宇佐美曲霉木聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达与优化

从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001中克隆木聚糖酶基因xynⅡ,将不含原酶信号肽编码序列的xynⅡ以正确的读码框克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建成重组质粒pET-Xn并转化大肠杆菌,得到重组工程菌KN21。通过对其进行IPTG浓度、温度等诱导培养条件的优化后,胞内重组木聚糖酶活力最高达到81.77U/mg。对重组木聚糖酶进行酶学性质研究,显示其最适温度为45℃,最适pH为4.5。     

里氏木霉固体发酵生产纤维素酶的研究

以里氏木霉突变株ＲＭ－２７为纤维素酶生产菌，采用固体发酵法，２９℃发酵１４４小时，其滤纸酶活和β－葡萄糖苷酶活分别为６００ｍｇ和１１５ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。并系统研究了各种营养成份和培养条件对ＲＭ－２７菌株产纤维素酶的影响。最适发酵培养基为稻草杆或小麦杆７０ｇ、麸皮３０ｇ、硫酸铵３．０ｇ、玉米浆２．０ｇ，水２００ｍｌ，自然ｐＨ。酶反应最适温度６０￣６５℃，最适ｐＨ为５．０。酶ｐＨ稳定性较好，在ｐＨ     

β-甘露聚糖酶高产菌株选育及产酶条件的研究

从实验室保藏的曲霉菌株中,通过筛选和紫外线诱变,获得了一株遗传性状稳定的酸性β甘露聚糖酶高产菌株Aspergillus usamii YL0178。在单因素试验基础上,采用Plackett Burman和Box Behnken实验设计确定的最佳产酶培养基组成和培养条件为:m(麸皮)∶m(豆饼粉)=7∶3,魔芋粉2%,KH2PO40.2%,MgSO40.1%,CaCl20.1%,NaNO31.5%(均相对于固体物料),液固比为1.2∶1,自然pH;31℃静置培养72h,期间翻曲2～3次。最高酶活可达3362IU/g(干曲)。     

脂肪酶凝胶电泳活性条带印迹技术

在固体琼脂平板测定法的基础上,以圆弧青产ＰＧ３７所产碱性脂肪酶为实验材料,试验了酶活性蛋白条带印迹方法,该方法根据脂肪酶在一定条件下分解甘油酯所释放出来的游防脂肪酸使指示剂维多利亚蓝变色的原理,将具有脂肪酶活性的蛋白条带在电泳凝胶中被原位显示出来,以区分酶活性条带和其它蛋白质条带。用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得ＰＧ３７碱性脂肪酶的分子量为２７５００Ｄａｌ。     

25L发酵罐的设计与应用

本文介绍了２５Ｌ全自动发酵罐及其配套装置的设计与制造。同时，列举了糖化酶和柠檬酸等菌种在该装置上发酵试验的例了，试验结果良好，是摇瓶发酵试验结果应用到工业大生产上不可缺少的中间试验环节。     

小型中空超滤装置的设计与应用

本文介绍了小型中空纤维超滤装置的设计与制造。同时，列举了碱性脂肪酶的超滤浓缩及超纯水的终端除菌处理等例子，应用试验效果良好，是科研院校及工厂实验室用于物质分离、浓缩、提纯等一种不可缺少的膜分离装置。     

碱性脂肪酶提取工艺的研究

采用０．１ｍ＾２的不锈钢板框对发醇液进行过滤，在超滤过程中料液ｐＨ值应保持在７．５～８．０之间，湿度控制在１３℃以下。超滤前滤液加入０．０５％的苯甲酸钠作防腐剂，并加一定的明矾，提高过滤速度，最佳的操作条件下，酶的提取总收率在７０％以上，脂肪酶粉活力单位在４．０×１０＾４Ｕ／ｇ。     

碱性脂肪酶中空超滤的中试

采用自制的８．０ｍ＾２中空纤维超滤装置对圆弧青霉所产碱怀脂肪酶进行中试规模的浓缩试验。研究了各种因素对碱性脂肪酶提取收率的影响，同时，对酶液超滤浓缩后用硫铵沉淀的成本进行了核算，为今后工业化生产设计提供了必要的参数及操作条件。     

蛋白酶对脂肪酶活性影响的研究

为了弄清洗涤剂中碱性蛋白酶及金属离子对碱性脂肪酶稳定性的问题，对加酶洗涤剂中的碱性蛋白酶及金属离子对圆弧青霉PG37所产碱性脂肪酶的活力影响进行了研究。在碱性脂肪酶溶液中分别添加不同量的碱性蛋白酶和金属离子，并在25℃保温30min，分别测定保温前后的脂肪酶活力。结果表明，在一定浓度范围内的蛋白酶对PG37碱性脂肪酶活力的影响较小，可同时应用于洗涤剂中。金属离子对脂肪酶活力无明显影响，甚至在一定浓度范围内对酶活有激活作用。总之，PG37菌株所产碱性脂肪酶具有良好的酶学特性，非常适合于洗涤剂用酶。     

茶树菇多糖免疫调节作用的研究

以实验小鼠的溶血空斑数、T细胞刺激指数、自然杀伤细胞活性、巨噬细胞的吞噬指数等为指标，检测茶树菇多糖对实验小鼠免疫功能的影响。研究结果表明：茶树菇多糖可提高空斑形成细胞的数量、促进ConA诱导的T细胞增殖反应、增强T细胞介导的迟发型超敏反应、促进巨噬细胞的功能。茶树菇多糖能同时促进实验小鼠的非特异性免疫应答和特异性免疫应答，可提高实验小鼠的免疫功能。