT细胞凋亡。 相似文献
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从东海的深海底泥中筛选出一株产脂肪酶的海洋细菌 EastSeaG5-1415,该菌为革兰氏阴性好氧菌,短杆状,0.9~1.3μm×1.5~3.8μm,无鞭毛,无芽孢,无色素,菌落光滑不透明,过氧化氢酶和氧化酶阳性,甲基红实验阴性,氧化葡萄糖产酸,可耐受10%的NaCl.此菌最适生长温度为18℃,最高生长温度为35℃,在0℃也能生长,是典型的嗜冷菌.菌株脂肪酸种类为C17:1(28.2%),C18:1 9c(49.7%),辅酶Q-8是其主要的异戊烯醌类,DNA中G C含量为45.2mol%.以16SrRNA同源性为基础构建了相关种属细菌在内的系统发育树,在系统发育树中,分离菌株 EastSeaG5-1415 与 Psychrobacter glacincola 在同一分支,二者的序列相似性为97.6%,DNA 杂交显示与 P.glacincola 最为相近,达到87%.结合形态和生理生化试验,将其鉴定为嗜冷杆菌 P.glacincola.同时对其所产脂肪酶的性质进行了初步研究.该菌所产碱性脂肪酶最适反应温度为35℃,在5℃时仍有较高酶活,酶活达到23%,最适 pH 值为9,属低温碱性脂肪酶. 相似文献
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某些纳米或超细粉体药物能呈现出与传统概念所不同的生物学功能。扇贝多肽可有效保护人真皮成纤维细胞对抗中波紫外线的辐射损伤;可明显抑制实验性氧化损伤小鼠胸腺细胞的凋亡。超细粉体抗氧化活性多肽比普通扇贝多肽具有更强的活性及给药途径。传统药物超细粉体的化学制备法中,多肽药物易失去活性,其制备工艺流程复杂。采用普通机械法温升高,使多肽药物颗粒氧化。临床经验说明,这种微米级颗粒的疗效较差。针对上述不足,我们利用具有独立知识产权的LCJ-Ⅱ型旋击机,对采用海洋酶生物工程技术从栉孔扇贝中提取的扇贝多肽普通粉体进行了真空低温下的超细粉碎加工方面的探索,并进行了扫描电镜观察与数据分析。 相似文献
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为提高大肠杆菌(E.coli)基因工程菌产Bohai sea-9145重组脂肪酶(Lipase,EC3.1.1.3)的能力,有效制备Bohai sea-9145脂肪酶。采用单因素实验、Plackett-Burman实验和Box-Behnken响应面设计实验,对该重组酶基因工程菌的发酵表达条件进行了优化。最终确定的最佳条件是:接种量为1.5%,培养基的初始p H为8.0,诱导剂IPTG的添加时间为3.5 h,终浓度为0.5 mmol/L,诱导时间为15 h,诱导温度为16℃,摇床转速为200 r/min,经优化后该菌的产酶量是优化前的9.72倍。 相似文献