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为实现人源磷脂酶A2的原核异源可溶表达,并对其进行纯化和初步的酶学性质分析。通过检索NCBI确定人源PLA2(PLA2G10),并将其构建于载体pET28a+上,并以麦芽糖结合蛋白(MBP)为促溶标签,成功构建载体pET28a-MBP-PLA2,转化E.coli BL21(DE3)后,经PTG低温诱导表达,SDS-PAGE鉴定后,确认其在上清中大量表达。根据蛋白的性质建立了一整套蛋白纯化工艺,包括Q柱洗脱,硫酸铵盐析,Phenyl柱纯化,Amylose柱纯化,分离纯化获得重组酶,SDS-PAGE测定该酶纯度大于90%。以卵磷脂为底物,酸碱滴定法测定其比活为127.04 U/mg,纯化得率48.8%,纯化倍数为10.3倍。酶学性质研究表明,该酶的分子量为56.5 kDa,最适反应温度为40℃,最适反应pH为8.0,是钙离子依赖酶,对PC亲和能力最强,Km值为12.2 mmol/L,Vmax为0.19 mmol/L/min。本试验建立的磷脂酶A2的异源表达、纯化体系,为其进一步的理论和工业研究奠定了基础。 相似文献
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为提高煤矸石的自动识别和分选效率,提出了基于支持向量机(SVM)和纹理识别煤矸石的方法.选取两种煤和一种煤矸石的图像作为样本,经过图像预处理及图像灰度和纹理特征分析后,发现灰度均值、灰度共生矩阵最大值、二阶矩、对比度、相关、熵为有效特征.在此基础上,采用了支持向量机来完成图像的自动识别过程,选取上述6个参数作为支持向量机的训练特征,实验结果表明,该支持向量机识别煤和煤矸石的成功率较高. 相似文献
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高耸避雷针模型如高架避雷针、电力塔、通信塔存在雷击保护区及散击区。采用电气几何模拟法,并结合实际的雷电监测数据,对避雷针的保护区及散击区半径进行分析和计算。保护区半径随被保护物高度增大而减小,散击区半径随避雷针高度的增加而增加,相对保护效果曲线有一峰值,其对应的避雷针高度即为最佳高度。 相似文献
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利用熔体淬冷法制备出不同速度下的4种合金薄带,研究了快凝对贮氢合金电化学性能的影响.合金的晶体结构采用XRD和SEM进行表征.结果显示,铸态和快凝合金都是单一的CaCu5相结构,快凝后的合金组织变得更加细密,晶粒变小而且更加均匀.电化学实验结果表明,快凝显著提高了合金的稳定性,但是降低了合金的放电容量和高倍率性能,铸态... 相似文献
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P2P网络技术是当今网络技术研究的活跃领域,可广泛应用于校园网络设计,而网络模型研究是网络技术研究的重要环节。本文在P2P网络中引入缓存技术的概念,提出了一种新型P2P网络模型,可应用于校园网络设计。 相似文献
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在能源互联网时代,区域供冷供热系统将由原本单一形式的热源向多种形式热源并存转变,尤其是可再生能源和未利用能源。不同形式不同品位的热源集成必将引起系统能量变化。能源总线系统是集成化规模化应用区域内可再生能源及未利用能源的多源多用户能源系统。本文针对能源总线系统相对常规分散系统而言特有的多源多用户特征进行系统混水和热回收过程的变分析,将能源总线系统抽象为一系列工作在高温热源和低温热源之间的劳伦兹循环的集成,通过建立能源总线系统与常规分散系统的理想热力学模型,找到能源总线系统混水和热回收过程变的规律及影响因素。结果表明:系统的变化与各子系统低温热源进出口温度、高温热源进口温度以及高低温热源质量流量比相关,不同的设计参数会导致混水过程能量发生增加或者减小,亦或不变。通过分析得到热回收过程影响源侧总线热量变化的相关参数并找到热量变化规律,并得到最佳总线供水温度TEBS1的确定方法。 相似文献