基于内参的副溶血性弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立

目的建立基于内参的副溶血性弧菌实时荧光定量PCR方法,快速检测样品中的副溶血性弧菌。方法根据Gen Bank已公布的副溶血性弧菌基因组序列,筛选特异性靶基因,设计特异性引物探针,优化反应体系,并在体系中加入内参(IAC),通过标记不同荧光基团的Taq Man探针来监测IAC,进而实时监控整个PCR反应。按照5~50 cfu/25 g的细菌量人工污染样品,以评价所建立反应的体系。结果以副溶血性弧菌基因组DNA为模板,最低检测限为1 pg/μl;以10倍梯度稀释的菌液经水煮法提取的DNA为模板,最低检测限为4×102cfu/ml;以含有gyr B的质粒为模板,最低检测极限可以达到100 copies/μl;建立gyr B和gyr B-IAC标准曲线,Ct值与模板拷贝数均呈良好线性关系(r2=0.999);人工污染初始菌量为7 cfu/25 g时,样品中副溶血性弧菌增菌6 h即可检出。结论本研究所建立的gyr B-IAC实时荧光定量PCR方法,既能有效检测食品中副溶血性弧菌,又能实时监测PCR反应过程,有效防止"假阴性"的发生,结果可靠,有利于实现海产品中副溶血性弧菌实时荧光定量PCR检测方法的标准化。     

同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分实时荧光聚合酶链式反应方法的建立及应用

以鸡转化生长因子β-3(transforming growth factor beta-3,TGFB3)基因、猪朊蛋白(prion protein,PRNP)基因和鸭、牛生长激素(growth hormone,GH)基因为靶基因,设计合成特异性引物和TaqMan探针,通过对实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系和反应条件的优化,建立同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法。结果表明:本研究所建立的方法只在鸡、鸭、猪或牛源性成分存在时才产生特异性扩增曲线,表明该方法具有良好的特异性;且对鸡、鸭、猪和牛源性成分的最低检测质量浓度分别可达到10.0、1.0、10.0、10.0 pg/μL,具有良好的灵敏性;应用建立的检测方法对市售34份速冻食品鸡、鸭、猪和牛源性成分进行同时检测,能够实现对速冻食品中4种动物源性成分的有效检测,进一步分析发现,15份速冻食品源性成分测定结果与外包装标注成分不一致。本研究所建立的同时检测速冻食品中鸡、鸭、猪和牛源性成分的实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性,且操作简单、适用范围广,能够满足日常检测需求。     

ARIZ算法在煤层气开采技术创新中的应用研究

针对常规水平井钻进技术对松软、低渗的煤层难以奏效,导致煤层气开采效率不高、经济效益低等问题,文章基于ARIZ算法的基本原理和方法步骤,结合标准解和小人模型,提出了一种水力冲刷钻进目标煤层的煤层气开采技术创新方法。同时给出了具体的装置设计方案,为我国松软、低渗透性煤层的煤层气开采提供一种新思路。     

基于SEM的煤矿生产物流系统资源冗余评价

煤矿资源冗余有利于提高煤矿生产物流系统的安全性和效率性。论文在建立煤矿生产物流系统冗余资源评价指标体系的基础上,利用结构方程构建了资源冗余评价模型,通过实证分析得出人力资源冗余和财务冗余对煤矿生产物流系统安全性和效率性均具有正向影响的关系,设备冗余对安全性具有正向影响、对效率性具有负向影响的关系,以期为煤炭生产企业保证合理的资源冗余提供理论依据。     

小学英语中的情趣教育

情趣教育实质是一种情感教育，是师生在教学过程中，共同去创造精神生活的过程，我们体会到：英语教学不仅是一种语音、语调、语句的传授和训练，而是一种温馨的情感交流、智能的开发和社会性交往能力的早期培养。要想学好英语，仅仅死记硬背是绝对行不通的，所以，在小学英语课堂中引用情趣教育就显得尤为重要。     

建立健全审计机构的一点设想

介绍国内、外审计情况。国内目前审计机构有４种领导形式：①总经理领导；②董事会领导；③双重领导；④监事会领导。国外企业不仅设置了较健全的内审机构，而且配备了与企业规模相适应的内审人员。主要介绍了美国等国的具体情况。针对我国内审工作发展不平衡的状况，建议将企业分为３类，再根据各自的情况制定具体的目标。     

某建筑暖通空调设计实践

介绍某厂职工活动中心的采暖，空调和通风系统的设计思路与设计实践。     

应用专家PID实现某矿山半自磨机的控制

为了解决国内某矿山[?]8.8 m×4.8 m型半自磨机的自动控制问题，采用专家PID控制系统进行了系统控制设计研究。结果表明：①影响半自磨机工作状况的因素较多，主要包括矿石性质、磨矿介质、给矿速率、磨矿浓度、衬板和格子板的状态等；物料充填状态可通过半自磨机的功率、轴压和磨音来判断，而料位状态控制可通过调节给矿量、给水量、加球量实现。②专家PID算法与传统PID的算法有明显的优势，其本质上是采用非线性设计手段，将专家经验引入控制策略的制定中，更适合复杂对象控制策略的实施，较好地克服常规PID对非线性系统适应性差、难以克服异常扰动以及对滞后时间常数难以确定等缺点。③在充分考虑了半自磨机工作特点的基础上，设计的专家PID控制系统可将半自磨机的轴压、功率稳定在设定值范围内，同时能根据半自磨机给矿量、给水量、顽石量、磨音等参数的综合分析，判断出半自磨机处于较为稳定的工作状态。     

分形在直流系统故障检测中的应用

针对直流系统中环网对接地故障检测的影响，提出利用分形的思想，初探性研究分形对环网故障的识别。在以低频注入法为基础的直流系统故障检测中，利用分形维数和凹凸度参数惟一确定的二维平面上点的位置，来识别不同情况的接地故障。该方法弥补了用单一维数识别故障的不足。给出了该方法的具体步骤，通过大量的仿真证明其有效性。     

以玉米为原料开发多菌种微生态制剂的研究

以玉米为基础原料,采用全酶法糖化工艺进行液化、糖化,然后接种适宜的乳酸菌进行发酵。发酵后的固形物通过真空冷冻干燥制得乳酸菌活菌制剂。本研究确定了最佳发酵工艺,促生长物质及冻干保护剂。