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嵌合蛋白sTNFRⅡ-IgG Fc纯化与生物学活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立嵌合蛋白sTNFR IgGFc的纯化工艺 ,并对该蛋白的理化和生物活性进行研究。方法 嵌合蛋白sTNFRⅡ IgGFc经变性、复性后 ,用金属螯合层析进行纯化 ,纯化的蛋白进行配基结合实验和拮抗TNF活性检测。结果 该嵌合蛋白的纯度大于 95 % ,在体外能够二聚化 ,保留了sTNFRⅡ对hTNFα的结合特性 ,同单体sTNFRⅡ相比 ,对hTNFα的拮抗活性明显提高。结论 为进一步研究奠定了基础 相似文献
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论述了TENCEL纤维的特点及其混纺针织品在生产中容易出现的问题,并就其后整理进行了详细论述.主要论述了TENCEL织物的缩绒机理、缩绒过程中的3要素、缩绒过程中出现的主要问题和注意事项及其解决措施,并就TENCEL织物在整烫过程中需要注意的事项也进行了论述. 相似文献
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用乳酸菌表达有药用价值的生物学活性多肽,是当前国际上的研究热点之,对开发新的功能性食品具有广阔的前景.本文应用PCR方法将人干扰素IFN-α-2b基因与IgG Fc基因连接,并引入一段柔性连接肽,构建了融合蛋白基因IFN-IgG Fc,将融合蛋白基因克隆到原核表达载体pSC111 AE中,转化乳酸乳杆菌ATCC393进行诱导表达及鉴定,并研究了融合蛋白的生物学活性.结果表明,通过Western-Blot方法在表达上清液检测出干扰素融合蛋白,ELISA测定表明两段多肽能够保持各自的构象,基因工程乳酸菌表达的上清液可以诱导WISH细胞产生明显的抗VSV病毒的活性,其活性为1.71×103IU/ml.本文首次构建并在大肠杆菌和乳酸菌表达了IFN-IgG Fc融合蛋白,获得了能产生人干扰素的乳酸菌株,为基因工程乳酸菌及相关药物的开发研究奠定了基础. 相似文献
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近年来,社会经济得到了较为快速的发展,基建规模与高层建筑规模与数量不断扩大,对于地基的处理的要求也越来越高。CFG桩复合地基是较为新兴的地基处理技术,在施工工艺、施工周期、施工质量控制方面有着较为显著的应用优势,并且能够获得较好的地基承载能力,造价低、排水性能好,以及适用范围较广,在建筑工程中得到了较为广泛应用。因此,加强对CFG桩复合地基设计及应用分析、探讨,有着较为重要的现实意义。先是对CFG桩地基进行了相关概述,进而分析了其应用特点与优势,在此基础上对CFG桩复合地基设计及应用进行了详细分析与探讨。 相似文献
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分析WINDOWS环境中生成的位图文件的存储结构以及显示位图的基本原理,给出了在DOS环境中使用位图的基本方法。最后,给出了可以直接在DOS中编译执行的用于显示位图的C语言源程序 相似文献
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肿瘤的快速生长主要依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子(VEGF)在刺激血管内皮细胞生长和诱导血管生成方面起重要作用。肿瘤组织因血管含量丰富,VEGF特异性受体的数目远高于邻近正常组织,因此可以将血管内皮生长因子和某些细胞毒素构建为融合毒素,特异性定位于肿瘤部位,通过抑制血管的增生达到抑制肿瘤的目的。国外自二十世纪九十年代后期开展这方面研究,国内尚少见此类报道。本文就此类融合毒素的设计及临床研究等方面的进展作一综述。 相似文献
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目的将铜绿假单胞菌外毒素A(Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,PEA)基因突变为无毒性的ntPE基因,并在大肠埃希菌中进行表达。方法利用Primer Premier 5.0软件设计PEA基因引物及PEA基因第553位氨基酸缺失的突变引物,以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)基因组DNA为模板,PCR扩增PEA基因,插入pGEM-T载体中,构建重组克隆质粒pGEM-PEA,以其为模板,利用突变引物,扩增ntPE基因(无毒性PEA),插入pET-30a载体中,构建原核表达质粒pET-ntPE,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析。结果测序结果证明已成功获得突变基因;原核表达质粒经双酶切鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约69 000,主要以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%,可被小鼠抗PEA单克隆抗体特异性识别,具有较好的抗原性。结论已成功获得无毒性的PEA突变基因,为构建以PEA为蛋白佐剂的融合蛋白疫苗奠定了基础。 相似文献
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目的 制备抗SARS CoVIgY ,以期用于预防SARS CoV感染和阻止SARS传播。方法 用灭活的SARS CoV免疫产蛋母鸡 ,水稀释法提取IgY ,SDS PAGE检测IgY纯度 ,ELISA检测IgY抗SARS CoV的特异性和效价 ,中和试验检测中和效价。结果 灭活SARS CoV能诱导产蛋母鸡产生抗SARS CoVIgY。IgY纯度达 4 1 6 %。ELISA效价达 1∶2 0 4 8 mg蛋白 ,中和效价达 1∶5 12。结论 灭活的SARS CoV免疫产蛋母鸡能够产生高效价的特异性抗SARS CoVIgY ,并能中和SARS CoV病毒。 相似文献
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目的 为了获得大量重组人血管内皮细胞生长因子( Human Vascular EndothelialGrowth Factor, hVEGF),以研究其在心血管和药学领域具有的潜在药用价值。方法 用PCR方法扩增目的基因hVEGF165,连接到 pET-3a载体上,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,建立可高效表达的pET-3a/hEVGF165重组质粒,经IPTG诱导表达, Western blot检测表达产物的抗原性,通过 Mono Q阴离子层析和FPLG Superose12分子筛柱层析,进行初步纯化,用 MTT法检测其生物学活性。结果 pET-3a/hEVGF表达产物经纯化后,其纯度可达到90%以上,表达的rhEVGF165能 呈剂量依赖性地促进人静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖。结论组建了天然形式hEVGF165的大肠杆菌菌株,并摸索 出一套纯化工艺,为大规模生产重组hEVGF165奠定了基础。 相似文献
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<正> 我们应用中国预防医学科学院病毒学研究所组建的α-干扰素工程菌,观察了发酵温度与干扰素的表达。发酵罐为日本丸菱株式会社的MSJ-U_(13)型30升培养装置。温度、pH、空气流量、溶解氧、转数等主要参数自控调节。培养基为全综合发酵培养基。工程菌在30℃培养,3小时后开始采样测OD_(600A)并将样品转温至42℃摇床培养,观察生长动态与干扰素表达的关系。结果发现,工程菌生长至稳定期转 相似文献